专利名称:植物的胁迫耐受和延缓衰老的制作方法背景技术:大部分高等植物在其生命周期的某些阶段都会遇到至少是暂时性的相对含水量的降低,由此进化出了多种干燥保护机制。但是如果缺水的时间延长可能会对植物的生长和发育产生很大影响。由于干旱、寒冷或盐胁迫导致的含水量的降低会对植物细胞造成不能恢复的损伤,这在农业上限制了植物生长和农作物的产量。植物对于干旱、盐分和寒冷的反应是产生各种形态上和生理上的变化。虽然我们对于植物对这些胁迫的耐受机制的认识还是不完整的,但认为植物激素脱落酸(ABA)可能是环境刺激和植物反应之间的基本调节剂。在对缺水发生的反应中ABA水平升高,外源给予ABA可模仿许多被水胁迫诱导的常见反应。ABA的合成可以引起叶片气孔的关闭,因而减少蒸腾作用造成的水分丧失。那些可以将ABA转换为细胞反应的基因的鉴别使得可以利用这些调节剂增强农作物对于干燥的耐受性。理论上,这些ABA信号传导基因可与适当的控制元件一起使植物生长和发育达到最佳。因此,这些基因不仅使得可以对农作物进行基因重组以耐受暂时性的环境损伤,它们还可以拓宽传统农作物生长的环境。除此之外,对控制植物生长和发育的遗传机制还所知甚少。能进一步影响其它代谢过程例如衰老和植物生长习性的基因对于各种农作物和园艺植物都是非常有用的。发明概述本发明涉及含有SEQ ID NO1或SEQ ID NO172的分离的编码法尼基转移酶的核酸。本发明的核酸还包括编码SEQ ID NO1或SEQ ID NO172的功能性等同物或其片段的杂交序列。本发明还涉及用这些核酸编码的产物的抑制剂增强植物对于干旱的耐受性的方法。进一步,本发明涉及对于光合生物中的调节功能的控制;例如,控制这些生物的生长习性,开花,种子生产,种子萌发,和衰老。本发明还涉及通过改变分离的或重组的编码法尼基转移酶(Ftase)或其片段或其功能性等同物来增强植物对干旱或胁迫的耐受性的方法。本发明还包括可与编码Ftase的基因(ERA1)杂交的核酸,其中这种杂交序列编码Ftase蛋白的功能性等同物。本发明还涉及增加植物的干旱耐受性的方法,通过对ERA1基因和其功能性等同物进行遗传操作从而提高农作物的胁迫耐受性。失去ERA1基因功能可增加成熟植物对于干旱的耐受性。失去Ftase活性的era1突变体的特性,例如,证明了法尼基化的抑制可增加植物对于ABA的反应。进一步,本发明涉及在光合生物中通过抑制法尼基转移酶活性抑制衰老。所得到的光合生物可在更长的时间内保持绿色和组织的发育能力。因此,本发明的一部分是提供了更绿的植物并减少了衰老。在另一个实施方案中,提供了改变植物生长习性和开花诱导的方法。在特定的环境条件下丧失ERA1基因功能会导致植物上生长的侧枝数目减少,并且每次花期的开花数目增加。本发明还提供了通过向植物细胞中引入能抑制含有CaaX基序的多肽的法尼基化的化合物生产转基因植物的方法,其具有改变的表型,例如对于胁迫(例如缺水,增加的生物量,增加的产量)的耐受性增加,延缓衰老或增加对于ABA的敏感性。抑制法尼基化是指该化合物抑制法尼基化过程的三个步骤中的一个或多个步骤。一方面所述化合物抑制法尼基转移酶,异戊二烯蛋白酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶的表达或活性。所述化合物还可以是反义法尼基转移酶核酸或法尼基转移酶双链RNA抑制发夹核酸。在一些方面所述核酸可操作地与启动子例如组成型启动子,ABA诱导型启动子,组织特异性启动子或保卫细胞特异的启动子相连。典型的反义核酸是与SEQ ID NO1,14,40,43,80-85或172互补的20个或更多的连续核酸。所述反义核酸还可以包括SEQ ID NO36,41,44或54-64。在各个方面,所述化合物是编码法尼基转移酶,异戊二烯蛋白酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶或其片段的核酸。另外,所述化合物可以是编码突变的法尼基转移酶,异戊二烯蛋白酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶或其片段的核酸。突变是指所述多肽缺少至少一种野生型多肽的至少一种活性,例如,亚基相互作用,底物结合或酶催化。突变的多肽形成二聚物,例如异二聚体。例如,突变的法尼基转移酶β多肽与法尼基转移酶α多肽形成二聚物。优选的,所述多肽的长度少于400,350,314,300或200个氨基酸。例如,所述化合物包括SEQ ID NO1,14,40,43,80-85或172。在另一个方面,所述化合物是编码CaaX基序的核酸或编码与启动子可操作的连接的CaaX基序的核酸。本发明还包括由本发明的方法产生的植物和由所述植物产生的种子,其中该种子产生具有改变的表型的植物。本发明还涉及可用于植物细胞的基因工程的调控序列,提供了一种控制与这种新的调控序列相连的DNA序列在组织中的表达模式的方法。附图简述图1A-1C显示了ERA1基因的核酸序列(SEQ ID NO1),其中内含子下面有下划线,起始密码子(ATG)为核苷酸第1-3位。图2是ERA1蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO2)。图3A-3B显示了ERA1启动子的核酸序列(SEQ ID NO3)。图4是来自拟南芥(Arab.)的β亚基法尼基化域(SEQ IDNO2)与来自豌豆(SEQ ID NO4),酵母(SEQ ID NO5)和鼠(SEQ ID NO6)的β亚基法尼基化域排列在一起的氨基酸序列。与拟南芥序列相同的残基加点表示。虚线表示空白。拟南芥基因的氨基酸位置如右边所示。图5是在极度干旱的条件下era1转化的拟南芥植物(右边)与野生型(对照,即天然的)植物(左边)比较的照片。图6是具有失活的或突变的Ftase活性的拟南芥植物(M.Columbia,era 1-2)和对照(M.C.对照,era 1-2对照)的水含量比较图。图7是具有失活的或突变的Ftase活性的拟南芥植物(M.Columbia,era 1-2)和对照(M.C.对照,era 1-2对照)的水丧失速度比较图。图8A-8E是对照(野生型)和era-2突变植物的老化叶片的比较。图9A-9C是对照(野生型)和era-2突变植物的老化叶片的转录水平的比较。图10是pBI121反义FTA载体构建体的图示图11是抗FTA转基因拟南芥的基因组Southern杂交分析的图示。图12是五种35S-抗-FTA拟南芥系(T3植物)的Northern分析的图示。图13显示了用抗FTA抗体检测FTA多肽的Western表达分析。图14是一组图,显示了ABA对于幼苗生长和发育的作用。FTA反义转基因幼苗显示出增强的ABA敏感性。图15显示了ABA对幼苗生长和发育的作用。图16显示了停止供水8天以后野生型Columbia(A)和拟南芥的四种反义FTA转基因系(B,C,D,E)的照片。图17是基于ClustalW分析(显示相同性的百分数)的不同植物种类的FTA核酸(A)和氨基酸(B)序列的同源比较。图18是基于ClustalW分析(显示相同性的百分数)的不同植物种类的FTB核酸和氨基酸序列的同源比较。图19是水胁迫期间转基因特性的图示。图20是在水胁迫处理6天并恢复6天后枝条鲜重或生物质积累的图示。图21是在最佳条件或进行6天的水胁迫处理后得到的种子产量(g)的图示。图22是在最佳条件下的蔬菜生长的图示,显示为第一次开花6天后枝条的鲜重。图23是同时进行生物胁迫和干旱胁迫处理对种子产量的影响。图24是在甘蓝型油菜的转基因系的检测中PCR产物的凝胶电泳分析的代表性示例。图25是下述载体构建体的示意图A)pBI121-AtCPP,B)pBI121-反义-AtCPP,C)pBI121-HP-AtCPP。图26是由ClustalW分析确定的(A)核酸和(B)氨基酸序列相同性的图示。图27是带有pBI121-AtCPP构建体的转基因拟南芥T1种系的典型的Southern blot扫描图。图28是带有pBI121-HP-AtCPP构建体的转基因拟南芥T3种系的典型的Southern blot扫描图。图29是带有pRD29A-AtCPP构建体的转基因拟南芥种系系的典型的Southern blot扫描图。图30是带有pRD29A-HP-AtCPP构建体的转基因拟南芥种系系的典型的Southern blot扫描图。图31显示了在几种pBIl21-AtCPP转基因种系中AtCPPmRNA转录(实心条)和AtCPP蛋白水平(点状条)的相对表达。图32显示了分类为ABA敏感的,ABA中度敏感的或ABA不敏感的系的百分率。在含有1M ABA的琼脂平板上生长21天后得到幼苗。在叶片和幼苗发育21天时得到三十六个pBI121-AtCPP过表达构建体种系。在叶片和幼苗发育21天时得到三十二个35S-HP-AtCPP负调控构建体种系。每个种系的获得都是通过在每个平板上接种大约100个种子,对幼苗进行计数,记录为每个平板的不敏感幼苗的百分率。每个种系都表示为野生型(Wt)的百分率。各个种系都根据它们与Wt之间的关系被分类为敏感的(少于Wt的1%)实心条,中度的(Wt的1-50%)斜纹条或不敏感的(多于Wt的50%)的点状条,将每一类的百分数绘制为柱状图。图33显示了在两周龄的幼苗中野生型和pRD29A-HP-AtCPP转基因种系对不同浓度的ABA的反应。图34显示了含有pBI121-AtCPP过表达构建体,(SEQ IDNO4)的转基因植物的分析。水胁迫处理4天后每克出芽干重的水分丧失。标有星型的系是具有强烈的ABA敏感性的。标有三角的系是具有适度ABA敏感性的。每一条都代表了8个重复的平均值。在条上标有实心点的系是与对照具有显著性差异的,p=0.05值。图35显示了在最适水条件下生长的pBI121-AtCPP的转基因拟南芥系的种子产量,单位为克。图36是在最适供水条件并且在生物胁迫条件下生长的pBI121-AtCPP的转基因拟南芥系的生长和产量的柱状图。产量表示为野生型的百分数,莲座叶数目,莲座叶鲜重和出芽干重。图37是琼脂平板上生长的pBI121-AtCPP的转基因拟南芥种系的生长照片。可以看到根生长的变化。图38显示了在最佳供水条件下生长的pRD29A-HP-AtCPP的转基因拟南芥种系的生长的柱状图。显示了莲座型叶数目,莲座型叶干重和枝条干重。图39是ΔN90AtFTB拟南芥植物的Northern blot的照片。本发明的上述内容和其它目的,特征和优点从下述更具体的对本发明的优选实施方案的描述中可以明显看出,在附图中相同的参考字符在不同的图中都指相同的部分。附图不必完全按比例,其重点在于对本发明的原理举例说明。发明详述本发明涉及显示出改变的表型,例如增加的对于胁迫的耐受性,延迟的衰老,增加的ABA敏感性,增加的产量,增加的生产力和增加的生物质的转基因植物,以及通过将能抑制含有CaaX基序的多肽的法尼基化的化合物引入植物细胞产生所述植物的方法。蛋白的法尼基化,向蛋白质上加入C末端的15碳的链以及后续的过程是一个三步的酶反应,包括法尼基化,蛋白水解切割和甲基化。首先,法尼基转移酶将C末端的15碳链加到CaaX末端基序的保守性半胱氨酸残基上,其中\"C”是胱氨酸,\"a”是脂肪族氨基酸,\"X”是任何氨基酸。其次,后面三个氨基酸残基(aaX)被异戊二烯蛋白酶切割。最后,修饰的半胱氨酸被甲基化酶甲基化,产生蛋白法尼基化途径的最终活性产物。申请人已证明α和β法尼基转移酶在植物细胞中的过表达和负调控(即法尼基化的第一步)导致植物具有改变的表型,例如但不限于干旱耐受和延迟衰老。申请人还证明异戊二烯蛋白酶基因在植物中的过表达和负调控(即法尼基化的第二步)也导致植物显示出改变的表型,包括但不限于干旱耐受和对于生物胁迫或非生物胁迫的增加的抗性。这些结果一起证明了下述猜想,植物细胞中法尼基化途径中的任何酶(法尼基转移酶,异戊二烯蛋白酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶)表达的改变会导致植物显示出改变的表型。本发明还提供了从例如拟南芥(At)甘蓝型油菜(Bn)和大豆(Gm)中分离的新的法尼基转移酶(即α和β),(Ftase)和CaaX异戊二烯蛋白酶(CPP)核酸序列。本发明还提供了法尼基转移酶和CaaX异戊二烯蛋白酶反义核酸和含有这些核酸的构建体。这些序列统称为\"PPI核酸”,\"PPI多核苷酸”或\"PPI反义核酸”,相应的编码多肽称为\"PPI多肽”或\"PPI蛋白”。除非另外指出,\"PPI”指本文公开的任何新的序列。下面的表A总结了本发明的核酸和多肽。表A本发明还涉及分离的核酸和由这些核酸编码的蛋白质,它们可以改变植物的生长,繁殖和衰老。特别是,本发明的构建体包括分离的编码法尼基转移酶(Ftase)多肽的含有SEQ ID NO1或172或其功能性等同物或片段的核酸,其中所述Ftase多肽或蛋白或其片段由这些核酸编码。特别是,本发明涉及一种蛋白质,其序列是SEQ ID NO2或SEQ ID NO177。本发明进一步包括核酸构建体,该构建体包括与分离的含有SEQ ID NO1或172或其功能性等同物或其互补序列的核酸可操作连接的启动子(ERA1启动子)。当引入到植物中的时候,ERA1启动子在植物的保卫细胞中受到调控,能通过气孔影响水分的丧失。该启动子由含有SEQ ID NO3的核酸组成(图3)。含有这些构建体的转基因植物,种子,植物细胞和组织也是本发明的一部分。相应地,根据本发明的一个方面,提供了一种在启动子控制下产生基因产物的方法,所述启动子在保卫细胞中主要是通过在植物细胞中表达编码该基因产物的基因发挥作用的,包括以下步骤用含有包含SEQ ID NO3或其功能部分的调控区域的DNA构建体转化植物细胞,其中DNA含有编码基因产物的结构基因,3’未翻译区域含有聚腺苷酸化区域;从细胞再生植物,光合生物或组织培养物;设定植物,光合生物或组织培养物的培养条件使启动子能够诱导结构基因的转录并表达该基因产物。在本文中,术语\"调控区域”或\"启动子”指一种DNA序列,其通常处于结构基因编码序列的上游(5’),可以通过提供RNA聚合酶和/或其它在正确位点起始转录所需因子的识别和结合位点来控制编码区域的表达。术语\"功能部分”或\"功能片段”指本发明的启动子的短序列,它保留了诱导ERA结构基因在Ftase蛋白活性条件下转录的能力。本文所述的构建体和方法可以用于所有类型的植物以及其它光合生物,包括但不限于被子植物(单子叶和双子叶植物),裸子植物,孢子植物或营养性繁殖植物以及藻类,包括蓝藻(蓝绿藻)。特别优选的植物是那些具有经济价值的作物,例如玉米,小麦,棉花,水稻,油菜,甘蔗,甜菜,向日葵,马铃薯,番茄,花椰菜,胡萝卜,莴苣,苹果,李子,橙子,柠檬,玫瑰等等。进一步,本发明的构建体和方法可以用于任何植物部分,原生质体,或组织培养物,其中所述组织来自光合生物。术语\"植物部分”是包括植物的一部分,其能产生再生植物。优选的植物部分包括根和芽及其分生组织部分。本发明还包括其它植物部分叶,花,种子,上胚轴,下胚轴,子叶,子叶节,外植体,花粉,胚珠,分生组织和胚胎性组织,原生质体,等等。转基因植物可以从任何这些植物部分再生,包括组织培养物或原生质体,也可以是外植体。根据植物的种属不同使用的方法也不同。本发明涉及含有分离的核酸(DNA和RNA)的组合物和构建体,所述核酸编码光合生物的Ftase或其部分。本发明进一步涉及含有编码Ftase启动子的分离核酸的组合物和构建体。特别是,分离并测序了编码拟南芥的Ftase的β亚基的ERA1基因以及能调控ERA1基因的转录的调节序列。本发明还包括编码光合生物的Ftase的核酸,以及这些核酸的同源物或类似物。本发明进一步涉及使用分离的和/或重组的核酸(DNA或RNA)的方法,所述核酸能与编码Ftase蛋白或多肽的核酸杂交,例如具有SEQ ID NO1或172或其部分,例如含有编码功能性Ftase蛋白所需的最小核苷酸的部分的核酸;或者所述核酸能够编码具有Ftase的氨基酸序列的多肽,例如SEQ ID NO2或SEQID NO177,或者能够编码其功能性等同物;例如与SEQ ID NO2或SEQ ID NO177具有至少80%的序列相似性的多肽,当其引入到植物细胞中的时候,能以与SEQ ID NO1或172相同的方式利于光合生物的生长习性,种子生长和代谢。Ftase的功能性等同物与SEQ ID NO2或SEQ ID NO177具有至少80%的氨基酸序列的相似性,具有相似的特性,或者具有基本上相同的作用方式。能与编码Ftase多肽例如SEQ ID NO2或SEQ ID NO177的核酸杂交的核酸可以是双链或单链的。与DNA例如具有序列SEQ IDNO1或172的DNA杂交包括与所示链或其互补链杂交。在一个实施方案中,Ftase多肽例如SEQ ID NO2或SEQ IDNO177与其功能性等同物之间的氨基酸序列相似性百分率至少是大约60%(≥60%)。在优选的实施方案中,Ftase多肽与其功能性等同物之间的氨基酸序列相似性百分率至少是大约75%(≥75%)。更优选地,当比较连续氨基酸的时候,Ftase多肽与其功能性等同物之间的氨基酸序列相似性百分率至少是大约80%,更优选地,至少90%。符合这些标准的分离的和/或重组的核酸包括具有与天然ERA1基因序列或其部分,或天然基因的变体序列相同的核酸。这种变体包括由于插入,删除或取代一个或多个核苷酸而有所不同的变体,其中一个或多个核苷酸被修饰的修饰核酸(例如DNA或RNA类似物),以及含有一个或多个修饰核苷酸的变体。这种核酸,包括DNA或RNA,可以用高度严谨条件下或中度严谨条件,例如允许具有非互补序列的核酸的杂交的条件下的杂交进行检测和分离。杂交的\"严谨条件”是本领域的术语,指温度和缓冲液的条件可以使得特定的核酸与另一种核酸杂交,其中第一种核酸与第二种完全互补,或者第一种和第二种核酸具有一定程度的但不是完全的互补。例如,特定的高度严谨条件可以用于区分完全互补的核酸与互补性较低的核酸。核酸杂交的\"高度严谨条件”和\"中度严谨条件”在Current Protocols in MolecularBiology(Ausubel,F.M.et al.,eds.,Vol.1,含有直到附录29的附录,1995)的第2.10.1-2.10.16页有解释(特别是参见2.10.8-11),在此引入其作为参考。确定杂交严谨性的精确条件不只取决于离子强度,温度和不稳定试剂例如甲酰胺的浓度,还取决于各种因素例如核酸序列的长度,碱基组成,杂交序列之间错配的百分率以及在其它非相同序列种该序列的子集出现的频率。因此,可以根据经验确定高度或中度严谨条件。高度严谨杂交过程可以是(1)用低离子强度和高温度进行洗涤,例如0.015M NaCl/0.0015M柠檬酸钠,pH7.0(0.1X SSC),以及0.1%十二烷基硫酸钠(SDS),温度为50℃;(2)在杂交中使用50%(体积/体积)甲酰胺以及5X Denhardt′s溶液(0.1%重量/体积的高度纯化的牛血清清蛋白/0.1%重量/体积的Ficoll/0.1%重量/体积的聚乙烯吡咯烷酮),50mM磷酸钠缓冲液,pH6.5和5X SSC,温度为42℃;(3)用50%甲酰胺,5X SSC,50mM磷酸钠(pH6.8),0.1%焦磷酸钠,5X Denhardt′s溶液,超声处理的鲑鱼精子DNA(50pg/ml),0.1%SDS,和10%硫酸右旋糖酐,42℃进行杂交,在42℃用0.2X SSC和0.1%SDS洗涤。中度严谨条件与其类似,除了杂交中用25%甲酰胺代替50%甲酰胺。通过从没有观察到杂交的严谨水平开始改变杂交条件,直至达到首次观察到杂交的严谨水平,可以确定给定序列与样品中最相似序列杂交的条件。典型的条件如Krause,M.H.and S.A.Aaronson(1991)Methods in Enzymology,200546-556中所述。而且特别参见Current Protocols in Molecular Biology(supra)的第2.10.11页。其中描述了如何确定中度或低度严谨条件的洗涤条件。洗涤步骤中通常将条件设置为能确定杂交互补的最低水平。通常,对于任何SSC浓度来说,从只有同源杂交发生的最低温度开始,杂交核酸之间1%的错配导致熔解温度降低1℃。通常,使SSC浓度加倍导致Tm的升高约为17℃。根据这些准则,可以根据经验确定中度或低度严谨条件的洗涤温度,这取决于错配的水平。分离的和/或重组的核酸能够与(a)编码Ftase多肽的核酸,例如SEQ ID NO1或172所述的核酸,(b)SEQ ID NO1或172的互补序列,(c)或者(a)或(b)的部分(例如在高度或中度严谨条件下)杂交,它可以进一步编码具有Ftase多肽的至少一个功能性特征的蛋白质或多肽,例如在昼夜循环中调节侧向分枝,或调节对ABA的反应,或调节衰老的蛋白质或多肽。酶学检测,互补检测,或其它适当的方法也都可以用于鉴别和/或分离编码多肽例如具有氨基酸序列SEQ ID NO2或SEQ IDNO177的多肽或该多肽的功能性等同物或其片段。由杂交核酸编码的蛋白质或多肽的抗原性质可以用能与Ftase多肽结合的抗体通过免疫学方法例如免疫杂交,免疫沉淀反应,放射性免疫测定来测定。PCR方法学,包括RAGE(基因DNA末端的快速扩增),可以用于筛选和检测编码Ftase样蛋白和多肽的核酸的存在,以帮助从基因组DNA中克隆这种核酸。为这些目的的PCR方法可在Innis,M.A.,et al.(1990)PCR ProtocolsA Guide toMethods and Applications,Academic Press,Inc.,San Diego,CA.中找到,在此引入作为参考。本文所述的核酸可用于本发明的方法,用于生产蛋白质或多肽引入细胞,组织,植物部分,植物和其它光合生物。在一个实施方案中,将含有Ftase多肽的全部或部分编码序列,或能与具有序列SEQ ID NO2或SEQ ID NO177的DNA杂交的DNA的DNA引入载体,以在合适的宿主细胞中表达编码的多肽。由Ftase亚基或其功能性等同物组成的所述编码的多肽具有法尼基转移酶活性。这里所用的术语\"载体”指能够将能够传送与之相连的另一种核酸的核酸分子。由上述核酸的20个或更多的连续核苷酸组成的引物和探针也是本发明的一部分。因此,本发明的一种核酸含有大约20个到大约200个或更多核苷酸的特异性序列,其与Ftase蛋白质编码DNA或转录mRNA的特异性核苷酸序列相同或互补。这些探针和引物可用于从其它光合生物中鉴别和分离Ftase的编码核酸。这里被称为\"分离的”核酸是从其来源的基因组DNA或细胞RNA的核酸(例如它存在于细胞中或核酸混合物例如文库中)分离出来的核酸,可以进行进一步的处理。\"分离的”核酸包括用本文所述的方法,类似的方法或其它合适的方法获得的核酸,包括基本上纯的核酸,通过化学合成,生物和化学方法联合使用生产的核酸,以及分离的重组核酸。这里称为\"重组的”核酸是通过重组DNA方法生产的核酸,包括那些依靠人工重组方法产生的核酸,例如聚合酶链式反应(PCR)和/或用限制性酶克隆到载体中。\"重组”核酸还指那些将可能发生所希望的重组事件的核酸引入细胞后所选出的通过细胞的天然机制发生了重组事件的细胞中得到的核酸。编码具有特定功能的多肽的分离的核酸的部分可以用例如Jasin,M.,et al.,美国专利序列号4,952,501中所述的方法进行鉴别并分离。本发明的另一个实施方案是全部或部分与含有有义链的靶分子互补,并能与靶分子杂交的反义核酸或寡核苷酸。所述靶可以是DNA或其RNA对应物(即DNA的T残基是RNA对应物的U残基)。当引入到细胞中的时候,反义核酸或寡核苷酸可以抑制由有义链或有义链转录的mRNA编码的基因的表达。反义核酸可以用标准方法产生。参见例如Shewmaker等,美国专利序列号5,107,065。在特定的实施方案中,反义核酸或寡核苷酸全部或部分与靶核酸(DNA或RNA)互补或能与之杂交,其中所述靶核酸可与具有SEQ ID NO1或172的互补序列的核酸杂交。例如,反义核酸或寡核苷酸可与具有SEQ ID NO1或172的开放阅读框架序列的靶核酸,或编码Ftase的功能性等同物或其片段的核酸,或足以杂交的这些核酸的一部分互补。一部分,例如16个核苷酸的序列足以抑制所述蛋白质的表达。也可以使用含有25个或更多的与SE0 ID NO1或172互补的连续核苷酸的片段。或者与ERA1基因的5’或3’未翻译区域互补的,或与其翻译起始密码子(5’未翻译和翻译区域)重叠的反义核酸或寡核苷酸也是有效的。在另一个实施方案中,所述反义核酸全部或部分与编码Ftase多肽的靶核酸互补并可与之杂交。除了本发明的反义核酸,所构建的寡核苷酸可与基因中的或是转录的DNARNA复合物中的双链核酸相结合,形成稳定的三螺旋或三倍体核酸以抑制编码Ftase多肽或其功能性等同物的基因的转录和/或表达。Frank-Kamenetskii,M.D.and Mirkin,S.M.(1995)Ann.Rev.Biochem.6465-95.本发明的该寡核苷酸可用三螺旋形成的碱基对规则和Ftase的基因或mRNA的核苷酸序列构建。这些寡核苷酸可以通过多种方式阻断Ftase类型的活性,包括防止ERA1基因的转录,或当基因转录的时候与mRNA相结合。本发明的另一个方面涉及用转录后基因沉默(PTGs)以抑制基因表达。双链RNA可在植物和动物中序列特异性地抑制基因表达。将双链RNA处理成为长度为21-23个核苷酸的短的双链寡聚物。这些小的干扰RNA以序列特异的方式抑制内源和异源基因的表达(Fire et al.Nature 391806-811,Carthew,Curr.Opin.in Cell Biol.,13244-248,Elbashir et al.,Nature 411494-498)。RNAi抑制构建体可以涉及为运用多种途径,例如能形成长的发夹分子的反向重复序列的转录,从无关的分隔序列,例如GUS或内含子序列分离的反向重复序列的转录。有义链和反义链通过相反的启动子或有义基因和反义基因的共转录来转录。本发明的另一个方面涉及用转录后基因沉默(PTGs)以抑制基因表达。双链RNA可在植物和动物中序列特异性地抑制基因表达。将双链RNA处理成为长度为21-23个核苷酸的短的双链寡聚物。这些小的干扰RNA以序列特异的方式抑制内源和异源基因的表达(Fire et al.Nature 391806-811,Carthew,Curr.Opin.in Cell Biol.,13244-248,Elbashir et al.,Nature 411494-498)。可以用多种途径,例如能形成长的发夹分子的反向重复序列,从无关的分隔序列,例如GUS或内含子序列分离的反向重复序列设计RNAi抑制构建体。有义链和反义链通过相反的启动子或有义基因和反义基因的共转录来转录。本发明的另一个方面涉及使用显性阴性遗传方法。显性特性,即转移基因的存在,短暂地导致酶活性的降低或酶促终产物产生的减少。已证明了FT是一种由α和β亚基组成的异二聚体。FT活性依赖于这些亚基之间正确的异二聚化形成功能性酶。非功能性亚基的表达会与第二个亚基相互作用产生非功能性的酶并且因此降低了酶活性。非功能性方面包括但不限于亚基的相互作用,底物结合或酶催化。另外表达特性可以产生能与天然底物竞争的底物类似物,最终导致生物活性底物的法尼基化减少。本发明还涉及由本文所述的新的核酸编码的蛋白质或多肽。本发明的蛋白质或多肽可以是分离的和/或重组的。本文中称为\"分离的”的蛋白质或多肽是纯化到它们在细胞中存在状态之上的蛋白质或多肽。在优选的实施方案中,它们是至少10%纯的,也就是基本上纯化的。\"分离的”蛋白质或多肽包括由下文所述的方法,类似的方法或其它合适的方法得到的蛋白质或多肽,包括基本上纯的蛋白质或多肽,通过化学合成,生物和化学方法联合使用生产的蛋白质或多肽,以及分离的重组蛋白质或多肽。本文中称为\"重组的”蛋白质或多肽是通过重组核酸的表达产生的蛋白质或核酸。在优选的实施方案中,所述蛋白质或其部分具有Ftase的至少一个功能特性;例如催化活性,其可影响,例如正常的侧向分枝,小花/开花,种子发芽,或气孔开口,以及结合功能,和/或抗原功能(例如与能与天然Ftase结合的抗体结合)。同样地,这些蛋白称为植物来源的Ftase,包括例如天然Ftase,这些蛋白质的变体(例如突变体)和/或其部分。这种变体包括由于插入,缺失或取代了一个或多个核酸残基而有所不同的突变体,其中一个或多个残基被修饰了的修饰多肽,以及含义一个或多个修饰残基的突变体。本发明还涉及上述的Ftase的分离和/或重组部分,特别是Ftase蛋白的β亚基。酶的一部分具有其本身的全部或部分功能,或者当混合在一起的时候(单独的组分是完全的,部分的,或非功能性的)自发地与一种或多种其它多肽装配在一起重新形成具有本发明的Ftase的至少一种功能特征的功能性蛋白。已鉴别了多个可被ABA诱导的基因。这提示了ABA诱导的对不利的环境条件的耐受性是复杂的多基因事件。因此鉴别单个基因并将其转移到作物中以通过增加对于ABA的反应性而提高植物在不同的环境条件下的生存能力是新的并且是非常有用的。为了鉴别更能整体调控ABA调节的植物过程的基因,对多种植物种属进行基因筛选以分离能改变植物对于激素的反应的突变体。能在拟南芥种子中使得对ABA的反应增强的突变体(era)可以通过它们在低浓度的ABA下阻止种子生长的能力来鉴别,该低浓度的ABA在正常条件下可使野生型的(对照,也就是天然的)种子生长。当然,对era1突变体类,包括一种转移DNA(T-DNA)系(era1-1,生态型Wassilewskija)和两种中子产生的突变体(era1-2和era1-3,生态型Columbia)具有更大的兴趣,这是因为这一类在正常的后抑制条件下显示出降低的生长效率。能增加ABA反应性的突变体在理论上应当更不活跃。4天的冷冻减少了era1等位基因的休眠,在种子冷冻时期era1生长效率增加。在许多植物种属中,破坏休眠促进发芽需要进行春化处理和较长时间地处于潮湿低温的环境中(Baskin and Baskin,1971)。era突变体的发芽特性反应出ABA诱导的休眠状态的增加;因此,这些种子需要进行更长时间的春化处理来发芽。构建era1和ABA生物合成的(aba1-1)和不敏感突变体(abi1-1和abi3-6)的双突变体的结果证明了这个论点。在所有情况下,双突变体与era1相比都具有减少的休眠,表明在era1种子中观察到的增加的休眠是由于ABA的合成或敏感性导致的。除了新ABA反应突变体的广谱性之外,也可使用超敏性筛选来鉴别ABA敏感性的负调控子。也就是,这些基因功能的抑制增强了ABA的反应。这些基因中的一种(ERA1)被克隆并证明能够编码异二聚蛋白质法尼基转移酶(Ftase)的β亚基(Cutleret al.,1996)。由于T-DNA插入造成的era1-1突变使得可以分离插入序列侧翼的植物基因区域。用侧翼区域作为探针,可以分离野生型cDNA和基因克隆。其序列分析描述了一种包含3.5kb的基因组DNA的基因。该基因含有13个内含子,在图1A-1C中用下划线表示,era1-1中T-DNA插入位点在内含子8。用Era1cDNA对野生型DNA,era1-2,和era1-3进行的Southern(DNA)分析表明两个快中子等位基因含有跨越ERA1位点的缺失。快中子突变在拟南芥中诱导小的缺失(Shirley et al.,1992),然后用跨越ERA1位点的14kb的探针进行的遗传分析确定了era1-2缺失的大小是大约7.5kb,era1-3缺失的略长。因此所有三个era1等位基因都在相同的位点含有DNA的破坏,这证实了ERA位点的相同。理论上ERA1基因中最长的开放阅读框架(404个氨基酸)产生的蛋白(图2和4)与酵母,豌豆和哺乳动物蛋白法尼基转移酶亚基基因具有高度的序列相似性(Goodman et al.,1988;Chen et al.,1991;Yang et al.,1993)。法尼基转移酶由α和β亚基组成,它们异二聚化形成能催化法尼基焦磷酸盐(15碳)与含有COOH末端的CaaX基序连接的酶(Schafer and Rine,1992),其中C代表半胱氨酸残基,aa通常是脂肪族氨基酸,X可代表半胱氨酸,丝氨酸,甲硫氨酸,或谷氨酸残基。所有植物的亚基基因邻近COOH末端处含有大约50个氨基酸的区域,在酵母和哺乳动物β亚基基因中则没有这个区域。在酵母和哺乳动物系统中,Ftase改变了几种信号传导蛋白的膜定位。这可以由亲脂性的法尼基侧链通过Ftase与蛋白靶连接起来获得。法尼基基团的连接引起靶的整体疏水性的改变,使得该蛋白能够锚定在膜上,膜上是该蛋白通常与其它信号转导分子相互作用的部位。era1突变体中法尼基化活性的丧失导致种子对ABA的反应增加,这表示拟南芥中的靶蛋白必须定位到膜上以减弱ABA信号。因此在拟南芥中法尼基化是ABA敏感性的负调控子实现正常功能所必需的。后续的工作证明了拟南芥中ERA1基因功能的丧失使成熟植物对环境胁迫的耐受性增加。例如,野生型植物和era1突变体植物在标准实验室条件(24小时光照,150μEm-2s-1,30%湿度)下在土壤中生长的比较表明突变体维持生存不需要象野生型植物那么频繁的浇水(图5)。当突变体和野生型植物生长到开花的时候,停止供水,观察每种植物在后面的时间中受胁迫的迹象。突变体植物与野生型植物相比水分丧失显著的减少(图6和7)。为了确定所观察到的era突变体的增加的干旱耐受性是否与ERA1基因功能有关,构建了含有与报道子GUS基因融合的ERA1启动子(通过将ERA1启动子的5Kb片段插入到不含启动子的GUST-DNA质粒中得到)的转基因植物。对转基因植物的分析表明ERA1在拟南芥的表皮组织中转录表达,这种表达是保卫细胞特异性的。ERA1也在植物的分生组织和根毛中表达。ERA1的保卫细胞表达与突变体的干旱耐受性是一致的,这些细胞是植物的水分蒸发的主要调节子。估计ERA1调节的气孔导率需要ERA1基因在保卫细胞中表达。因此ERA1基因功能的丧失导致保卫细胞对ABA的反应性更强,因而导致更强的干旱应答的保卫细胞调控。因此高等植物中Ftase表达或活性的改变,特别是在农作物中,对植物的气孔导率和蒸腾速度具有重要的作用。era1突变在拟南芥中的特性证明法尼基化的抑制会增加植物中ABA的反应,并导致农作物中酶活性的改变。在农作物中Ftase活性的抑制可以通过多种方法获得。例如,在各种作物种属中可以用同源ERA1基因的反义技术降低Ftase活性,从而增加干旱耐受性。特别通过在保卫细胞中产生ERA1反义RNA,可以将合成的Ftase的数量降低到与era突变体表型类似的水平。ERA1启动子在多种不同的组织,包括枝条分生组织到根毛中都受到调节。确定能在特异组织中许表达的ERA1启动子元件,便能使反义ERA1仅在单独一种组织或细胞类型,例如保卫细胞中表达。另一种在植物中抑制Ftase活性的方法是在转基因植物中产生法尼基化的特异性肽抑制剂。在哺乳动物和酵母系统中,清楚定义了能使法尼基基团与特异蛋白结合的羧基末端靶序列(CaaX,其中C是半胱氨酸,x是脂肪族,X是任意氨基酸)。与这些靶序列类似的肽可在这些系统中抑制内源靶蛋白的法尼基化。而且,拟南芥中CAIM是在体内法尼基化的。因此,可在高等植物中使用类似的抑制剂以在体内竞争性抑制Ftase。因此可以通过合成CaaX肽的DNA序列并将其与保卫细胞特异性的启动子融合,从而在转基因植物中表达抑制剂肽达到这一目的。在每种方法中,用合适的启动子可以特异地靶定和控制反义Ftase或肽抑制剂。本发明还包括产生转基因植物的方法。所述方法包括向一个或多个植物细胞中引入化合物产生转基因植物细胞并从该转基因细胞再生转基因植物,所述化合物能够改变例如可以抑制植物中具有羧基末端CaaX基序的多肽的法尼基化。在一些方面,所述化合物能够改变,例如提高或降低CaaX异戊二烯蛋白酶的表达或活性。另外,所述化合物还可以改变法尼基转移酶的表达或活性。在其它方面所述化合物可以改变异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶的表达或活性。所述化合物可以是,例如(i)一种CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽;(ii)一种编码CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽的核酸;(iii)一种能增加编码CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽的核酸的表达的核酸;(iv)一种能降低编码CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽的核酸的表达的核酸;(v)一种CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽反义核酸及其衍生物,片段,类似物和同源物。能增加编码CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽的核酸的表达的核酸包括,例如启动子,增强子。所述核酸可以是内源的或是外源的。优选地,所述化合物是CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽或编码CaaX异戊二烯蛋白酶,法尼基转移酶或异戊二烯半胱氨酸羧甲基转移酶多肽的核酸。本发明包括产生具有增加的胁迫抗性,延迟衰老或增加的ABA敏感性的转基因植物的方法。所述方法包括向一个或多个植物细胞中引入能改变植物中法尼基转移酶表达(也就是法尼基转移酶α或β)或活性的化合物。所述方法可以是,例如(i)一种法尼基转移酶多肽抑制剂;(ii)一种编码法尼基转移酶多肽抑制剂的核酸;(iii)一种能降低编码法尼基转移酶多肽及其衍生物,片段,类似物和同源物的核酸的表达的核酸;(iv)一种反义法尼基转移酶核酸。能降低编码法尼基转移酶多肽的核酸的表达的核酸包括,例如反义核酸或RNA抑制剂核酸。所述核酸可以是内源的或是外源的。优选所述化合物是法尼基转移酶多肽或编码法尼基转移酶多肽的核酸。更优选地所述化合物是与编码法尼基转移酶多肽的核酸互补的核酸。例如反义核酸分子。另外所述化合物可以是含有编码突变的法尼基转移酶,异戊二烯羧甲基转移酶或CaaX异戊二烯蛋白酶多肽核酸序列的核酸分子。突变是指所述多肽缺少野生型多肽的一种或多种功能。例如突变的法尼基转移酶β多肽是比全长野生型多肽的氨基酸少,但是还保留有和α亚基二聚化的能力的多肽。例如突变的法尼基转移酶β多肽的长度少于314个氨基酸。优选地,突变的法尼基转移酶β多肽包括SEQ ID NO1的氨基酸序列或其片段。在另一个方面,所述化合物是编码CaaX基序的核酸。另外所述CaaX基序可操作地与启动子相连。本发明还包括其中编码法尼基转移酶(即α或β)的基因中引入突变的植物,所述突变导致植物与野生型植物相比具有降低的法尼基转移酶活性以及增加的胁迫耐受性。所述突变可以通过化学或机械方法引入。在多个方面,所述转基因植物与野生型植物(即未转化的)相比具有改变的表型。改变的表型是指所述植物具有一种或多种与野生型植物不同的特性。例如,所述转基因植物具有增加的对胁迫的抗性。增加的胁迫抗性是指所述转基因植物能在胁迫条件(例如高盐,减少的水分,低温,高温)下或在通常可抑制未转化植物生长的条件下生长。胁迫包括,例如冷冻胁迫,热胁迫,热休克,盐胁迫,水胁迫(即干旱),营养胁迫,疾病,牧草害虫,伤口愈合,病原体例如真菌,细菌,线虫,病毒或寄生杂草和除草剂。确定植物生长或对胁迫的反应的方法包括例如测量高度,测量重量或生物质,叶片面积或数量,开花的能力,水的利用,蒸腾速度和产量。另外所述转化的植物具有增加的(即增强的)ABA敏感性。增强的ABA敏感性是在幼苗生长阶段。另外所述增强的ABA敏感性还可以是在成熟植物阶段。其它改变的表型包括例如增加的营养生长(例如增加的叶片数目,厚度和生物质),延迟的生殖生长(例如开花滞后);增加的幼苗生长(例如增加的根生物质和长度),增加的侧根形成因而有广泛的维管系统穿透土壤,导致传输系统增强。所述植物可以是任何植物类型包括,例如葫芦科,蔷薇属,葡萄属,胡桃属,草莓属,莲属,苜蓿属,驴豆属,三叶草属,胡芦巴属,豇豆,柑桔属,亚麻属,老鹳草属,木薯属,胡罗卜属,阿布属,芸苔属,萝卜属,芥子,颠茄属,辣椒属,曼陀罗属,天仙子,番茄属,烟草属,茄属,矮牵牛花属,毛地黄属,马郁兰,Ciahorium,向日葵属,莴苣属,雀麦属,天门冬属,金鱼草属,Heterocallis,Nemesis,天竺葵属,稷属,狼尾草,毛茛属,千里光属,蛾蝶花,黄瓜,Browaalia,Glycine,豌豆,菜豆属,黑麦草属,稻属,玉蜀黍属,燕麦,大麦属,Secale,小麦属,高梁属,棉属,云杉属,Caco,和杨属。本发明提供了一种生产干旱耐受植物的方法,包括制备核酸构建体,其中含有与包含或编码SEQ ID NO1,14,40,43,80-85或172的反义序列的核酸,或者包含该反义序列的功能性等同物或其片段的核酸可操作连接的启动子;将所述核酸构建体插入到载体中;用载体转化植物,组织培养物,或植物细胞;使该植物生长或者从组织培养物或植物细胞再生植物;产生干旱耐受的植物。在该方法中所述核酸选自与SEQ ID NO1,14,40,43,80-85或172互补的25-200个或更多的连续核苷酸,由SEQIDNO1,14,40,43,80-85或172的25个或更多的连续核苷酸组成的寡核苷酸或其互补序列,或编码法尼基转移酶的肽抑制剂的核酸。除了对ABA极度敏感的气孔调节,era植物在干旱条件下还具有延缓的衰老,表明在拟南芥中法尼基化对多种干旱诱导的反应都具有负调控作用。在正常实验室条件下所述era植物要经过更长的时间才变黄。所述突变体植物保持着绿色,在野生型植物衰老并且死亡了以后还存活较长时间。era突变体植物的分离叶片不像野生型植物的分离叶片那样快变黄(图8)。从野生型和era植物上摘取大小相似的发育相同的叶片,置于含有琼脂的培养皿上(参见实施例7)。正常地,野生型叶片在大约5天后开始失去叶绿素,最终变白。突变体植物的叶片在两倍时间以后还保持绿色。由于所述叶片持续接触琼脂,因此没有干旱胁迫,表明era1突变体的减少的衰老不是干旱诱导的现象。而且,在10hr日/16hr夜的循环下,所述植物生命周期可以是野生型植物的两倍(3个月)。因此显示出在era1突变体中叶绿素更新和衰老信号发生了改变。例如,野生型和突变体植物在具有重组供水条件的培养皿上生长到发育阶段的时候,野生型植物叶片开始衰老(大约在开花阶段)。这时,用northern blot分析检测发育相似叶片中的衰老诱导的标记基因(实施例8)。通常两个有基因SAG12和SAG13的转录在野生型植物的衰老过程中被诱导,但是在era1突变体中没有诱导(图9)。而且,还保持着CAB的转录(图9)。这些结果表明era1突变体中的衰老诱导程序与野生型植物相比被延迟,表明法尼基化活性的丧失导致植物中衰老诱导的延迟,甚至是在环境因素中没有水胁迫的条件下。除了对于衰老和水分丧失的作用,era1突变体当在昼夜循环的条件下生长的时候表现出分枝和开花习性的不同。在连续光照(24小时光照/天)条件下,突变体的分枝模式与野生型植物没有不同。但是,当具有黑暗期的时候,突变体并不产生与野生型植物同样多的侧枝。法尼基活性丧失的植物只生成了2.4枝/植物,而野生型植物生成了3.6枝/植物。这表示每株植物的侧枝减少了30%。Ftase活性的丧失同样也影响开花。缺乏Ftase活性的植物每株植物产生的花(25-30个花蕾/次开花)比野生型植物(10-15个花蕾/次开花)更多。因此突变株中平均存在的花蕾是野生型植物的两倍。这些功能丧失的era1突变株的对于整株植物发育的多效性表明ERA1基因可能是植物发育功能的律动调节剂。直到现在,还不知道法尼基化在高等植物中的功能,包括在ABA信号传导中的作用。在多种高等植物例如番茄和豌豆中都发现了Ftase,因此很明显这个酶的功能是跨越种属的。而且,哺乳动物和酵母系统中法尼基转移酶靶肽的过度产生或者法尼基抑制剂的使用完全使Ftase失活。因此在高等植物中可以使用类似的抑制剂在体内使Ftase失活。在所有情况中,如果有适当的启动子,都可以特异地靶定和控制反义Ftase或肽抑制剂。法尼基化缺失的突变体还对外源的植物生长素具有超敏性。这些突变体显示出减少的分枝以及分裂组织的微小变化,这可以由植物生长素调节的改变来解释。因此在此突变株中其它激素功能受到了影响,这表示,除了ABA途径之外,Ftase活性还控制其它激素调节途径。这些结果证明ERA1基因为不同激素信号分子的律动调节提供了分子机制。根据本发明,本发明范围内包括的植物是植物王国中的高等植物和低等植物。成熟的植物,幼苗和种子也包括在本发明的范围内。成熟的植物包括幼苗后的任何发育阶段的植物。幼苗是发育早期的非常幼小的不成熟的植物。本发明还提供了植物部分,原生质体和组织培养物。本发明范围内包括具有era1突变表型的转基因植物。本发明提供的转基因植物的种子可用于繁殖更多的含有本发明的构建体的植物。多种农作物中的ERA1功能都可被抑制以增加植物对于不利环境条件的反应,这种反应需要ABA介导的信号传导。高等植物中法尼基化的控制调节胚胎和营养组织对于此激素的反应(Cutler,et al.,1996)。增加的敏感性转化为组织对胁迫条件的更快的反应,这增加了对植物受环境胁迫的保护。由于只需要控制单个基因,ERA1,在各种植物中都可通过控制该酶的合成或活性来控制法尼基化。而且,本文所述的内容清楚地表明了通过操纵能控制ABA反应的基因改变ABA信号传导途径使得能提高植物对于不利的水胁迫环境的反应。为了产生本发明的转基因植物,将含有编码Ftase的基因的构建体,或编码其功能性等同物的核酸以及启动子用本领域技术人员已知并常用的方法引入到载体中。所述启动子可以包括SEQID NO3的全部或部分。所述构建体还可以包括任何其它必需的调节子例如终止子等,其与编码序列可操作的连接。还可以包括5’前导序列,例如来自苜蓿花叶病毒的包衣蛋白mRNA(Jobling,S.A.and Gehrke,L.(1987)Nature 325622-625)或玉米枯黄斑点病毒(MCMV)前导序列(Lommel,S.A.,et al.(1991)Virology 81382-385)的未翻译的前导序列。本领域技术人员应当认识到可为不同的目的使用其它前导序列。代表性的构建体包括SEQ IDNO54-64。靶序列也是有用的,可引入到本发明的构建体中。靶序列通常可翻译为肽,在细胞中所希望的位点,例如质粒上产生编码核酸序列的多肽产物,在肽转运完成之后或者在肽转运的同时从肽上分离出来。可用于本发明的靶序列的例子包括但不限于,酵母线粒体前序列(Schmitz,et al.(1989)Plant Cell 1783-791),来自烟草相关致病基因(PR-1)的靶序列(Cornellisen,et al.(1986)EMBO J.537-40),空泡靶信号(Chrispeels,M.J.and Raikhel,N.V.(1992)Cell 68613-616),分泌途径序列例如ER或Golgi途径(Chrispeels,M.J.(1991)Ann.Rev.Plant Physiol.Plant Mol.Biol.4221-53)。胞器内序列也可以用于内部位点,例如叶绿体中的类囊体。Theg,S.M.and Scott,S.V.(1993)Trends in Cell Biol.3186-190.除了5’前导序列,通常也会将终止子序列引入到构建体中。在植物构建体中,3’未翻译区域(3’UTR)通常是表达质粒的一部分并含有polyA终止序列。所使用的终止区域通常是方便使用的,这是由于终止区域相对是可互换的。来自根癌农杆菌的Ti质粒的章鱼碱合成酶和胭脂碱合成酶终止区域可用于本发明的构建体。可用任何合适的方法引入本发明的核酸和构建体产生具有改变基因组的转基因植物。对于禾本科植物例如玉米,可以使用微粒轰击(参见例如,Sanford,J.C.等,美国专利序列号5,100,792(1992))。在此实施方案中,含有所述构建体的核苷酸构建体或载体包在微粒外面,然后通过高速冲击穿透引入到靶组织(细胞)中。所述载体可以是任何能让引入到载体中的外源DNA在植物细胞中表达的载体。然后在适合于植物再生的条件下培养所述转化细胞,产生转基因植物。可以用多种方法检查带有所述构建体的转基因植物中是否具有所希望的表型,这些方法包括合适的表型标记,例如抗生素抗性或除草剂抗性,或目测法观察成花诱导的时间,并与天然植物相比。其它已知的将核酸构建体插入植物的方法包括农杆菌介导的转化(参见例如,Smith,R.H.等,美国专利序列号5,164,310(1992)),电穿孔(参见例如,Calvin,N.,美国专利序列号5,098,843(1992)),用激光束引入(参见例如,Kasuya,T.等,美国专利序列号5,013,660(1991))或用试剂例如聚乙二醇引入(参见例如,Golds,T.et al.(1993)Biotechnology,1195-97),等等。通常,按照公知的程序,植物细胞可以用多种载体转化,例如病毒,附加型载体,Ti质粒载体等。将核酸引入植物细胞的方法对于本发明来说不是关键的。本发明的方法可以用于植物体内或种子转化技术,这种技术不需要培养或再生。这些技术在Bechtold,N.,et al.(1993)CRAcad.Sci.Paris/Life Sciences 316118-93;Chang,S.S.,et al.(1990)Abstracts of the Fourth International Conference onArabidopsis Research,Vienna,p.28;Feldmann,K.A.and Marks,D.M(1987)Mol.Gen.Genet.2081-9;Ledoux,L.,et al.(1985)Arabidopsis Inf Serv.221-11;Feldmann,K.A.(1 992)InMethodsin Arabidopsis Research(Eds.Koncz,C.,Chua,N-H,Schell,J.)pp.274-289;Chee,et al.,美国专利序列号5,376,543中有描述。可以为组成型表达或调节型表达提供转录起始区域。除了ERA1启动子,还有许多在植物中可以起作用的启动子。植物基因表达的组成型启动子包括但不限于,章鱼碱合成酶,胭脂碱合成酶,或来自农杆菌的甘露碱合成酶启动子,花椰菜花叶病毒(35S)启动子,玄参花叶病毒(FMV)启动子,和烟草花叶病毒(TMV)启动子。植物中组成型基因的表达还可以由谷氨酰胺合成酶启动子(Edwards,et al.(1990)PNAS 873459-3463),玉米蔗糖合成酶1启动子(Yang,et al.(1990)PNAS874144-4148),来自Ri质粒的TLDNA的Rol-C基因的启动子(Sagaya,et al.(1989)Plant Cell Physiol.30649-654),和pRVC-S-3A启动子的韧皮部特异性区域(Aoyagi,et al.(1988)Mol.Gen.Genet.213179-185)。热休克启动子,核酮糖-1,6-二磷酸(RUBP)羧化酶小亚基(ssu)启动子,组织特异性启动子等可用于植物基因的调节型表达。还可以使用发育调节的,胁迫诱导的,创伤诱导的或病原体诱导的启动子。所述调控区域可以是对物理刺激,例如光具有反应性的,如同对RUBP羧化酶ssu启动子,分化信号,或代谢物的反应性。有义或反义链表达的时间和水平对所产生的表型具有确切的作用。因此,所选择的启动子,与外源DNA的方向和载体在基因组中整合位点一起,能够确定所引入基因的效果。调节型启动子的特定例子还包括但不限于,低温Kin 1和cor6.6启动子(Wang,et al.(1995)PlantMol.Biol.28605;Wang,et al.(1995)Plant Mol.Biol.28619-634),ABA诱导型启动子(Marcotte Jr.,et al.(1989)Plant Cell 1969-976),热休克启动子,例如黑腹果蝇的诱导型hsp70热休克启动子(Freeling,M.,et al.(1985)Ann.Rev.of Genetics 19297-323),甘蓝型油菜的寒冷诱导的启动子(White,T.C.,et al.(1994)Plant Physiol.106917),由乙醇诱导的乙醇脱氢酶启动子(Nagao,R.T.,et al.,Miflin,B.J.,Ed.Oxford Surveys of Plant Molecular and Cell Biology,Vol.3,p384-438,Oxford University Press,Oxford 1986),拟南芥的韧皮部特异的蔗糖合成酶ASUS1启动子(Martin,et al.(1993)Plant J.4367-377),ACS1启动子(Rodrigues-Pousada,et al.(1993)PlantCell5897-911),玉米的22kDa玉米蛋白启动子(Unger,et al.(1993)Plant Cell 5831-841),豌豆的psl凝集素启动子(de Pater,et al.(1993)Plant Cell5877-886),菜豆的phas启动子(Frisch,etal.(1995)Plant J.7503-512),lea启动子(Thomas,T.L.(1993)Plant Cell 51401-1410),番茄的E8基因启动子(Cordes,et al.(1989)Plant Cell 11025-1034),PCNA启动子(Kosugi,et al.(1995)Plant J.7877-886),NTP303启动子(Weterings,et al.(1995)Plant J.855-63),OSEM启动子(Hattori,et al.(1995)Plant J.7913-925),马铃薯的ADP GP启动子(Muller-Rober,et al.(1994)Plant Cell 6601-604),大麦的Myb启动子(Wissenbach,et al.(1993)Plant J.4411-422),和拟南芥的质体蓝素启动子(Vorst,etal.(1993)Plant J.4933-945)。可以用适合于宿主细胞类型的方法将所述载体引入细胞(例如转化,电穿孔,转染)。为本文公开的目的,术语\"用……转化”,\"转化体”,\"转化”,\"用……转染”,和\"转染”都指用本领域技术人员已知的一种方法将核酸引入细胞。原核细胞的转化可以这样获得,例如,通常可以通过用氯化钙处理所述细胞使其成为\"感受态的”以吸收外源DNA,然后将此DNA与感受态细胞混和。原核细胞还可以用重组噬菌体载体感染。核酸可以通过病毒感染,细菌介导的传递(例如农杆菌T-DNA递送系统),电穿孔,磷酸钙共沉淀,显微注射,脂质转染法,用核酸包被的粒子轰击或其它方法被引入到高等生物的细胞中,这取决于特定的细胞类型。对于禾本科植物例如玉米和高梁,可以使用微粒轰击,如例如Sanford,J.C.等,美国专利序列号5,100,792(1992)中所述的。其它可用于植物细胞转化的方法如Gelvin et al.,1992所述。合适的转化或转染细胞的方法在Sambrook et al.,1989中也有描述。可以用本文所述的转化和转染方法将本发明的核酸构建体如上所述地引入到特定的植物部分中。要能鉴别转化的植物细胞,本发明的构建体要进一步含有编码植物选择标记的基因。可用的选择标记包括能提供对抗生素例如庆大霉素,潮霉素,卡那霉素等的抗性的酶。类似地,可使用能产生通过颜色改变识别的化合物的酶例如GUS(β-葡糖醛酸糖苷酶),或能产生通过发光识别的化合物的酶,例如荧光素酶。例如可以通过将与含有SEQ ID NO3的DNA连接的ERA1基因的互补序列整合到病毒基因组中,然后使病毒进入宿主细胞产生反义Ftase。通过宿主细胞的感染,使得宿主细胞中存在能使反义序列转录的系统组分。当获得了含有由本发明的启动子启动的反义基因的细胞或原生质体的时候,所述细胞和原生质体可以再生为整株植物。然后在适合于植物再生的条件下培养转化细胞,可以产生转基因植物。再生步骤的方法的选择并不是关键的,对于多种不同的植物,组织和其它光合生物可以使用适当的方法。参见,例如Gelvin S.B.and Schilperoort R.A.,eds.Plant Molecular Biology Manual,Second Edition,Suppl.I(1995)Kluwer Academic Publishers,Boston MA.U.S.A.。可以用多种方法检查带有所述构建体的转基因植物中是否具有所希望的表型,这些方法包括但不限于合适的表型标记,例如如上所述的抗生素抗性或除草剂抗性,或用目测法观察它们的生长,并与同样条件下天然植物的生长相比。这里所用的术语转基因植物包括含有在野生型(天然)植物或已知的突变体,或天然存在的DNA的其它拷贝或反向拷贝中不存在的DNA或RNA,以及含有本文所述的被引入的DNA或RNA的植物。转基因植物包括那些引入了分离的核酸的植物及其由种子,无性繁殖,细胞,组织或原生质体培养物,或能维持这种变化的部分产生的后代。在一个实施方案中,这种转基因植物包括被子植物,包括单子叶和双子叶植物的转基因植物。转基因植物包括那些引入了DNA的植物及其由种子,营养性繁殖,细胞,组织或原生质体培养物等产生的后代。种子可以得自再生植物或得自再生植物和适当的同种植物之间的杂交植物。另外,所述植物还可以通过在适合于植物部分的再生的条件下培养该植物部分进行营养性繁殖。本发明的另一个方面提供了含有包括与ERA1启动子连接的反义或改变的ERA1核酸的DNA的植物组织培养物和原生质体,这可以改变组织培养物或原生质体对不同环境条件的反应。本发明的方法还可以用于植物体内或种子转化方法,这种方法不需要培养或再生。这些方法的实例如Bechtold,N.,et al.(1993)CR Acad.Sci.Paris/Life Sciences 316118-93;Chang,S.S.,et al.(1990)Abstracts of the Fourth International Conference onArabidopsis Research,Vienna,p.28;Feldmann,K.A.and Marks,D.M(1987)Mol.Gen.Genet.2081-9;Ledoux,L,et al.(1985)Arabidopsis Inf.Serv.221-11;Feldmann,K.A.(1992)InMethods in Arabidopsis Research(Eds.Koncz,C.,Chua,N-H,Schell,J.)pp.274-289;Chee等,美国专利序列号5,376,543中所述。本发明的分离的核酸分子可以用于表达PPI蛋白(例如通过宿主细胞中的重组表达载体),用于检测PPI mRNA(例如在生物样品中)或者PPI基因中的基因损伤,以及用于调节PPI活性,如下所述。此外,所述PPI蛋白可用于筛选能调节PPI蛋白活性或表达的化合物。此外,本发明的抗PPI抗体可用于检测分离的PPI蛋白质并调节PPI活性。本发明提供了一种鉴别调节剂,也就是能与PPI蛋白质结合或者对例如PPI蛋白表达或PPI蛋白活性具有刺激或抑制作用的候选或检测化合物或试剂(例如肽,peptidomimetics,小分子或其它药物)的方法(这里也称为\"筛选检测”)。本发明还包括在本文所述的筛选检测中鉴别的化合物。在一个实施方案中,本发明提供了一种筛选能与PPI蛋白质或多肽或其生物活性部分结合的候选或检测化合物的检测方法。本发明的检测化合物可以用本领域中已知的组合文库方法中的任何一种方法获得,包括生物文库,空间寻址的平行固相或液相文库;需要去褶合的合成文库方法;\"一珠一化合物”文库方法;和用亲和层析选择的合成文库方法。所述生物文库方法限于肽文库,其它四种方法可用于肽,非肽的寡聚物或化合物的小分子文库。参见例如,Lam,1997.Anticancer Drug Design 12145。这里所说的\"小分子”是指分子量小于大约5kD的组合物,最优选小于4kD。小分子可以是例如核酸,肽,多肽,peptidomimetics,碳水化合物,脂类或其它有机或无机分子。化学和/或生物混合物的文库,例如真菌,细菌,或藻类提取物,是本领域已知的,可以用本发明的任何检测方法筛选。本领域中有分子文库的合成方法的实例,例如在DeWitt,et al.,1993.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.906909;Erb,et al.,1994.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9111422;Zuckermann,et al.,1994.J.Med.Chem.372678;Cho,etal.,1993.Science 2611303;Carrell,et al.,1994.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.332059;Carell,et al.,1994.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.332061;和Gallop,etal.,1994.J.Med.Chem.371233中。化合物文库可以是在溶液中(例如Houghten,1992.Biotechniques 13412-421),或在颗粒上(Lam,1991.Nature 35482-84),在芯片上(Fodor,1993.Nature 364555-556),细菌(Ladner,美国专利序列号5,223,409),孢子(Ladner,美国专利5,233,409),质粒(Cull,et al.,1992.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 891865-1869)或在噬菌体上(Scott and Smith,1990.Science 249386-390;Devlin,1990.Science 249404-406;Cwirla,et al.,1990.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.876378-6382;Felici,1991.J.Mol.Biol.222301-310;Ladner,美国专利序列号5,233,409)。在一个实施方案中,检测是基于细胞的检测,其中表达PPI蛋白质,或其生物活性部分的细胞与检测化合物接触,测定检测化合物结合PPI蛋白质的能力。所述细胞,例如可以是来源于哺乳动物,植物或酵母细胞的。检测化合物结合PPI蛋白质能力可以通过,例如将检测化合物与放射性同位素或酶标偶连测定,通过检测复合物中的标记化合物测定所述检测化合物与PPI蛋白质或其生物活性片段的结合。例如检测化合物可以直接或间接地用125I,35S,14C,或3H标记,通过对放射性的直接计数或通过闪烁计数检测放射性同位素。另外,检测化合物还可以用例如辣根过氧化物酶,碱性磷酸酶,或荧光素酶进行酶标,所述酶标记通过合适的底物转换为产物的测定来检测。在一个实施方案中,所述检测包括将表达PPI蛋白质,或其生物活性部分的细胞与能结合PPI的已知化合物结合形成检测混合物,使检测混合物与检测化合物接触,测定检测化合物与PPI蛋白质相互作用的能力,其中检测化合物与PPI蛋白质相互作用的能力的测定包括测定检测化合物与已知化合物相比优先结合PPI蛋白质或其生物活性部分的能力。在另一个实施方案中,检测是基于细胞的检测,包括使表达PPI蛋白质,或其生物活性部分的细胞与检测化合物接触,并且测定检测化合物调节(例如刺激或抑制)PPI蛋白质或其生物活性部分的能力。对检测化合物调节PPI或其生物活性部分的能力可以通过例如测定PPI蛋白质与PPI靶分子结合或相互作用的能力来测定。这里所说的\"靶分子”是PPI蛋白质天然结合或与之相互作用的分子,例如表达PPI相互作用蛋白的细胞表面的分子,第二种细胞表面的分子,胞外环境中的分子,与细胞膜或细胞质分子内表面结合的分子。PPI靶分子可以是非PPI分子或本发明的PPI蛋白或多肽。在一个实施方案中,PPI靶分子是某个信号传导途径的组分,该信号传导途径促进了胞外信号(例如化合物与膜结合分子的结合产生的信号)的传导通过细胞膜进入细胞。所述靶,例如,可以是具有催化活性的第二种细胞间蛋白质或是能促进下游信号分子与PPI结合的蛋白质。PPI蛋白与PPI靶分子结合或相互作用的能力可以通过用上述的一种方法测定直接结合来测定。在一个实施方案中,PPI蛋白与PPI靶分子结合或相互作用的能力可以通过测定靶分子活性来测定。例如,靶分子的活性可以通过检测细胞第二信使对靶的诱导(也就是细胞内Ca2+,二脂酰甘油,IP3等等),检测靶对适当底物的催化活性或酶活性,检测报道子基因(含有与编码可检测标记,例如荧光素酶的核酸可操作连接的PPI反应性调节元件)的诱导,或检测细胞反应,例如细胞存活,细胞分化,或细胞增殖来测定。在另一个实施方案中,本发明的检测是不含细胞的检测,包括使PPI蛋白质或其生物活性部分与检测化合物接触,测定所述检测化合物与PPI蛋白质或其生物活性部分结合的能力。检测化合物与PPI蛋白质的结合可以如上所述的直接地或间接地测定。在一个实施方案中,所述检测包括使PPI蛋白质或其生物活性部分与能结合PPI的已知化合物接触形成检测混合物,使所述检测混合物与检测化合物接触,测定所述检测化合物与PPI蛋白质相互作用的能力,其中所述检测化合物与PPI蛋白质相互作用的能力的测定包括测定所述检测化合物与已知化合物相比优先结合PPI或其生物活性部分的能力。在另一个实施方案中,检测是不含细胞的检测,包括使PPI蛋白质或其生物活性部分与检测化合物接触,测定所述检测化合物调节(例如刺激或抑制)PPI蛋白质或其生物活性部分的能力。所述检测化合物调节PPI的活性的能力的测定可以通过例如,用上述的一种测定直接连接的方法测定PPI蛋白质与PPI靶分子的能力来获得。在另一个实施方案中,所述检测化合物调节PPI的活性的能力的测定可以通过测定PPI蛋白质进一步调节PPI靶分子的能力来获得。例如可以如上所述测定靶分子对合适底物的催化/酶活性。在另一个实施方案中,所述不含细胞的检测包括使PPI蛋白质或其生物活性部分与能结合PPI蛋白质的已知化合物接触形成检测混合物,使所述检测混合物与检测化合物接触,测定所述检测化合物与PPI蛋白质相互作用的能力,其中所述检测化合物与PPI蛋白质相互作用的能力的测定包括测定PPI蛋白质优先结合或调节PPI靶分子活性的能力。本发明的不含细胞的检测可使用PPI蛋白质的可溶形式或膜结合形式。在包括PPI蛋白质的膜结合形式的不含细胞的检测中,可以使用增溶剂以使PPI蛋白质的膜结合形式保存于溶液中。这种增溶剂的实例包括非离子去垢剂例如正辛基葡萄糖苷,正十二烷基葡萄糖苷,正十二烷基麦芽糖苷,辛酰基-N-methylglucamide,癸酰基-N-methylglucamide,Triton_X-100,Triton_X-114,Thesit_,Isotridecypoly(乙烯基乙二醇醚)n,N-十二烷基--N,N-二甲基-3-铵基-1-磺酸丙酯,3-(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基-1-磺酸丙酯(CHAPS),或3-(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基-2-羟基-1-磺酸丙酯(CHAPSO)。在本发明的上述检测方法的多于一个实施方案中,可将PPI蛋白质固定在它的靶分子上以便于将复合物与一种或全部蛋白的未复合形式分离开,以及便于进行自动化检测。在存在或缺乏候选化合物的条件下,检测化合物与PPI蛋白质的结合,或PPI蛋白质与靶分子的相互作用,都可以在任何适合于容纳反应物的容器中进行。这种容器的实例包括微量滴定板,试管,和微量离心管。在一个实施方案中,可形成融合蛋白以添加一个结构区域使一种或全部蛋白质能结合于基质上。例如,GST-PPI融合蛋白或GST-靶融合蛋白可以吸收到谷胱甘肽sepharose珠(SigmaChemical,St.Louis,MO)上或谷胱甘肽衍生化的微量滴定板上,然后将其与检测化合物或检测化合物与非吸收靶蛋白或PPI蛋白质结合,将混合物在适于形成复合物的条件(例如在盐和pH都是生理值的条件下)下培育。培育后,洗涤珠子或微量滴定板的孔除去未结合的组分,使用珠子时固定在其上的基质,直接或间接测定的复合物,例如,如上所述。另外,所述复合物可以从基质上分离开,用标准方法测定PPI蛋白质结合的水平和活性。其它将蛋白质固定在基质上的方法也可以用于本发明的筛选检测。例如,可以用生物素和抗生蛋白链菌素的结合固定PPI蛋白质或其靶分子。可以用本领域熟知的方法(例如生物素化试剂盒,Pierce Chemicals,Rockford,111.)从生物素-NHS(N-羟基-琥珀酰亚胺)制备生物素化的PPI蛋白质或靶分子,并固定在在抗生蛋白链菌素包被的96孔板(Pierce Chemical)的孔中。另外,可与PPI蛋白质或靶分子反应,但不干扰PPI蛋白质与其靶分子结合的抗体,在板孔中衍生化,通过抗体结合在孔中捕获未结合的靶或PPI蛋白质。除了上述GST固定化的复合物,这种复合物的检测方法包括用与PPI蛋白质或靶分子反应的抗体进行的复合物免疫检测,以及依赖于检测与PPI蛋白质或靶分子相关的酶活性的酶联检测。在另一个实施方案中,用下述方法鉴别PPI蛋白质表达的调节剂,所述方法包括使细胞与候选化合物接触,测定细胞中PPImRNA或蛋白质的表达。比较存在候选化合物的条件下PPImRNA或蛋白质的表达水平与不存在候选化合物的条件下PPImRNA或蛋白质的表达水平。根据这种比较鉴别所述候选化合物是否是PPI mRNA或蛋白质表达的调节剂。例如,当在存在候选化合物的条件下比不存在的条件下PPI mRNA或蛋白质的表达更高(也就是统计学显著地高)的时候,则确定所述候选化合物为PPI mRNA或蛋白质表达的刺激物。另外,如果当在存在候选化合物的条件下PPI mRNA或蛋白质的表达比不存在的条件下更低(统计学显著的低),则确定所述候选化合物为PPI mRNA或蛋白质表达的抑制剂。细胞中PPI mRNA或蛋白质的表达水平可通过本文所述的检测PPI mRNA或蛋白质的方法来测定。在本发明的另一个方面,所述PPI蛋白质可在双杂交检测或三杂交检测中用作\"诱饵蛋白”(参见,例如,美国专利序列号5,283,317;;Zervos,et al.,1993.Cell 72223-232;Madura,et al.,1993.J.Biol.Chem.26812046-12054;Bartel,et al.,1993.Biotechniques 14920-924;Iwabuchi,et al.,1993.Oncogene 81693-1696;和Brent WO 94/10300),以鉴别能与PPI结合或相互作用(\"PPI-结合蛋白质”或\"PPI-bp”)和调节PPI活性的其它蛋白质。这种PPI结合蛋白质还可用于PPI蛋白质引起的信号的传导,例如作为PPI途径的上游或下游组件。双杂交系统是基于大多数转录因子的模块性质,所述转录因子由可分离的DNA结合或激活区域组成。简短来说,所述检测使用两种不同的DNA构建体。在一种构建体中,编码PPI的基因与编码已知转录因子(例如GAL-4)的DNA结合域融合。在其它构建体中,编码未鉴别蛋白质(\"捕获物”或\"样品”)的来自DNA序列文库的DNA序列与编码已知转录因子的激活区域的基因融合。如果\"诱饵”和\"捕获物”蛋白能够在体内相互作用,形成依赖于PPI的复合物,则所述转录因子的DNA结合和激活区域相互靠近。这种靠近使得报道子基因可以转录,所述报道子基因与对所述转录因子具有反应性的转录调节位点可操作地连接。检测报道子基因的表达,分离含有功能性转录因子的细胞克隆,用于获得编码与PPI相互作用的蛋白质的克隆基因。本发明的另一个方面是用本发明的转基因植物通过基因筛选方法鉴别PPI相互作用成分的方法。这些成分可以是例如,能改变PPI基因表达的调控元件,直接改变PPI活性的相互作用蛋白,或能改变相同信号传导途径的成分因而可以对PPI的表达或活性产生影响的相互作用蛋白。简短来说,对本发明的转基因植物使用遗传筛选方法可以鉴别用野生型背景筛选无法鉴别的相关基因。例如可以用本发明的转基因植物作为遗传背景产生激活标签文库(Weigel,et al.,2000.Plant Physiol.1221003-1013)。然后根据亲本显示的表型筛选具有改变表型的植物。用本发明的转基因植物产生文库还可以用其它方法,例如化学或放射性诱导的突变,插入失活或插入激活方法。本发明进一步包括上述筛选检测鉴别的新的物质及其应用。重组表达载体和宿主细胞本发明的另一个方面涉及载体,优选是表达载体,其含有编码PPI蛋白质,或其衍生物,片段,类似物或同源物的核酸。这里所用的\"载体”指能传送与之相连的另一种核酸的核酸分子。表达载体构建体的示例包括例如SEQ ID NO54-64的构建体。一种类型的构建体是\"质粒”,指一种环状双链DNA环,其中可以连接另外的DNA区段。另一种类型的载体是病毒载体,其中另外的DNA区段可以连接到病毒基因组上。特定的载体能够在其引入的宿主细胞中自主复制(例如具有细菌复制起点的细菌载体)。其它载体当引入到宿主细胞中的时候整合到宿主细胞的基因组中,因而能够与宿主基因组一起复制。而且,特定的载体能够操纵与之可操作相连的基因的表达。这种载体称为\"表达载体”。通常,重组DNA方法中使用的表达载体是质粒形式的。在本文的描述中,由于质粒是最常使用的载体形式,\"质粒”和\"载体”可互换使用。但是,本发明还包括其它形式的表达载体,例如病毒载体或植物转化载体,其是双重的或具有等同的功能。本发明的重组表达载体含有本发明的核酸,其形式适于在宿主细胞中表达所述核酸,这意味着所述重组表达载体包括一种或多种调控序列,这些调控序列是基于用来表达的宿主细胞选择的,与要表达的核酸序列可操作地连接。在重组表达载体中,\"可操作地连接”是指所感兴趣的核苷酸序列与调控序列以能使所述核苷酸序列表达的方式连接(例如在体外转录/翻译系统中或当载体引入到宿主细胞中的时候在宿主细胞中)。术语\"调控序列”包括启动子,增强子和其它表达控制元件(例如多聚腺苷酸信号)。这种在例如Goeddel,GENEEXPRESSION TECHNOLOGYMETHODS IN ENZYMOLOGY185,Academic Press,San Diego,Calif.(1990)中有描述。调控序列包括那些在许多类型的宿主细胞中操纵核酸序列的组成型表达的序列,以及那些仅在特定的宿主细胞中操纵核苷酸序列的表达的序列(例如组织特异性调控序列)。合适的启动子的实例包括例如组成型启动子,ABA诱导型启动子,组织特异性启动子或保卫细胞特异性启动子。本领域技术人员应当认识到表达载体的设计取决于多种因素如要转化的宿主细胞的选择,所希望的蛋白质的表达水平等。本发明的表达载体可以引入到宿主细胞中从而产生蛋白质或肽,包括由本发明的核酸编码的融合蛋白或肽(例如PPI蛋白质,PPI蛋白的突变体形式,融合蛋白等)。本发明的重组表达载体可以用于在原核或真核细胞中表达PPI蛋白质。例如,PPI蛋白可以在细菌细胞例如大肠杆菌,昆虫细胞(用杆状病毒表达载体)酵母细胞,植物细胞或哺乳动物细胞中表达。合适的宿主细胞进一步在Goeddel,GENEEXPRESSION TECHNOLOGYMETHODS IN ENZYMOLOGY185,Academic Press,San Diego,Calif.(1990)中讨论。另外,重组表达载体还可以在体外转录和翻译,例如用T7启动子调控序列和T7聚合酶。蛋白质在原核生物中的表达大部分是在大肠杆菌中,用能操纵融合蛋白或非融合蛋白的表达的含有组成型或诱导型启动子的载体。融合载体是将多个氨基酸加入到编码蛋白上,通常是加入到重组蛋白的氨基末端。这种融合载体典型地具有三个目的(i)增加重组蛋白的表达;(ii)增加重组蛋白的溶解性;以及(iii)作为亲和纯化中的配体帮助纯化重组蛋白。通常,在融合表达载体中,蛋白水解切割位点在融合部分与重组蛋白的连接处,以便在纯化了融合蛋白以后能将重组蛋白从融合部分上分离出来。这种酶,以及它们的同源识别序列,包括Xa因子,凝血酶和肠激酶。典型的融合表达载体包括pGEX(Pharmacia Biotech Inc;Smithand Johnson,1988.Gene 6731-40),pMAL(New England Biolabs,Beverly,Mass.)和与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合的pRIT5(Pharmacia,Piscataway,N.J.),麦芽糖E结合蛋白,或蛋白A,分别相对于靶重组蛋白。合适的诱导型非融合大肠杆菌表达载体包括pTrc(Amrann etal.,(1988)Gene 69301-315)和pET 11d(Studier et al.,GENEEXPRESSION TECHNOLOGYMETHODS IN ENZYMOLOGY185,Academic Press,San Diego,Calif(1990)60-89)。在大肠杆菌中使重组蛋白的表达达到最大的方法是在蛋白水解切割重组蛋白的能力受到损害的宿主细菌中表达所述蛋白。参见,例如,Gottesman,GENE EXPRESSION TECHNOLOGYMETHODS IN ENZYMOLOGY 185,Academic Press,San Diego,Calif.(1990)119-128。另一种方式是改变插入到表达载体中的核酸的核酸序列使得每个氨基酸的密码子是大肠杆菌中优先使用的密码子(参见,例如Wada,et al.,1992.Nucl.Acids Res.202111-2118)。本发明的核酸序列的这种改变可以用标准DNA合成方法实现。在另一个实施方案中,PPI表达载体是酵母表达载体。在酿酒酵母中表达的载体的实例包括pYepSec 1(Baldari,et al.,1987.EMBO J.6229-234),pMFa(Kurjan and Herskowitz,1982.Cell30933-943),pJRY88(Schultz et al.,1987.Gene 54113-123),pYES2(Invitrogen Corporation,San Diego,Calif),和picZ(InVitrogen Corp,San Diego,Calcif)。另外,PPI可以用杆状病毒表达载体在昆虫细胞中表达。在培养的昆虫细胞(例如SF9细胞)中的蛋白质表达可用的杆状病毒载体包括pAc系列(Smith,et al.,1983.Mol.Cell.Biol.32156-2165)和pVL系列(Lucklow and Summers.1989.Virology17031-39)。在另一个实施方案中,本发明的核酸用哺乳动物表达载体在哺乳动物中表达。哺乳动物表达载体的实例包括pCDM8(Seed,1987.Nature 329840)和pMT2PC(Kaufman,et al.,1987.EMBOJ.6187-195)。当用于哺乳细胞中的时候,表达载体的控制功能通常是由病毒调控元件提供的。例如通常使用的启动子来自多瘤病毒,腺病毒2,巨细胞病毒,和猿病毒40。其它适用于原核和真核细胞的合适的表达系统参见,例如Sambrook,et al.,MOLECULAR CLONINGA LABORATORY MANUAL.2nd ed.,Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor LaboratoryPress,Cold Spring Harbor,N.Y.,1989.的第16和17章。在另一个实施方案中,本发明的核酸用植物表达载体在植物细胞中表达。植物表达载体的实例包括在农杆菌中存在的肿瘤引导(Ti)质粒或其部分,花椰菜花叶病毒(CAMV)DNA和载体例如pBI121。为了在植物中表达,重组表达盒中除了含有PPI核酸,还含有植物启动子区域,转录起始位点(如果要转录的编码序列缺少的话),和转录终止/多聚腺苷酸序列。终止/多聚腺苷酸区域与启动子序列可以来自相同的基因,或者可以来自不同的基因。在所述盒的5’和3’末端典型地包括独特的限制酶位点使得它可以简单地插入到已有的载体中。合适的启动子的实例包括来自植物病毒的启动子例如花椰菜花叶病毒(CAMV)的35S启动子,Odell,et al.,Nature,313810-812(1985),和来自基因例如水稻肌动蛋白的启动子(McElroy,et al.,Plant Cell,163-171(1990));泛素(Christensen,et al.,Plant Mol.Biol.,12619-632(1992);和Christensen,et al.,Plant Mol.Biol.,18675-689(1992));pEMU(Last,et al.,Theor.Appl.Genet.,81581-588(1991));MAS(Velten,et al.,EMBO J.,32723-2730(1984));玉米H3组蛋白(Lepetit,et al.,Mol.Gen.Genet.,231276-285(1992);和Atanassvoa,et al.,Plant Journal,2(3)291-300(1992)),来自根癌农杆菌的T-DNA的5’启动子或3’启动子,Smas启动子,肉桂酰乙醇脱氢酶启动子(美国专利序列号5,683,439),Nos启动子,rubisco启动子,GRP1-8启动子,ALS启动子,(WO96/30530),合成启动子,例如Rsyn7,SCP和UCP启动子,核酮糖-1,3-二磷酸羧化酶,水果特异的启动子,热休克启动子,种子特异的启动子和其它来自各种植物基因的转录起始区域,例如,包括各种冠瘿碱起始区域,例如章鱼碱,甘露碱,和胭脂碱。可与PPI编码核酸序列相连以便在植物细胞中表达的其它调控元件包括终止子,多聚腺苷酸序列,和编码能在植物细胞内定位或使蛋白从细胞中分泌的信号肽的核酸序列。这些调控元件和将这些元件加入或替换调控元件PPI基因的方法是已知的,包括但不限于3’末端和/或聚腺苷酸区域例如根癌农杆菌胭脂碱合成酶(nos)基因的(Bevan,et al.,Nucl.Acids Res.,12369-385(1983));马铃薯蛋白酶抑制剂II(PIN II)基因(Keil,et al.,Nucl.Acids Res.,145641-5650(1986),在此引入作为参考;和An,,etal.,Plant Cell,1115-122(1989));和CaMV 19S基因(Mogen,etal.,Plant Cell,21261-1272(1990))。植物信号序列,包括但不限于能使蛋白靶定到植物细胞的细胞外基质的信号肽的编码DNA/RNA序列(Dratewka-Kos,et al.,J.Biol.Chem.,2644896-4900(1989))和菸草延长基因(DeLoose,et al.,Gene,9995-100(1991)),或者能将蛋白质靶定到液泡的信号肽如甘薯贮藏蛋白基因(Matsuka,et al.,Proc.Nat′l Acad.Sci.(USA),88834(1991))和大麦植物凝集素基因(Wilkins,et al.,Plant Cell,2301-313(1990)),或者能导致蛋白被分泌的信号肽例如PRIb的信号肽(Lind,et al.,Plant Mol.Biol.,1847-53(1992)),或那些能将蛋白靶定到质粒的信号序列例如油菜籽烯酰基-ACP还原酶(Verwaert,et al.,Plant Mol.Biol.,26189-202(1994))都可用于本发明。在另一个实施方案中,重组表达载体能够指导核酸在特定的细胞类型(例如用于表达所述核酸的组织特异性调控元件)中表达。组织特异性调控元件是本领域已知的。特别是可用于与本发明的核酸相连的是在植物中可操作的表达系统。包括在组织特异性启动子控制下的系统,也包括那些含有在所有植物组织中都可操作的启动子的系统。组织特异性启动子也是公知的。例如,patatin类I启动子只在马铃薯块茎中是转录激活的,可用于将基因表达靶定在块茎中(Bevan,M.,1986,Nucleic Acids Research 144625-4636)。另一种马铃薯特异性的启动子是颗粒结合性淀粉合成酶(GBSS)启动子(Visser,R.G.R,et al.,1991,Plant Molecular Biology 17691-699)。其它适用于所希望的靶组织的组织特异性启动子可以用已知方法分离。这些控制序列通常与在所希望的组织中唯一表达的基因结合。在典型的高等植物中,每个组织都具有数千种mRNA是其它组织系统中没有的(Goldberg,P,1986,Trans.R.Soc.London B314343有综述)。要在原位产生GST的反义mRNA,GST基因中转录为GSTmRNA的那些区域,包括其未翻译区域,反向插入到在启动子系统控制下的表达载体中。得到的转录mRNA与植物正常产生的mRNA互补。将得到的表达系统或表达盒进行连接或另外构建,使其包含在适于植物转化的重组载体中。所述载体还可以含有选择标记基因,从而可以在培养物中鉴别出转化的植物细胞。通常,所述标记基因可以编码抗生素抗性。这些标记包括对G418的抗性,潮霉素,博来霉素,卡那霉素,和庆大霉素。转化植物细胞以后,那些含有载体的细胞可以通过其能在含有特定抗生素的介质上的能力来鉴别。载体中通常也包括来源于细菌或病毒的复制序列,以使载体能够在细菌或噬菌体宿主中克隆,优选是包含广泛宿主范围的原核复制起点。还可以包含细菌的选择标记以选择含有所希望的构建体的细菌细胞。合适的原核选择标记还包括抗生素抗性例如卡那霉素或四环素。如本领域公知的,载体中也可以存在其它编码其它功能的DNA序列。例如,在农杆菌转化中,还可以含有T-DNA序列以便于后来转入植物染色体。本发明的另一个方面涉及引入了本发明的重组表达载体的宿主细胞。这里术语\"宿主细胞”和\"重组宿主细胞”可互换使用。应当理解这种术语不仅是指特定的主题细胞,还指这种细胞的后代或可能的后代。由于其后代可能因突变或环境影响发生一定的改变,因此后代实际上可能与母细胞不完全相同,但是这也包括在本文所用的术语的范围内。载体DNA可以通过传统的转化或转染技术引入到原核或真核细胞中。这里所用的术语\"转化”和\"转染”是指将外源核酸(例如DNA)引入到宿主细胞中的各种技术。本发明的宿主细胞,例如培养的原核或真核宿主细胞,可以用于产生(也就是表达)编码本发明的多核苷酸的开放阅读框架的本发明的多肽。相应地,本发明进一步提供了用本发明的宿主细胞产生多肽的方法。在一个实施方案中,所述方法包括在适于产生多肽的介质中培养本发明的宿主细胞(其中引入了编码本发明的多肽的重组表达载体)。在另一个实施方案中,所述方法进一步包括从介质或宿主细胞中分离出该多肽。多种类型的细胞都可以作为合适的宿主细胞表达由本发明的多核苷酸的开放阅读框架编码的多肽。植物宿主细胞包括,例如作为适于表达本发明的多核苷酸的的宿主的植物细胞,包括表皮细胞,叶肉组织和其它基本组织,以及不同植物种属,例如拟南芥,烟草,甘蓝型油菜,玉米,籼稻,陆地棉和大豆的叶,茎,花,和根的维管组织。另外,还可在低等真核生物例如酵母或在原核生物例如细菌中产生多肽。可能的合适的酵母菌株包括酿酒酵母,裂殖酵母,克鲁维酵母菌株,假丝酵母,或任何能表达异源多肽的细菌菌株。如果多肽是在酵母或细菌中制备的,必须对所产生的多肽进行修饰,例如在适当的位点磷酸化或糖基化,以得到功能性多肽,如果所述多肽具有足以具有活性的长度和构型。这种共价连接可以用已知的化学或酶学方法获得。多肽可以通过在适于表达重组蛋白的培养条件下培养转化的宿主细胞来制备。得到的表达多肽或蛋白可以用已知的纯化步骤从这样的培养物中(例如从培养介质或细胞提取物中)纯化,例如凝胶过滤和离子交换层析。多肽或蛋白的纯化还可以包括含有可与蛋白结合的试剂的亲和柱;在亲和树脂如伴刀豆球蛋白A-琼脂糖,肝素-toyopearl_或Cibacrom blue 3GA Sepharose_上进行的一个或多个柱层析步骤;用树脂如苯基醚,丁基醚,或丙醚进行的一个或多个疏水相互作用层析步骤;或免疫亲和层析。另外,多肽或蛋白还可以以利于纯化的形式表达。例如,可以表达为含有六个残基的组氨酸标签的融合蛋白。组氨酸标签标记的蛋白然后可以与Ni亲和柱结合。所有其它蛋白都洗脱以后,可以洗脱组氨酸标签标记的蛋白从而快速有效地纯化。可以使用用疏水RP-HPLC介质,例如具有突出的甲基或脂肪族基团的硅胶进行的一个或多个反相高效液相层析(RP-HPLC)步骤进一步纯化多肽。一些或所有的上述纯化步骤,以不同的组合,也可以用于提供基本上均一的分离的重组多肽。纯化的蛋白或多肽基本上不含其它植物蛋白或多肽,根据本发明定义为\"分离的”。转化的植物细胞和转基因植物本发明包括原生质体,植物细胞,植物组织和植物(例如用PPI核酸(即有义的或反义的)转化的单子叶和双子叶植物,含有PPI核酸(即有义的或反义的)的载体或含有PPI核酸(即有义的或反义的)的表达载体。这里所用的\"植物”不仅包括整株植物而且还包括其部分(即细胞,和组织,包括例如叶,茎,芽,根,花,果实和种子)。所述植物可以是任何植物类型,包括例如下述属的种南瓜属,蔷薇属,葡萄属,胡桃属,草莓属,莲属,苜蓿属,驴豆属,三叶草属,胡芦巴属,豇豆属,柑桔属,亚麻属,老鹳草属,木薯属,胡萝卜属,阿布属,芸苔属,萝卜属,芥子属,颠茄属,辣椒属,曼陀罗属,莨菪属,番茄属,烟草属,茄属,矮牵牛属,毛地黄属,马郁兰属,Ciahorium,向日葵属,莴苣属,雀麦属,天门冬属,金鱼草属,Heterocallis,Nemesis,天竺葵属,稷属,狼尾草属,毛茛属,千里光属,喇叭舌属,黄瓜属,Browaalia,大豆属,豌豆属,菜豆属,黑麦草属,稻属,玉蜀黍属,燕麦属,大麦属,黑麦属,小麦属,高梁属,棉属,云杉属,Caco,和杨属。在本发明的某些方面,转化的植物对生物和非生物胁迫,例如寒冷胁迫,盐胁迫,水胁迫(例如干旱),疾病,牧草害虫和创伤具有抵抗能力。另外,本发明还包括对病原体例如真菌,细菌,线虫,病毒和寄生杂草具有抵抗能力的植物。另外,转基因植物可以对除草剂具有抗性或者衰老延迟。转基因植物的产量,生产力,生物质或ABA敏感性增加。具有抗性是指植物可在胁迫条件(例如高盐,水分减少,低温)下或通常在某种程度上抑制未转化植物的生长的条件下生长。测定植物生长或对胁迫的反应的方法包括例如高度测量,重量测量,叶片面积,开花的能力,水分利用,蒸发速度和产量。本发明还包括细胞,组织,包括例如叶,茎,芽,根,花,果实和种子以及由转化植物衍生的后代。将外源基因引入植物的多种方法都是已知的,可用于将基因插入植物宿主,包括生物的和物理的植物转化方法。参见,例如,Miki et al.,(1993)″Procedure for Introducing Foreign DNA intoPlants″,InMethods in Plant Molecular Biology and Biotechnology,Glick and Thompson,eds.,CRC Press,Inc.,Boca Raton,pages67-88和Andrew Bent in,Clough SJ and Bent AF,1998.Floraldippinga simplified method for Agrobacterium-mediatedtransformation of Arabidopsis thaliana。所选择的方法随宿主植物而不同,包括化学转染方法例如磷酸钙,聚乙二醇(PEG)转化,微生物介导的基因转移例如农杆菌(Horsch,et al.,Science,2271229-31(1985)),电穿孔,原生质体转化,显微注射,花的浸渍和生物弹轰击。农杆菌介导的转化最广泛使用的将表达载体引入植物的方法是农杆菌天然转化系统。根癌农杆菌和发根农杆菌是植物致病性的土壤细菌,可对植物细胞进行基因转化。根癌农杆菌和发根农杆菌的Ti和Ri质粒携带能对植物进行基因转化的基因。参见,例如,Kado,Crit.Rev.Plant Sci.,101-32(1991)。农杆菌载体系统的描述和农杆菌介导的基因转移的方法在Gruber et al.,supra;and Moloney,et al,Plant Cell Reports,8238-242(1989)中有介绍。转基因拟南芥植物可以容易地通过将开花植物浸渍在农杆菌培养物中的方法产生,可根据Andrew Bent in,Clough SJ andBent AF,1998. Floral dippinga simplified method forAgrobacterium-mediated transformation of Arabidopsis thaliana所述的方法。使野生型植物生长直到该植物同时具有花苞和盛开的花。将植物倒转,在具有合适的基因构建体的农杆菌培养物的溶液中浸渍1分钟。然后将植物在托盘中保持水平,包裹两天保持湿度,然后恢复正常将其包好使其继续进行生长和种子发育。大量收集成熟的种子。直接基因转移通常适用的植物转化的方法是微粒介导的转化,其中DNA携带在大约1到4mu.m的粒子枪的表面上。表达载体用可将微粒加速到300到600m/s的生物弹装置引入到植物组织中,这个速度足以穿透植物细胞壁和细胞膜。(Sanford,et al.,Part.Sci.Technol.,527-37(1987);Sanford,Trends Biotech,6299-302(1988);Sanford,Physiol.Plant,79206-209(1990);Klein,et al.,Biotechnology,10286-291(1992))。另一种将DNA引入到植物中的物理递送方法是靶细胞的超声处理法,如Zang,et al.,BioTechnology,9996-996(1991)所述。另外,还可用脂质体或球状质体将表达载体引入到植物中。参见,例如,Deshayes,et al.,EMBO J.,42731-2737(1985);和Christou,et al.,Proc.Nat′l.Acad.Sci.(USA),843962-3966(1987)。用CaCl2沉淀,聚乙烯醇或聚-L-鸟氨酸使原生质体对DNA直接吸收的方法也已有报道。参见,例如,Hain,et al.,Mol.Gen.Genet.,199161(1985);和Draper,et al.,Plant Cell Physiol.,23451-458(1982)。原生质体和整个细胞和组织的电穿孔方法也已有描述。参见,例如,Donn,et al.,(1990)InAbstracts of the VIIth Int;1.Congress on Plant Cell and Tissue Culture IAPTC,A2-38,page 53;D′Halluin et al.,Plant Cell,41495-1505(1992);和Spencer et al.,Plant Mol.Biol.,2451-61(1994)。粒子创伤/农杆菌递送另一种有用的基本转化方法包括由粒子轰击造成的创伤与使用农杆菌进行DNA递送的组合,如Bidney,et al.,Plant Mol.Biol.,18301-31(1992)所述。植物转化的可用质粒包括Bin 19。参见Bevan,Nucleic Acids Research,128711-8721(1984),在此引入作为参考。通常,完整的分生组织的转化方法包括在黑暗中吸收种子24小时,除去子叶和根,然后培养分生组织的外植体。二十四小时后,摘取最初的叶片,使顶部的分生组织暴露出来。将外植体置于顶部,用例如粒子轰击两次,再与农杆菌共培养。将农杆菌置于分生组织中,然后开始完整分生组织的共培养。大约3天的共培养以后,将分生组织转至含有氨噻肟头孢菌素和卡那霉素的培养基中,以进行NPTII筛选。分离的分生组织方法包括吸收种子,破坏子叶以在胚轴平面上产生整齐的断裂,切下根尖,然后在原始叶片间纵向平分外植体。将两半都置于介质上的切割面上,然后用粒子轰击两次,然后用农杆菌进行共培养。对于分裂的分生组织,轰击后,将分生组织置于农杆菌悬液中,放置30分钟。然后从悬液中把它们转移到固体培养基上,进行三天的共培养。然后将分生组织转移到含有氨噻肟头孢菌素和卡那霉素的新鲜培养基中,以进行筛选。通过植物培植进行转移另外,一旦通过上述重组DNA方法得到了单个转化的植物,就可以使用传统的植物培植方法通过杂交和逆代杂交转移基因和所结合的调控序列。这种中间方法进一步包含下述步骤(1)在转基因植物和第二分类单元的植物之间进行两性杂交;(2)从杂交后代获得再生物质;以及(3)从再生物质生长出转基因植物。当希望或是需要的时候,可以通过进一步包括下述步骤使得第二种分类单元的农学特性基本保留(1)将转基因后代与第二分类单元的非转基因植物进行逆代杂交;以及(2)在逆代杂交的后代中选择表达相关标记基因的,直到在具有标记基因特点的后代中第二分类单元特性达到所希望的百分比。这里所说的术语\"分类单元”是指植物分类的单元。因此包括属,种,栽培品种,品种,变体和其它缺少统一命名的较小分类组。转化体的再生从单个植物原生质体或各种外植体发育或再生植物是本领域公知的(Weissbach and Weissbach,1988)。这种再生和生长过程典型地包括选择转化细胞,培养这些细胞,经过通常的胚胎发育阶段和根生苗阶段的步骤。转基因胚芽和种子的再生相似。然后在合适的植物生长介质例如土壤中培植得到的转基因根生芽。含有从叶片外植体中用农杆菌引入的编码所感兴趣多肽的外源基因的植物的发育或再生可以用本领域公知的方法例如在文献中描述的(Horsch et al.,1985)获得。在此步骤中,在存在选择试剂的条件下,在能诱导转化的植株芽再生的介质中培养转化体(Fraley et al.,1983)。特别是,美国专利序列号5,349,124(在此引入其说明书作为参考)详细描述了基因转化的莴苣细胞的制备和由此产生的能表达杂交晶体蛋白的植物,其中所述蛋白能够给所述植物带来针对鳞翅目幼虫的杀虫活性。该步骤典型地在两个到四个月之内产生枝条,然后将这些枝条转移至合适的含有选择试剂和能防止细菌生长的抗生素的能诱导根的介质中。然后将能在存在选择试剂的条件下生根以形成幼苗的枝条移植到土壤或其它介质中以生成根。这些过程随特定的植株而不同,这种变化是本领域公知的。优选地,再生植物可以自花传粉以得到纯合的转基因植物,或者得自再生植物的花粉可以与由种子生长出的农学上很重要的植物,优选自交系杂交。相反,那些重要品系的植物的花粉可用于给再生植物授粉。含有所希望多肽的本发明的转基因植物可以用本领域技术人员公知的方法培养。优选的转基因植物是独立的分离的,可以将所述基因和其活性传给后代。更优选的转基因植物是基因纯合的,可以在两性杂交中将所述基因传给其后代。转基因植物的种子可以在田野中或温室中生长,得到的性成熟的转基因植物进行自花传粉以产生纯品系植物。这些植物的后代成为纯品系,并评价其转基因表达的增加。实施方案本发明的构建体和方法具有多种商业应用价值,特别是在预防植物组织在水胁迫时期的干燥方面。对含有Ftase抑制剂的农作物的基因操作和编码外源植物Ftase的基因的失活会使这些植物能够抵抗暂时性的环境胁迫,能够拓宽植物可生长的环境。因此提高农作物对于寒冷,盐和干旱胁迫的耐受性可以在这些不利条件下提高植物的产量。本文所述的技术还可以用于改变植物的收获时间和收获质量。例如,Ftase的过表达会导致农作物,例如玉米和其它禾本科植物的干燥时间加快。烘干玉米涉及到大量丙烷气体的使用。可以缩短作物,例如在田野中自然干燥的干草的干燥时间,以减少降雨使作物变质的可能性。除此之外,植物中法尼基化的抑制也可以用于控制植物的衰老过程以使叶片更长地保持绿色状态并且使水果保持不成熟。例如,如果ERA1或CaaX盒抑制剂蛋白构建体的反义构建体受到衰老诱导的启动子的控制,当衰老程序开始启动的时候所述植物会诱导法尼基化的抑制剂,从而抑制衰老。结果是得到能保持绿色的植物或能保持不成熟的水果。因此,所述植物可以更长时间地生产产品,例如营养体部分,花或果实。因此园艺学家可以制造出能保持绿色的植物,即使同样品种的野生型植物发生衰老,它还能继续生长。切花可以维持更长时间。或者果实可以保持不成熟,这是在市场上具有寿命的蔬菜工业中极度重要的重要产物。进一步,水果和蔬菜中Ftase的抑制可以减少枯萎。因此可以减少在运输和装运过程中产生的枯萎。货架上的水果和蔬菜也只需要较少的喷雾就可以保持新鲜和可口,因而也可以减少在黄瓜,苹果和橙子的生产中使用用于防止变干的蜡。浇水减少还意味着减少真菌和细菌对作物,或水果和蔬菜的攻击。例如可以抑制田野中从土壤溅洒到植物叶片上的植物病原体导致的植物疾病。在园艺学领域,许多抗干旱的品种都用于园林绿化和房屋植物装饰。特别有价值的是那些可用于盆栽,用于家和办公室的内部或外部装饰的,可在缺水环境下存活的植物。这对于园艺家有极大的好处,特别是在干燥的夏季,被遗忘的植物在太阳下迅速地干枯。进一步地,在树荫下和其它荫凉区域生长的植物经常经受干燥的条件和有限的日光。本文所述的技术提供了可以在这些条件下更好存活的植物品种。在一个实施方案中,园艺学家可以发现植物的许多用途,其中可以用日/夜循环调节侧枝和/或开花数目。其中有具有更长的没有侧枝的茎因而具有销售优势的植物的实例包括玫瑰,康乃馨,百合等。增加植物的开花或小花数目的能力也是具有很高价值的优点。这些特性也可用于许多农作物,使其产量增加,也可以更容易收获农作物。本文提供的构建体和方法的另一个优点就是ERA1启动子在叶片的保卫细胞中是具有活性的。ERA1基因启动子的一部分可以与ERA1基因的反义核酸融合,因此Ftase活性只在保卫细胞中消失。另一个实施方案是使用抗干旱的特性作为植物,植物细胞和植物组织转化的选择标记。在植物中检测转化的一种方法包括(a)引入核酸构建体,所述构建体含有与包含SEQ ID NO1的反义序列的核酸或包含该反义序列的功能性等同物或其片段的核酸可操作连接的启动子;(b)将核酸构建体插入植物,植物细胞或植物组织中;(c)培养所述植物,或由所述植物细胞或植物组织再生植物,直到形成气孔;以及(d)将所述植物或再生植物置于干旱胁迫的条件下,其中所述植物与未转化植物相比在干旱条件下的存活表明发生了转化。因此该技术可用作选择性基因标记,也就是可见标记,特别是与植物选择和转化图相结合。此外,即使不对转基因植物进行胁迫,丧失了Ftase功能的植物的分枝和/或开花习性与野生型植物不同,可以用作成功转化的标记。当使用植物转化技术的时候该方法是特别有效的。在昼夜条件下,转基因植物的芽比未转化的芽具有更少的侧向分枝,即使不使用选择性抗生素标记,这也表明实际上丧失了Ftase活性。实施例实施例1突变条件本研究中所用的拟南芥植物可在土壤或含有琼脂的培养皿中在连续光照下生长,如文献所述(Haughn and Somerville 1986)。使用了两种不同的野生型拟南芥Meyerowitz′s Colombia(MCol)(Lelhe Seeds,Dripping Springs,TX)和Wassilewskija(Ws)(ABRC,Ohio State University)。筛选T-DNA突变的种子,在Wassilewskiia背景下分离突变体。它们得自俄亥俄州种子贮藏中心(ABRC贮藏号CS2606-2654)。T-DNA种子保藏由衍生自100个突变亲本细胞的49组1200个第四代(T4)后代组成。突变的亲本细胞是通过将野生型(T1)种子在含有携带卡那霉素抗性基因的T-DNA质粒的饱和的农杆菌培养物中培养得到的。然后用水洗涤种子,种植到盆中。从每株植物中得到T2代种子,检测其卡那霉素抗性。具有卡那霉素抗性的植物进一步生长为T3代。将T4代植物保藏在贮藏中心。每一组都单独筛选。筛选快速中子照射的种子,在Meyerowitz′s Columbia背景下分离突变体。突变的野生型种子(N1)照射60 Gy的快速中子,继续生长至下一代。得到的N2种子是从1387个N1亲本生长得到的大约11,000个种子组成的组。对十个这样的组单独筛选其ABA超敏性突变。在初始筛选中,所有种子都储存于4℃,不发生吸收作用。对于所有的后续筛选,种子在4℃在0.3 MABA上吸收一周,在光照下在22℃在5-7天后长出子叶。实施例2基因分析突变系与野生型回交三次。T-DNA突变与Ws和快速中子突变体回交得到MCol。分离era表型之后,将F2种子放置在0.3M的ABA上,在4℃吸收四天。吸收之后,将培养皿转至室温光照。在吸收后一周,检测其发育,观测在幼苗中是否存在张开的子叶。在分离和鉴别了携带一种突变表形的种系之后,通过将每种突变株的纯合种系进行杂交构建双突变株。本研究中所用的abi3等位基因是abi3-6(Nambara et al.,1994),abi1等位基因是abi1-1(Koornneef et al.,1982)。era1-2等位基因用作era亲本细胞。分离分析表明era1部分抑制了abi1对ABA的不敏感性,因此F2植物首先检测其对于3mM ABA的不敏感性,并且检测这些植物的F3种子对于0.3M的ABA的敏感性。对推定的era1abi1双突变株的F4代的后代进行检测,用DNA多肽性检验Era1和Abil。对于era1 abi3双突变株,检测F2种子对于3M ABA的不敏感性,检测成熟植物的突出心皮和不成熟的绿色种子(Nambara et al.,1994)。双突变株系也通过DNA多肽性检验Era1和Abi3。实施例3DNA和RNA分析用于DNA提取(Dellaporta et al.,1983)和RNA提取(Verwoerd et al.,1989)的方法在别的文献中有描述。根据标准方法(Sambrook et al.,1989),在65℃下进行高度严谨的Southernblot。所有的基因组和cDNA文库的筛选都在Gelman BioTrace NT膜上进行,根据制造商(Gelman Sciences)的说明书操作。要在era1-1突变株(分离自T12W DNA)中克隆在T-DNA和基因组DNA之间的插入连接,在γ-ZAPII(Stratagene)中制备T12W文库。用限制性内切酶EcoR I消化T12W DNA,并用右边界(RB)T-DNA做探针进行基因组Southern blot,得到三条带(13.0Kb,7.0Kb和8.0Kb)。用其它限制性酶进行的后续分析证明7.0和8.0Kb的带含有T-DNA和侧翼植物DNA之间的插入连接。用EcoR I消化基因组DNA克隆这些片段,用Prep Cell(Pharmacia)对消化的DNA进行分级,用RB作为探针用Southern blot分析鉴别那些含有7.0和8.0Kb片段的级分。然后将含有7.0和8.0Kb片段的级分与γ-ZAPII载体臂连接,根据制造商的说明操作(Stratagene)。筛选含有大约40,000个重组噬菌体的文库。鉴别五个阳性斑,根据制造商的说明分离切割的克隆插入物的质粒形式(Stratagene)。将两个能与RB杂交的质粒命名为pL4B和pL7,对其进行进一步鉴定。将pL4B克隆的2.3kB的EcoR I-BamH I限制性片段亚克隆到pBluescript质粒中,得到的质粒命名为pSC10。将pL7克隆的1.3Kb的Hind III-BamH I限制性片段亚克隆到pBluescript质粒中,得到的质粒命名为pSC 11。每个质粒都含有大于1.2Kb的与侧翼植物基因组DNA相连的T-DNA。用pSC10作为探针,筛选拟南芥cDNA文库,称为PRL2λ-ZipLox(ABRC,Stock CD4-7)。这种筛选鉴别出了五个阳性cDNA,最长的cDNA插入物,pZL23克隆用于筛选另外200,000个重组PRL2噬菌体。然后分离含有1.35Kb插入物的更长的cDNA插入物,pZL51克隆。对cDNA克隆pZL23和pZL51进行测序,用此来筛选由EcoR I部分消化野生型Columbia基因组DNA得到的30,000个γ-ZAPII斑。该文库的构建如上所述,除了消化DNA不是按大小分级之外。该筛选鉴别了四个阳性克隆。根据制造商的说明切割插入物并分离切割的克隆插入物的质粒形式。对包含全部pZL51克隆的6Kb的区域进行完全测序。用使用类似方法通过筛选lansberg erecta的λ-FIX基因组文库分离到的此基因插入物和14Kb的基因插入物(ABRC Stock CD4-8)作为探针分析快速中子突变株era1-2和era1-3的缺失序列的大小。实施例4蛋白质法尼基转移酶检测用来自野生型和突变株植物的不含细胞的提取物中的Ftase和合成的七肽作为反应底物检测法尼基转移酶(Ftase)。肽购自Genemed Biotechnologies,Inc。所使用的肽序列是基于Randall etal.(1993)的数据GGCCAIM(-CAIM)和GGCCAIL(-CAIL)。肽溶液是含有10mM二硫苏糖醇(DTT)的100%二甲亚砜(DMSO),并在不含DMSO的10mM DTT中稀释。不含细胞的提取物含有从野生型和突变株植物的三周龄植物的芽分离出的可溶性蛋白质。首先收集1g新鲜芽,在含有50mM Hepes(pH7.5),1mM MgCl2,1mM EGTA,5mM DTT,2μg/ml亮肽素,2μg/ml抑肽酶,和1μM PMSF。然后在4℃10,000×g离心10分钟并在100,000×g离心30分钟除去细胞碎片和膜。第二次离心后,轻轻倒出上清,用Bradford(1976)定量所有可溶性蛋白。将可溶性蛋白提取物与肽底物和放射性标记的3H-法尼基焦磷酸盐(FPP)(Amersham)共培育40分钟。每次反应混合物体积为25l,含有下述组分50mM Hepes(pH7.5),5mM MgCl2,5mMDTT,50μM肽,0.5μM[3H]FPP,和100μg的可溶性蛋白提取物。一个控制反应含有可溶性蛋白提取物,煮沸5分钟以使所有蛋白不可逆变性。加入终浓度为50mM的EDTA终止反应,然后在Silica Gel 60薄层层析(TLC)板(Millipore)上进行层析。TLC板用正丙醇和水(7∶3v/v)显影4-5小时。将板干燥,喷雾En3Hance(New England Nuclear),用Kodak X-OMAT AR胶卷在-70℃曝光4天。实施例5ERA1-B-葡糖醛酸糖苷酶基因构建体和转基因植物将5Kb的ERA1启动子的EcoR I-Hind III基因片段插入到含有具有抗生素氨苄西林抗性基因的不含启动子的GUS T-DNA质粒pBI121中。ERA1-β-葡糖醛酸糖苷酶(ERA1-GUS)融合构建体。然后将此构建体转至农杆菌株LB4404中。农杆菌生长到光密度为0.8O.D.单位(在595nm测量)。然后用水洗涤细胞,在无菌的10%甘油中重悬并加入纯化的编码ERA1-GUS融合构建体的质粒DNA。最后,将细胞和DNA的混合物加入到电穿孔仪中,200欧姆25uf,2.5kv。然后将细胞置于含有100μg/ml氨苄西林的Luria Broth琼脂平板上,在28℃生长两天。培养氨苄西林抗性的转化子,将用标准方法从培养物中分离出的质粒DNA用于后续的植物转化实验。用生长至0.8O.D.密度单位(在595nm测量)的饱和农杆菌培养物对植物进行真空浸润制备转基因植物。使野生型植物在标准实验室条件(在25℃,150EM-2s-1,潮湿,持续光照的环境下)下生长,直至在大约5周时它们产生第一个苔。下一步,除去植物茎,将植物浸在农杆菌溶液中,在20mBar的真空环境下放置5分钟。然后破坏真空,将植物转至土壤中,使其在上述的标准实验室条件下复原。两个月后,植物产生新的花和种子,收获它们并干燥2天。将单个植物的种子放置到含有50μg/ml卡那霉素的Murashige和Skoog(MS)基本平板培养基上。两周后鉴别绿色的卡那霉素抗性幼苗,并将其转至土壤中,使其生长出种子。这些种子发芽后用荧光GUS底物Imagene Green(MolecularProbes,Eugene,Oregon)检测幼苗的GUS活性。将幼苗在黑暗中在室温下悬浮于GUS缓冲液(50mM磷酸钠,pH7.0,10mMEDTA,0.1% Triton X-100,0.1%肌氨酸钠,4mM Imagene Green)中2-4小时检测其GUS活性。在显微镜下以25倍的放大系数用蓝光观察幼苗,产生阳性荧光信号。当此混合物用蓝光处理的时候,GUS活性在由红色叶绿素产生的红色自体荧光背景下产生黄色的光。实施例6干旱实验六个野生型和六个era1-2幼苗在持续光照和持续供水(25℃,150Em-2s-1,70%湿度,持续光照)的条件下生长四周。将植物和盆称重,然后用铝箔覆盖盆以延缓土壤蒸发。此时,不再给植物供水,每天对每个盆称重。实验结束的时候将植物从盆中移出,再另外干燥两周,称重确定干燥土壤和盆的重量。然后将这个重量从每个样品中减去。实施例7分离叶片的年龄相关的变化比较从植物上分离的野生型Columbia和era1-2突变株的成熟莲座形叶的叶绿素含量。发芽后使植物在持续光照和温度(150E/m2·s,22℃)下生长至相似的3周发育龄。此时摘除几株植物发芽后长出的第五个叶片,置于含有0.8%琼脂和最少需要量盐的培养皿上。将培养皿封口并在持续光照(50E/m2·s)下在22℃放置12天。拍照并在0,3,6,9,和12天比较颜色。实施例8测定选定基因在老化叶片中的转录水平发芽后使突变株(era1-2)和野生型植物在持续光照和温度(150E/m2·s,22℃)下生长至相似的4周发育龄。此时从所有植物上将发芽后长出的第五片莲座形叶摘除。检测这些叶片中下述三个基因的表达拟南芥叶绿素结合蛋白(CAB)和衰老激活基因12和13(SAG12和SAG13)。在植物抽苔之后的第0,4,8天用Northern blot分析检测mRNA的转录水平。CAB基因编码在光合作用中与光的捕获有关的拟南芥叶绿素结合蛋白。它是叶片的绿色所必需的,是植物中叶绿素循环的良好标记。当受到衰老诱导的时候野生型植物中的CAB的转录水平降低。而在era1-2突变株的老化叶片中没有观察到转录水平的降低。SAG12和SAG13是由衰老过程中的差异表达克隆的拟南芥基因(SAG代表衰老激活基因)。两个基因的转录在野生型拟南芥植物中在衰老开始的时候受到诱导。这些基因在era1-2突变株中在相同的发育条件下不受到诱导。实施例9拟南芥FTA的克隆和转化载体的构建拟南芥FTA序列是用RT-PCR从分离自叶片组织的总RNA中获得的,总RNA是用相应于SEQ ID NO17和SEQ ID NO18的引物分离的。将得到的片段用BamHI和SmaI消化并克隆到质粒pCR2.1中。Clonetech载体pBI121用作反义构建体的骨架。用BamHI和Eco 1 CRI消化除去GUS基因,用FTA插入物替换,FTA插入物是用SmaI和BamHI从pCR2.1-FTA中切割并与载体SEQ ID NO10连接得到的。表1SEQ ID NO175′-AAAGGATCCTCAAATTGCTGCCACTGTAAT-3′SEQ ID NO185′-AAACCCGGGATGAATTTCGACGAGAACGTG-3′实施例10非全长甘蓝型油菜FTA知FTB核酸序列的克隆用Qiagen RNeasy试剂盒从叶和根组织中分离RNA。用表2所示的引物用已知方法进行RT-PCR。用引物对SEQ ID NO25和SEQ ID NO26得到FTA序列。用引物对SEQ ID NO27和SEQ ID NO28得到FTB序列。表2SEQ ID N0255’-GGATCCATGGATTACTTCCGTGCGATTTACTTCTCC-3’SEQ ID NO265’-AAAAAGCTTCCATGCCCAATAGTTAGCTCTTATTGGATC-3’SEQ ID NO275’-AAAAGCTTTGGCTTTGTTACTGGATTCTTCATTCAAT-3’SEQ ID NO285’-AAATCTAGAAGCTTCATAATACCGATCCAAGACAATGTT-3’用Qiagen PCR column spin试剂盒从RT-PCR反应混合物中分离PCR产物并连接到克隆载体pBluescript KS+上。用EcoR V消化该载体,在存在dTTP的条件下用Taq聚合酶处理产生3’突出端,以连接PCR产物。将连接产物转至大肠杆菌DH5α细胞中,选择阳性克隆,将得到的插入物测序。实施例11从大豆和玉米中获得的非全长FTA和FTB核酸序列的克隆用Qiagen RNeasy试剂盒从叶和根组织中分离RNA。用表3所示的引物用已知方法进行RT-PCR。用引物对SEQ ID NO29和SEQ ID NO30得到大豆FTA序列。用引物对SEQ ID NO31和SEQ ID NO32得到大豆FTB序列。用引物对SEQ ID NO33和SEQ ID NO34得到玉米FTB序列。表3SEQ ID NO295’-AAAGGATCCATGGAATCTGGGTCTAGCGA-3’SEQ ID NO305’-AAATCTAGAAGGAAGTCTGCTCTTGCGC-3’SEQ ID NO315’-AAATCTAGAGCCACCATTCCTCGCAACG-3’SEQ ID NO325’-AAAGAGCTCGTGGTGGAGAATCTGGGTGC-3’SEQ ID NO335’-GGCGGATCCCGACCTACCGAGG-3’SEQ ID NO345′-AAAGAGCTCGTGGATGGATTGGCTCCAGC-3′用Qiagen PCR column spin试剂盒从RT-PCR反应混合物中分离PCR产物并连接到克隆载体pBluescript KS+上。用EcoR V消化该载体,在存在dTTP的条件下用Taq聚合酶处理产生3’突出端,以连接PCR产物。将连接产物转至大肠杆菌DH5细胞中,选择阳性克隆,将得到的插入物测序。实施例12序列分析拟南芥FTA所公开的999个核苷酸的核酸(也称为FT1)如表4A所示。用于PCR的引物用粗体表示。 所公开的FT1多肽(SEQ ID NO11)由SEQ ID NO7编码,具有326个氨基酸残基,如表4B所示,用单字母氨基酸表示。 由于克隆策略决定了测定的序列不含5’或3’非翻译序列。用本文公开的序列作为杂交探针,可以筛选和分离cDNA和基因组文库的全长序列,或者可以使用cDNA末端的快速扩增技术(RACE)或其它PCR技术。拟南芥核苷酸序列和其编码氨基酸序列与已公开序列的相同性百分比如图17所示。本发明还包括与SEQ ID NO7的拟南芥法尼基α亚基互补的核酸序列。互补序列如SEQ ID NO8所示。SEQ ID NO9的核酸序列显示了制备用于与表达载体连接的SEQ ID NO8的核酸序列。SEQ ID NO8aaaggatcctcaaattgctgccactgtaatcttgctcttcctccatgcccaatagttagctcttataggatctacacgaccaagaatagtacacaccaaattggccaagttagtctctggttcttcattagctagagctctcactgagtctttatgctcgttggttggtctcagtccatcacatagaagatccaaaagggtgctcagagcgaatccatggaagcaatctgtgcgggatagaacattcaaacagactgaggaaacacttggatcactaatccaggattctttggcgtctttgtaaagcgcttttaggtatcgccatgagctctcgtttgcaggattggttaaaatggctttgattgtgtagcttacttcagattctctcatggcttctaggcctcccaacaaaggagattgggtgatgacataatacctctgattccaggcggaattgttaaagacgtcagcttcaaggagctcgtgacagtaatcgagctcatcttcccatcctcctaatgcccgtagtgtccactgcctaggtgaccaagcatgataatgtttggcatcaagtgaaagtactctacgggtaaattcaagttctctccctgcaacatcaggacccagtttctctgcaacccatcgccgatgatgccacagttggtagttcttagagttatcctcagcaatgcgttcgaggaactcgagttcttcaaacaagtcgtgattaagggcctcgagtactaggcgcctgaaatgccacactgtgtagttgccggagtttaagaggagggtttcttccgtgagtcgtagtgcgcgaggagatcgctcgtcggaaaagtaaatcgcacggaagtaatccatagtctcgcggaactcttccttgtaggcaattggcaccactggattcggaccatcgtcctgagtcaatgggaccacgtctgaccactccaatcgttggctcagtggcacggtctcgtcgaaattcatcccgggtttSEQ ID NO9gatcctcaaattgctgccactgtaatcttgctcttcctccatgcccaatagttagctcttataggatctacacgaccaagaatagtacacaccaaattggccaagttagtctctggttcttcattagctagagctctcactgagtctttatgctcgttggttggtctcagtccatcacatagaagatccaaaagggtgctcagagcgaatccatggaagcaatctgtgcgggatagaacattcaaacagactgaggaaacacttggatcactaatccaggattctttgtcgtctttgtaaagcgcttttaggtatcgccatgagctctcgtttgcaggattggttaaaatggctttgattgtgtagcttacttcagattctctcatggcttctaggcctcccaacaaaggagattgggtgatgacataatacctctgattccaggcggaattgttaaagacgtcagcttcaaggagctcgtgacagtaatcgagctcatcttcccatcctcctaatgcccgtagtgtccactgcctatgtgaccaagcatgataatgtttggcatcaagtgaaagtactctacgggtaaattcaagttctctccctgcaacatcaggacccagtttctctgcaacccatcgccgatgatgccacagttggtagttcttagagttatcctcagcaatgcgttcgatgaactcgagttcttcaaacaagtcgtgattaagggcctcgagtactaggcgcctgaaatgccacactgtgtagttgccggagtttaagaggagggtttcttccgtgagtcgtagtgcgcgaggagatcgctcgtcggaaaagtaaatcgcacggaagtaatccatagtctcgcggaactcttccttgtaggcaattggcaccactggattcggaccatcgtcctgagtcaatgggaccacgtctgaccactccaatcgttggctcagtggcacggtctcgtcgaaattcatccc甘蓝型油菜FTA所公开的882个核苷酸的核酸(也称为FT2)如表5A所示。 所公开的FT2多肽(SEQ ID NO13)由SEQ ID NO12编码,具有274个氨基酸残基,如表5B所示,用单字母氨基酸表示。 由克隆策略决定了序列不是全长。与拟南芥序列相比,氨基末端缺少42个氨基酸,羧基末端缺少10个氨基酸。甘蓝型油菜的核苷酸序列和其编码氨基酸序列与已公开序列的相同性百分数如图17所示。用本文公开的序列作为杂交探针,可以筛选和分离cDNA和基因组文库的全长序列,或者可以使用cDNA末端的快速扩增技术(RACE)或其它PCR技术。本发明还包括与SEQ ID NO12的甘蓝型油菜的法尼基转移酶α亚基互补的核酸序列。互补序列如SEQ ID NO35所示。SEQ ID NO35CCATGCCCAATAGTTAGCTCTTATTGGATCAACACGACACAGAATGGTACACACCAAATTGGCCAAGTTAGTCTCTGGTTCTTCATTAGCTAGAGCTTTCACCGAGTCTCTATGCTCGTTGGTTGGTCTCAACCCATCGCACAGAAGATCCAAAAGGGTGCTCAGAGCGAATCCATGGAAGCAGTCCGCGCGTGAGAGAACTTTCAAACAGACTGAGGAAACACTTGGATCACTAATCCAAGACTCTGTGTCGTCTTTGTAAAGGGCTTTCAGGTACCTCCAAGAGCTCTCGTTCCCGGGATTTGCTAAAATGGCTTTGACTGTGTAGCTTACTTCAGATTCTCTCATGGCTTCTAGGCCTCCCAACGAAGGTGATCTAGTTATAACGTAATACCTCTGATTCCATGCAGAGTTGTTAAAGACGTCAGCTTCAAGGAGCTCGTGGCAGTAGTTAAGCTCATTTTCCCATCCTCCTAATGCTTGTAGCGCCCACTGCCTATGTGACCAAGCATGATAATGCTTGGCATCAAGTGATAGTACCCTCCGAGTAAACTCAAGTTCCTTTCCTGCAACATCAGGACCCAGTTTCTCTGCGACCCATCGTCGATGATGCCACAACTGGTAGTTCTTAGAGTTATCCTCAGCAATGCTTTCGATGAACTTGAGCTCTTCATACAAGTCGTTATTAAGCTCCTCGAGTACTAAGCGCCCGAAGTGCCACACGGTGTAGTTGCCCGAGTTTAAGCGGAGAGCTTCTTCCGTGAGTCGCAGCGCGCGAGCAGAACGCTCGTCGGAGAAGTAAATCGCACGGAAGTAATCCAT甘蓝型油菜FTB所公开的1119个核苷酸的核酸(也称为FT3)如表6A所示。 所公开的FT3多肽(SEQ ID NO15)由SEQ ID NO13编码,具有370个氨基酸残基,如表6B所示,用单字母氨基酸表示。 由克隆策略决定了序列不是全长。与拟南芥序列相比,氨基末端缺少31个氨基酸,羧基末端缺少5个氨基酸。甘蓝型油菜的核苷酸序列和其编码氨基酸序列与已公开序列的相同性百分数如图18所示。用本文公开的序列作为杂交探针,可以筛选和分离cDNA和基因组文库的全长序列,或者可以使用cDNA末端的快速扩增技术(RACE)或其它PCR技术。进行序列比较,相同性百分数如图17和图18所示。本发明还包括与SEQ ID NO14的甘蓝型油菜的法尼基转移酶亚基互补的核酸序列。互补序列如SEQ ID NO36所示。SEQ ID NO36AAATCTAGAAGCTTCATAATACCGATCCAAGACAATGTTGTGGAGGAGGTGAACAGGTTCAAGGTGGTTTGCGTAGCCACCCAAAATGTCACGAGTCAAAGGAGGAGTGTCCTCGTCTTTTGACCAAGCGTGTTGAGCCACGGAAAGACCGCTTAGGCAGTAACATGTGTGGTAGAAGTCACGGGGTTTCCTCAGCTTGTCTCTGAATCCACCATCAGCAACCTGAGAGCACAAGAGCACATATCTTTGCAAGCCGAGGCTATCAAAAACAGGTTGAATTCTCCTGTCAATGTAGGTAGACGTATGATGAACTTGGTGACCATTCCCTGAATCTTCATCGCTATCCTCATCAGAATCATCTTCATCACTGTCTTCAGGATCATCTTCATCATGACCATGTTCCTCGTGATCTTCATCTGTCCCTTGTGACATATGTGATGATGATCCATGAGGTGCCATATCCTGGGATGAAAAAAATCGCTGTAGTAGAACACAGGGGGCTGCCTGCCAAAACGTGTAGCAACCGTCGACCAATTTGTTCGTCCTACCTTGGAATCCCATTTCTACTCCTTGTCGATGTACAACCCAATTCATTAACGAATCCAAATTCAAGCGGTCGACTTCATTGATTAAAATCATAGTAGCCAACCCACAGTACGTGTACCCACCATGAGCTTCGGAGCCAGGTTCCCCTCCAATGCCACCTTCATAAGTTTGGCAACTCAAAATGTAATCTCCTAAGCCGCGGGTGAGTTCATCATCCACAATGTTCAGGATGCTTGCAATCAAAATCGCAGTGTAGCACGCTCGCACATCTATTTCTCCCATATTATGCATCCTGAAACCTCCATTTGTATCCTTCATTCGTCTTAAGAAACAAGCCATTTGTTCTCTGTTAATTGAAGAGAAGGCTTTCTCACCTCCTAAAGTAACAAGTGTATTCACTGCAGCATAACTTGTTGCAAGATGTGGAAGTTGGCCAGGACCACCACCATATCCACCATCAGAACCCTGGCAACGTCCAAGAAAATCGATTGCATTGTTTTCTAAGTCATCATCCACAGACTCCCCAAGCAAAGCAATTGAATGAAGAATCCAGTAACAAAGCCA大豆FTA所公开的1041个核苷酸的核酸(也称为FT4)如表7A所示。 所公开的FT4多肽(SEQ ID NO39)由SEQ ID NO37编码,具有347个氨基酸残基,如表7B所示,用单字母氨基酸表示。 由克隆策略决定了序列不是全长。大豆的核苷酸序列和其编码氨基酸序列与其它序列的相同性百分数如图17所示。用本文公开的序列作为杂交探针,可以筛选和分离cDNA和基因组文库的全长序列,或者可以使用cDNA末端的快速扩增技术(RACE)或其它PCR技术。本发明还包括与SEQ ID NO37的大豆法尼基转移酶α亚基互补的核酸序列。互补序列如SEQ ID NO38所示。SEQ ID NO38AGGAAGTCTGCTCTTGCGCCAAATCCAATAGTTGGTTCTAATTGGATCAACTTGTTTTAGGATAGAACAAATATTTCGTGCTATATTTAAATTTTGTTGTTCCCCTTTCTCATCATCATCTAAATCTTGTTTATCCATATCTGCGGTCTTTAAGGCGTCAATGGCATCTCTAATGTCTTCATTTGGTTGATAACCAAAGCATATAAGATCTAAAATAGTGCTAAGAGCAAACACGTAGTTGCTCTTAGTTCTCAAAATCTTTAAGCATACTGAAGAAACTTGAGGATCATTTACCCATGAAGTAGTTTCACCTTTATAAAGTCCTCGTAGATATCTCCACGAGCTTTCATTTTCAGGGTAGGCTATAATGGCTTCGATGGTGTAAAGCACTTCAGACTCTCTCATAGCTTTTAGGCCCCCCAAGAAAGGAGACCTTGTTATGACAAAATATCTCTGATTCCAAGCAGAATTGTTAAAAATGTCTTCTTTAAGTAGTTCTGTGCAATAATTAAGTTCATCTTCCCATCCTCCTAGTGTTTGAAGAGCCCACTGTCTATGAGACCATGCATGATAATGTTTGGCATCAACGGACAGTATCTTTTTGGTGAACTCGAGCTCATTGTTTCTAGCTTCAGGACCTAACTTCTCGGCAACCCATCGTCTAGGATGCCTACAGAACATNCACATCTGATAATTTTTAGAATTTCCAGCGGCCATACGCTCCACAAACTCCAGTTCATCGTTCAAGTCGACTTTTAGCGACTCAAGTAACAACCGTCGGAAATGCCACACAGTGTAGTTGCCGGAGTTGAATTGAACGGCTTCGGCTGTGAGAGCGAGGGCGCGAGGGGAGCGTTCATCGGTGAGGTAAACGGCGCGAAAGTAATCCATAACTTCGGAAAACTCTTCAGTGTACTGGATCGGAACGACAGGGTTAGGGCCGTCGTTTTGAGGAACCGGAGTAACATCTGACCACTCCACTCTCTCCCTCAACGGCACGCGTTGCTGCACCTCTTCTCCTTCGCTAGACCCAGATTCCAT大豆FTB所公开的1035个核苷酸的核酸(也称为FT5)如表8A所示。 所公开的FT5多肽(SEQ ID NO42)由SEQ ID NO40编码,具有378个氨基酸残基,如表8B所示,用单字母氨基酸表示。 由克隆策略决定了序列不是全长。大豆的核苷酸序列和其编码氨基酸序列与其它序列的相同性百分数如图17所示。用本文公开的序列作为杂交探针,可以筛选和分离cDNA和基因组文库的全长序列,或者可以使用cDNA末端的快速扩增技术(RACE)或其它PCR技术。本发明还包括与SEQ ID NO40的大豆法尼基转移酶β亚基互补的核酸序列。互补序列如SEQ ID NO41所示。SEQ ID NO41GTGGTGGAGAATCTGGGTGCTTTGACCAACTATACTGGCACAATGAGAGTCCACTTAAACAGTAACATGTGTGATAATGATCTCTACGTTTACCCGGTTTGTCTCTCAGTCCACCCTCTTGCTCCTGTGCACATAAGAGAATATATTGCTGTAAAGCAATACTGTGAAAAAGTGGTTCTTGTGCTCTCCACTCATTAATAAATTTATAGGCAATATTTTTAAAATCAGATGAACTGGATTCACTGGTGCCTTCATGCTCACCACGGCATGTTGCATGACTAGAGGTTCCATCCAAACTTTCTTTTGCTTCAGATACATAAGATACCGCAAAAATCTGTGATGTCTCTTCCATCTGTTTGTTGATAATAGAAGATAATCTTTGCAATAGAGCAACAGCACCTCCCTGCCAAAAGGAATAGCATCCATCCACCAGTTTATTTGTTCTCCCCTGGAATCCACATTCCTTACCTTGTCGGAATACCACCCAGTCAACTAATCGAGGCAGATCCAAGTGATTAACCTCACCAATCAGAATCATTGTAGCTAATCCACAAAAGGTGTACCCACCATGAGCCTCAGAACCAGGCTCACCAGCAATGCCACCCTCATATGTTTGACAGCTTATAATGTAGTCTCCAACATTCTGGATCAGCTCATCATCCAAAATGTTCAAAACACTTGCAACAGAAATGGCAGTGTAGCAAGCTCGAACATCAATTTCACCTTCATCATGCATCCTGAATCCACCATTTGGTTGCTTCATCCGCCGCAGAAACCCATACAGTTTATCTCTATTAATTGATGCCAGGGATTTCTCACCACCCAAAGTAATAAGTGAATTAACAGCAGCATAAGTTGTGGCAATATGAGGCATCTGGCCTGGTCCCCCGGCATATCCACCATTCGGATCCTGGCAACGGTTAAGAAAATCGATAGCGTTATCTTCGAGTTCATCATCGACGGATTCTCCCAACAAAGCAATGGAGTGGAAGATCCAGTAGCAGAGCCAGGGTCGATTAGCGTCCAAAACGGAAAATGCGGAACTGAGATGGCGAAGGCCTTTGGAGACATACTGCATGTGATTATCGCGTTGAAGCTCCAACATGAGGGTTTGGGCGTTGCGAGGAATGGTGGC玉米FTB所公开的1235个核苷酸的核酸(也称为FT6)如表9A所示。 所公开的FT6多肽(SEQ ID NO45)由SEQ ID NO43编码,具有414个氨基酸残基,如表9B所示,用单字母氨基酸表示。 由克隆策略决定了序列不是全长。大豆的核苷酸序列和其编码氨基酸序列与其它序列的相同性百分数如图17所示。用本文公开的序列作为杂交探针,可以筛选和分离cDNA和基因组文库的全长序列,或者可以使用cDNA末端的快速扩增技术(RACE)或其它PCR技术。本发明还包括与SEQ ID NO43的玉米法尼基转移酶β亚基互补的核酸序列。互补序列如SEQ ID NO44所示。SEQ ID NO44GGATGGATTGGCTCCAGCAAATTAGAGTACGGTCCAAGCACATGCTGAGGTAATGGGCACGAACCAGTATCAGTCATGGCACTGTACTGGCTAACTGCGAGGCCACTGAGGCAGTAGCATGAATGATAGTGATCTCTGTTCTTTCCAGGCTTATCCCTCAAGCCTCCCTCTAGTACCTGAGAACAAAGTAGGATGTATTGTTGCAGGGCAATGTTATGGAAGAGTGGGCCAATTTGGTTGCTCTGTTGTATAAAATCAAATCCAAACTTCGCATAGTCCACAGCAGAGGAAGACTTATTCGCGGTGCACCCATATGAACTGGTGCTGCAGGCATCCTCTCCTGATGGCCTTTTGCAGGAATACGAGGACCTCAATTGCTTATCAACAATCGTAATTAACTTTTGTGTGAAAGCAATGGCAGCTCCCTGCCAAAAGGAGTAGCAACCATCAACCAATTTATTAGTTCGTCCTTGAAATCCGCATTCCACTCCTTGACGAAAAGCCACCCAGCCAATCAAACTAGGCAAGTCAACTTTCTCTGCCTCATTAAGCAGGATCAAAGCAGCCAATCCACAGAATGTATACCCACCATGTGCTTCAGCATAAGGCTCCCCAGCAATACCACCTTCATAAGTTTGACATCTTGCTATGTAGTCGCCTACACCTTTTGCCAGTTTAAAATCAAGAATATTCACAAGGCTGGCAACCGATATAGCGGTGTAGGAAGCACGGACATCAATTTCGCCACCATCATGCATTCTGAAAGCACCTGATACATCTTTCATCTGCAGCATAAAATTGTACAGGTTGCCCCTATTGATTGATGACAATGCTCTTTCGCTCCCTATTGTCACAAGTGTATTTACAGCAGCATAAGTCGTAGCTAGGTGAGGCAACTGTCCAGGTCCACCACTATATCCACCATCTTTATCCTGACATCGAGCTAAGAAGTCTATGATATCATTCTCAAGATCATCATCAAGTGCTTCATCCAGCAAAGCAAGTGGATGAACCATCCAGTAGCATAGCCAAGGGCGATTGGCATCTAGAACATGAAAGGCTGGTCCCATATGCCTCAGCCCAGGCGTCAGATACTCGATATGCTGATCACGCCACAGCTCTAGCATGATGGATTTCGTGTTGGGCGCGGCCCCGAAGAGGGAGCGGTAGATGTCGCCAACCCTGGCCTCCACCTTCATCTGCTCCACCTGCGTCACCGTGAGCCTCGGTAGGTCGGGATCCGCC上述的FTA和FTB核酸和氨基酸与FT蛋白家族的其它成员具有同源性(GenBank ID NOU63298,U83707,和U73203;WO 00/14207;Cutler et al.,Science 273(5279)1239-41,1996;Ziegelhoffer et al.,Proc Natl Acad Sci USA. 97(13)7633-8,2000)。这些序列和它们之间的同源性用ClustalW图解分析,显示于表10A-10D。在ClustalW队列中,黑色标注的氨基酸残基表示保守序列区域(也就是保留结构或功能性质所需要的区域),其中非突出显示的氨基酸残基保守性较低,可以进行改变以得到更宽的范围,而不会改变蛋白结构或功能。表10A FT亚基的ClustalW核酸分析1)BNA-12;FT2(SEQ ID NO12)2)At-FT-A;FTI(SEQ ID NO7)3)PPI-Soy-FTA;FT4(SEQ ID NO37)4)豌豆-FT-A(SEQ ID NO65)5)番茄-FTA(SEQ ID NO66)6)水稻-FT-A(SEQ ID NO67)7)玉米-FT-A(SEQ ID NO68)8)大豆1-FT-A(SEQ ID NO69)9)大豆2-FT-A(SEQ ID NO70)10)小麦-FT-A(SEQ ID NO71) PPI-大豆-FTA CAGCCGAAGCCGTTCAATTCAACTCCGGCAACTACACTGTGTGGCATTTCCGACGGTTGTTACTTGAGTC豌豆-FT-A CCGCCGAAGCTATCGGTTTAAACGCCGGAAACTACACTGTGTGGCATTTCCGGCGGTTATTACTTGAGTC番茄-FTA CTGGTGAAGCTATTCAGCTAAACCCTGGAAATTACACTGTATGGCAATTTAGGCGTGTTGTGCTGGAGGC水稻-FT-A CCGCCGAGGTCATCGACCTTAATCCCGGCAACTACACGGTGTGGCATTTTAGGCGTCTTGTTCTAGAGGC玉米-FT-A CCGCCGAGGCCATCCAGCTCAACCCCGGCAACTACACTGTCTGGCATTTCCGGCGCCTTATTCTGGAGTC大豆1-FT-ACAGCCGAAGCCGTTCAATTCAACTCCGGCAACTACACTGTGTGGCATTTCCGACGGTTGTTACTTGAGTC大豆2-FT-ACAGCCGAAGCCGTTCAATTCAACTCCGGCAACTACACTGTGTGGCATTTCCGACGGTTGTTACTTGAGTC小麦-FT-A CCGCCGACGCCATCCACCTCAACCCCGGCAACTACACTGTATGGCATTTCAGGCGCGTTGTTCTAGAGGC360 370 380 390 400 410 420....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12GCTTAATAACGACTTGTATGAAGAGCTCAAGTTCATCGAAAGCATTGCTGAGGATAACTCTAAGAACTACAt-FT-A CCTTAATCACGACTTGTTTGAAGAACTCGAGTTCATCGAACGCATTGCTGAGGATAACTCTAAGAACTACPPI-大豆-FTA GCTAAAAGTCGACTTGAACGATGAACTGGAGTTTGTGGAGCGTATGGCCGCTGGAAATTCTAAAAATTAT豌豆-FT-A ACTGAAAGTTGACCTACATGTTGAACGGGAATTCGTGGAGCGTGTTGCCAGTGGCAATTCAAAAAATTAT番茄-FTA ATTGGGTGTTGATTTACGTGAAGAATTGAAGTTTGTTGATCGCATTGCTGGGGAGAATACCAAAAATTAT水稻-FT-A ACTGGATGCTGATCTGCGTGAGGAAATGGATTTTGTGGACCGAATTGTCGAATGTAACCCAAAAAATTAT玉米-FT-A ACTAGATTTTGATTTACTAGAGGAGATGAAATTTGTCGAAAAAATTGCTGAATGCAATCCAAAAAATTAC大豆1-FT-AGCTAAAAGTCGACTTGAACGATGAACTGGATTTTGTGGAGCGTATGGCCGCTGGAAATTCTAAAAATTAT大豆2-FT-AGCTAAAAGTCGACTTGAACGATGAACTGGAGTTTGTGGAGCGTATGGCCGCTGGAAATTCTAAAAATTAT小麦-FT-A ACTGGATGCTGATTTATTGCTAGAAATGCATTTTGTGGACCAAATTGCTGAATCTAATCCAAAAAATTAC430 440 450 460 470 480 490....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12CAGTTGTGG------------------------------------CATCATCGACGATGGGTCGCAGAGAAt-FT-A CAACTGTGG------------------------------------CATCATCGGCGATGGGTTGCAGAGAPPI-大豆-FTA CAGATGTGN----ATGTTCTG----------TAG----------GCATCCTAGACGATGGGTTGCCGAGA碗豆-FT-A CAGATTTGG------------------------------------CATCATAGACGATGGGTTGCTGAGA番茄-FTA CAAATATGG------------------------------------CATCATAGACGGTGGCTTGCTGAGA水稻-FT-A CAAATCTGG------------------------------------CATCACAAGAGATGGCTTGCGGAGA玉米-FT-A CAAATCTGG------------------------------------CACCATAAGAGATGGCTTGCTGAGA大豆1-FT-ACAGATGTGG------------------------------------CATCATAGACGATGGGTTGCCGAGA大豆2-FT-ACAGATGTGGTGTGATGCTCTGCTCTGCTCTTTCTTCCATACTTTGCATCATAGACGATGGGTTGCCGAGA小麦-FT-A CAAGTCTGG------------------------------------CATCACAAGAGATGGCTTGCTGAGA500 510 520 530 540 550 560....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12AACTGGGTCCTGATGTTGCAGGAAAGGAACTTGAGTTTACTCGGAGGGTACTATCACTTGATGCCAAGCAAt-FT-A AACTGGGTCCTGATGTTGCAGGGAGAGAACTTGAATTTACCCGTAGAGTACTTTCACTTGATGCCAAACAPPI-大豆-FTA AGTTAGGTCCTGAAGCTAGAAACAATGAGCTCGAGTTCACCAAAAAGATACTGTCCGTTGATGCCAAACA豌豆-FT-A AATTAGGACCTGAAGCTAGAAACAGTGAACTTGAGTTCACCAAAAAGATTCTGTCTGTTGACGCCAAACA番茄-FTA AGCTGGGAGCTGATGCTGTGACAAATGAGCTAGAATTCACCAAGAAAATATTTTCTCAGGATGCAAAAAA水稻-FT-A AATTAGGACCAGATATTGCAAATAAAGAGCACGAATTTACAAGGAAGATACTTTCTATGGATGCTAAAAA玉米-FT-A AATTAGGACCTGGTATTGCAAACAAAGAGCATGAATTCACAATGAAGATACTTGCTATTGATGCAAAAAA大豆1-FT-AAGTTAGGTCCTGAAGCTAGAAACAATGAGCTCGAGTTCACCAAAAAGATACTGTCCGTTGATGCCAAACA大豆2-FT-AAGTTAGGTCCTGAAGCTAGAAACAATGAGCTCGAGTTCACCAAAAAGATACTGTCCGTTGATGCCAAACA小麦-FT-A AAATAGGACCAGATGCTGCAAATAGTGAACATGACTTCACAAGGAAGATACTTGCTATGGATGCTAAAAA570 580 590 600 610 620 630....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12 TTATCATGCTTGGTCACATAGGCAGTGGGCGCTACAAGCATTAGGAGGATGGGAAAATGAGCTTAACTACAt-FT-A TTATCATGCTTGGTCACATAGGCAGTGGACACTACGGGCATTAGGAGGATGGGAAGATGAGCTCGATTACPPI-大豆-FTA TTATCATGCATGGTCTCATAGACAGTGGGCTCTTCAAACACTAGGAGGATGGGAAGATGAACTTAATTAT碗豆-FT-ACTATCATGCATGGTCTCATAGGCAGTGGGTTCTTCAAAATCTAGGAGGATGGGAAGATGAACTCAGTTAT番茄-FTA TTATCATGCTTGGTCCCATCGGCAGTGGGTCCTTCAAGCACTTGGAGGATGGGAAGATGAGCTTGCTTAT水稻-FT-ATTACCATGCTTGGTCTCATAGGCAGTGGGTTCTTCAAGCACTGGGTGGATGGGAGACTGAACTACAGTAT玉米-FT-ATTATCATGCTTGGTCTCATAGGCAGTGGGTTCTTCAAGCGTTGGGGGGATGGGAGACTGAATTAGAATAC大豆1-FT-A TTATCATGCATGGTCTCATAGACAGTGGGCTCTTCAAACACTAGGAGGATGGGAAGATGAACTTAATTAT大豆2-FT-A TTATCATGCATGGTCTCATAGACAGTGGGCTCTTCAAACACTAGGAGGATGGGAAGATGAACTTAATTAT小麦-FT-ACTACCATGCTTGGTCCCATAGGCAGTGGGTTCTTCAAGCATTGGGTGGATGGGAGAGTGAACTGCAGTAC640 650 660 670 680 690 700....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12TGCCACGAGCTCCTTGAAGCTGACGTCTTTAACAACTCTGCATGGAATCAGAGGTATTACGTTATAACTAAt-FT-A TGTCACGAGCTCCTTGAAGCTGACGTCTTTAACAATTCCGCCTGGAATCAGAGGTATTATGTCATCACCCPPI-大豆-FTA TGCACAGAACTACTTAAAGAAGACATTTTTAACAATTCTGCTTGGAATCAGAGATATTTTGTCATAACAA豌豆-FT-A TGTAGTGAACTGCTTGCAGAAGACATATTTAACAATTCTGCTTGGAATCAGAGATACTTCGTCATAACAA番茄-FTA TGTCAACAACTCCTTGAAGATGATATTTACAACAATTCTGCTTGGAATCAGAGATACTTTGTCGTAACAC水稻-FT-A TGCAACCAGCTGCTTGAGGAAGACGTCTTCAATAATTCAGCTTGGAATCAGAGATACCTTGTAATAACAA玉米-FT-A TGTGACCACTTACTTAAGGAAGACGTCTTCAATAATTCAGCTTGGAATCAGAGATACTTTGTTATAACAA大豆1-FT-ATGCACAGAACTACTTAAAGAAGACATTTTTAACAATTCTGCTTGGAATCAGAGATATTTTGTCATAACAA大豆2-FT-ATGCACAGAACTACTTAAAGAAGACATTTTTAACAATTCTGCTTGGAATCAGAGATATTTTGTCATAACAA小麦-FT-A TGCAACCAGCTTCTTGAGGAAGATGTCTTCAATAACTCAGCTTGGAATCAGAGATACCTTGTGGTAACAC 1410 1420 1430 1440 1450 1460 1470....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12-----------------------------------------------------------------------At-FT-A-----------------------------------------------------------------------PPI-大豆-FTA-----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA--------------------------------------------------番茄-FTACTGCTATGTTTTGTAAGTTTTGGATATGGATGCATAGCTTATTGATACTTTTGGTGACTTAAAATACTCT水稻-FT-A----------------------------------------------------------------------玉米-FT-ACAGGTGTGTTTGTTAATGTATTACACTT--G-CCATGGGAGCCTAAATGAGACCCATAATCACTTCCACT大豆1-FT-AAAAA--------------------------------------------------------------------大豆2-FT-AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-------------------------------------------------小麦-FT-AAAACTCCAACGAGCAGATTACAGTAACGGCCACTGGTGGTGTGAAAATCCTGAAATCTGCTTCAGTC1480 1490 1500 1510 1520 1530 1540....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12----------------------------------------------------------------------At-FT-A----------------------------------------------------------------------PPI-大豆-FTA----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-A----------------------------------------------------------------------番茄-FTAGGAAGGCAGGTAGCATGTGTATAATTCACTGTTACTTCCCATGTCGAGTTAGATGCTTGAAAATTTTAGT水稻-FT-A----------------------------------------------------------------------玉米-FT-AAGAGTCGGAAGACCGT-GTCGAGCAGTTCACTCATATGGTCACTTAAAGGAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-大豆1-FT-A----------------------------------------------------------------------大豆2-FT-A----------------------------------------------------------------------小麦-FT-AACTTTGCCTTGTTTACAGTTGAGTCTGTTGTTGTGATCTGTACCTAATGCATGTACAATCATCAAATT1550 1560 1570 1580 1590 1600 1610....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12---------------------------------------------------------------------At-FT-A---------------------------------------------------------------------PPI-大豆-FTA---------------------------------------------------------------------碗豆-FT-A---------------------------------------------------------------------番茄-FTAAGGTGTTCTTTTATGAAGCACATTAATGTGGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA水稻-FT-A---------------------------------------------------------------------玉米-FT-A---------------------------------------------------------------------大豆1-FT-A---------------------------------------------------------------------大豆2-FT-A---------------------------------------------------------------------小麦-FT-AATTAGTTTTTGTACCAATGAGTATTCGATGAAAAAAAAAAAAAAAA-----------------------BnA-12-At-FT-A -PPI-大豆-FTA -豌豆-FT-A -番茄-FTA A水稻-FT-A -玉米-FT-A -大豆1-FT-A-大豆2-FT-A-小麦-FT-A -表10B.FTα亚基的ClustalW氨基酸分析1)BNA-12;FT2(SEQ ID NO13)2)At-FT-A;FTI(SEQ ID NO11)3)PPI-大豆-FTA;FT4(SEQ ID NO39)4)豌豆-FT-A(SEQ ID NO72)5)番茄-FTA(SEQ ID NO73)6)水稻-FT-A(SEQ ID NO74)7)玉米-FT-A(SEQ ID NO75)8)大豆1-FT-A(SEQ ID NO76)9)大豆2-FT-A(SEQ ID NO77)10)小麦-FT-A(SEQ ID NO78) 表10C FTβ亚基的ClustalW核酸分析1)PPI-BnFTb;FT3(SEQ ID NO14)2)era1(SEQ ID NO1)3)Wiggum(SEQ ID NO80)4)PPI-大豆-FTB;FT5(SEQ ID NO40)5)DuP-大豆-FTB(SEQ ID NO81)6)PI-玉米-FTB;FT6(SEQ ID NO43)7)DuP-玉米-FTB(SEQ ID NO82)8)豌豆-FT-B(SEQ ID NO83)9)番茄(SEQ ID NO84)10)烟草(SEQ ID NO85)10203040506070....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 ----------------------------------------------------------------------Wiggum ATGCCAGTAGTAACCCGCTTGATTCGTTTGAAGTGTGTAGGGCTCAGACCGGAGTGGACTCAATCPPI-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------DuP-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------PI-玉米-FTB----------------------------------------------------------------------DuP-玉米-FTB ----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-B ----------------------------------------------------------------------番茄 ----------------------------------------------------GTAAACGAGCGTTGATTT烟草 ----------------------------------------------------------------------- 1550 1560 1570 1580 1590 1600 1610....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-RnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 AGTTTCCGTAGTGTTGTAACTTGTAAGATTTCAAAAG---------------------------------Wiggum AGTTTTCGTAGTGTTGTAACTTGTAAGAtTTGAAAAGAAGTTTCACTAATTTAACCTTAAAACCTGTTACPPI-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------DuP-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------PI-玉米-FTB----------------------------------------------------------------------DuP-玉米-FTB ----------------------------------------------------------------------豌豆FT-B AATGTAAAATGTAAACTAAAATATGAAATATGAAATACCAAAAAGATATTATTGGATGAAATTCACGTGG番茄 AAACTTAGTTGCAATCCAGAAGTTAAAAGTGTCATTGGGTTCAAAAGAGTTGTGATCGTTTATGTACATA烟草 ---TCTAGTTG---TTCAGAATCAGAGACTAATCTATTATTTTGAGGGATTGGATTCAAAAAAAAAAAAA1620 1630 1640 1650 1660 1670 1680....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 ----------------------------------------------------------------------Wiggum TTTTTTATTACGTATATACCATTTATCATATCTTTGGTTTACGACTTAAAGAATTTGATGATTGTTGAAAPPI-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------DuP-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------PI-玉米-FTB----------------------------------------------------------------------DuP-玉米-FTB ----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-B ATCTAATACAACTGCGTGGTTTTCATTCCTGATTTGATTTTGATTTACATGAGTTAAAACGTTAAACCCT番茄 TCCTTGCATTTGTATACGTGATACAAGTTGAGAGAATAACGGGTACTTTCTGAACTTGCTGAACTAGCAC烟草 AAAAAAAA--------------------------------------------------------------1690 1700 1710 1720 1730 1740 1750....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 ----------------------------------------------------------------------Wiggum ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------DuP-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------PI-玉米-FTB----------------------------------------------------------------------DuP-玉米-FTB ----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-B TCTTATTCATACATTTGTTAAGAGCTTAAGGCTTAATGGTTAAGCCAATGATATAAATATTTATGCAGAA番茄 GTAAATTCGTCTCTGGTTTAGTGAGGTCTGTAAACATCAATGTGAAATTGCGAGATATGCATGTAATAGT烟草 ----------------------------------------------------------------------1760 1770 1780 1790 1800 1810 1820....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 ----------------------------------------------------------------------Wiggum ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------DuP-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------PI-玉米-FTB----------------------------------------------------------------------DuP-玉米-FTB ----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-B AGCTGTtGCTTATCACCAACGGTAATATTAAGCAAACAAGTATTCTGTGAT-------------------番茄 GGCTAAGATTTACAAATCTGGATACCGGTTATTAGTGATCAGAAATTTCATTCAATTTCCCAAACGGTCA烟草 ----------------------------------------------------------------------1830 1840 1850 1860 1870 1880 1890....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 ----------------------------------------------------------------------Wiggum ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------DuP-大豆-FTB ----------------------------------------------------------------------PI-玉米-FTB----------------------------------------------------------------------DuP-玉米-FTB ----------------------------------------------------------------------豌豆-FT-B ----------------------------------------------------------------------番茄 CCTAAGTTTAGGATATTGCTTAAAATATTATTTATTTTTCATTTAAGAATCAAAAAAAAAAAAAAAAAAA烟草 ----------------------------------------------------------------------....|....PPI-BnFTb ---------era1 ---------Wiggum ---------PPI-大豆-FTB ---------DuP-大豆-FTB ---------PI-玉米-FTB---------DuP-玉米-FTB ---------碗豆-FT-B ---------番茄 AAAAAAAAA烟草 ---------表10D.FTβ亚基的ClustalW氨基酸分析1)PPI-BnFTB;FT3(SEQ ID NO15)2)era1(SEQ ID NO2)3)Wigggum(SEQ ID NO87)4)PPI-大豆-FTB;FT5(SEQ ID NO42)5)DuP-大豆-FTB(SEQ ID NO88)6)PPI-玉米-FTB;FT6(SEQ ID NO45)7)DuP-玉米-FTB(SEQ ID NO89)8)豌豆-FT-B(SEQ ID NO90)9)番茄(SEQ ID NO91)10)烟草(SEQ ID NO92)10203040506070....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ----------------------------------------------------------------------era1 ----------------------------------------------------------------------Wiggum MPVVTRLIRLKCVGLRLDRSGLNRRICHGGHGESTRRRVMEELSSLTVSQREQFLVENDVFGIYNYFDASPPI-大豆FTB-------------------------------------------------------------------ATIDuP-大豆-FTB -------------------------------------------------------------------ATIPI-玉米-FTB--------------------------------------ADPDLPRLTVTQVEQMKVEARVGDIYRSLFGADuP-玉米-FTB --------------------------------------ADPDLPRLTVTQVEQMKVEARVGDIYRSLFGA豌豆-FT-B -------------------------------------------------------------------MEA番茄 ----------------------------------------MESRKVTKTLEDQWVVERRVREIYDYFYSI烟草 -------------------------------------------GTSGTRLEDQWMVERQVREIYNFFYSI 本发明还包括SEQ ID NO93的法尼基转移酶α共有序列和SEQ ID NO94的法尼基转移酶β共有序列。要产生这些共有序列,用BioEdit程序对本发明的法尼基转移酶α和法尼基转移酶β序列进行排列。本发明的法尼基转移酶α(FTA)多肽序列之间的同源性用ClustalW图解分析,如表10E所示。本发明的法尼基转移酶β(FTA)多肽序列之间的同源性用ClustalW图解分析,如表10F所示。表10E FTα的ClustalW氨基酸分析 BnA-12 --(SEQ ID NO13)At-FT-AAI(SEQ ID NO8)PPI-大豆-FTA --(SEQ ID NO39)共有序列 --(SEQ ID NO93)表10F FTβ的ClustalW氨基酸分析 本发明还包括SEQ ID NO95的法尼基转移酶α共有序列和SEQ ID NO96的法尼基转移酶β共有序列。要产生这些共有序列,用BioEdit程序对本发明的法尼基转移酶a和法尼基转移酶b序列进行排列。本发明的法尼基转移酶α(FTA)核酸序列之间的同源性用ClustalW图解分析,如表10G所示。本发明的法尼基转移酶β(FTA)核酸序列之间的同源性用ClustalW图解分析,如表10H所示。表10G FTα的ClustalW核酸分析 1090 1100 1110 1120 1130 1140....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BnA-12------------------------------------------------------------ 822At-FT-AAACTGCTTATTTATGAATCACATGTTCATGTTAACATGTATCAAAACAATCTTGATTTCT 1112PPI-大豆-FTA------------------------------------------------------------ 1041共有序列------------------------------------------------------------ 9001150 1160 1170....|....|....|....|....|....|.BnA-12 ------------------------------- 822(SEQ ID NO12)At-FT-A CAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA 1143(SEQ ID NO7)PPI-大豆-FTA------------------------------- 1041(SEQ ID NO37)共有序列------------------------------- 900(SEQ ID NO95)表10H FTβ的ClustalW核酸分析102030405060....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb------------------------------------------------------------ 1era1------------------------------------------------------------ 1PPI-大豆-FTB------------------------------------------------------------ 1PPI-玉米-FTBGGCGGATCCCGACCTACCGAGGCTCACGGTGACGCAGGTGGAGCAGATGAAGGTGGAGGC 60共有序列------------------------------------------------------------ 1708090 100 110120....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb ------------------------------------------------------------ 1era1 ------------------------------------------------------------ 1PPI-大豆-FTB ----------------------------GCCACCATTCCTCGCAACGCCCAAACCCTCAT 32PPI-玉米-FTB CAGGGTTGGCGACATCTACCGCTCCCTCTTCGGGGCCGCGCCCAACACGAAATCCATCAT 120共有序列 ---------------------------- 1 1330 1340 1350 1360 1370 1380....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnFTb CTAGATTT--------------------------------------------------- 1110era1 TCGAGTTCTTCTTTAAAGCAGCATGACCCGTTGTTGCTAATGTATGGGAAACCCCAAACA 1249PPI-大豆-FIB ------------------------------------------------------------ 1135PPI-玉米-FIB ------------------------------------------------------------ 1245共有序列 ------------------------------------------------------------ 7971390 1400 1410 1420....|....|....|....|....|....|....|....|.PPI-BnFTb ----------------------------------------- 1110(SEQ ID NO14)era1 TAAGAGTTTCCGTAGTGTTGTAACTTGTAAGATTTCAAAAG 1290(SEQ ID NO1)PPI-大豆-FTB PPI-Soy-FTB----------------------------------------- 1135(SEQ ID NO40)PPI-玉米-FTB PPI-corn-FTB ----------------------------------------- 1245(SEQ ID NO43)共有序列 consensus ----------------------------------------- 797(SEQ ID NO97)实施例13用于转化的载体构建体FTA或FTB序列可用于产生适于转化到植物中并且在适当的调控序列控制下的构建体。基因序列或者是有义方向的,用于过表达,或者是反义方向的用于负调控。这些序列的部分用于构建双链RNA抑制(dsRNAi)构建体。将优选不少于21个核苷酸的序列克隆成为由连接子分隔开的反向重复序列,当表达的时候,将导致靶基因的负调控。创建双链反义(DA)载体,其中反义序列的直接重复序列被间隔子序列例如GUS分隔开。启动子可用于组成型表达,例如35S CaMV启动子,MuA玉米启动子,或者由特定的环境或细胞信号例如ABA水平或能诱导RD29A启动子表达的干旱条件诱导的诱导型启动子。另外,还可以使用组织或细胞器官特异的启动子例如HIC或CUT1启动子。可将这种构建体转化到拟南芥,芸苔,玉米,大豆中。也可以按照所期望的转化其它种属。每个被转化的种属都可以利用适合于那些特定种属的特定的调控序列。选择转化的植物并分析它们的表型特征。评价该转基因植物的特性例如增加的对于干旱的耐受性,改变的生物质积累,产量,营养需求例如矿物质或微量营养素,生物胁迫例如真菌,细菌,或其它这种病原体感染或攻击或任何其它物理或生物化学特性。实施例14植物转化用在农杆菌培养物中浸渍花的方法制备拟南芥转基因植物。野生型植物在标准条件下培养直到它们开始开花。在农杆菌培养物的溶液中将植物转化2分钟。然后将植物包裹两天以维持湿度,然后揭去覆盖物使其继续进行生长和种子发育。收获成熟的种子。转化的T1植物通过在含有50g/ml卡那霉素的MS平板上发芽和生长进行选择。生长2周后鉴别绿色的,卡那霉素抗性的幼苗并移植到土壤中。将植物包裹起来以确保其进行自花传粉,分别收获每个植物的T2种子。在T1植物生长过程中收获叶片样品,提取DNA并进行Southern分析。对T2种子进行KanR分离分析。从那些显示出3∶1的抗性表型的种系中培育存活的T2植物,在种子萌发的时候将其包裹,收获每个种系的T3种子。再用T3种子进行KanR分离分析,选择那些显示出100%KanR表型的种系为纯合种系。用T3种子进行进一步分析。用农杆菌介导的子叶叶柄组织转化制备转基因甘蓝型油菜植物。种子按如下程序灭菌。用95%乙醇使种子浸湿一小段时间例如15秒。加入大约30ml的灭菌溶液I(70%Javex,100lTween20)并放置大约15分钟。除去溶液I,替换为30ml的溶液II(0.25%mecuric chloride,100 l Tween20),并保温大约10分钟。将种子用至少500ml双蒸无菌水浸泡并在无菌培养皿中储存。种子在加入1%蔗糖和0.7%琼脂的,pH5.8的1/2 MS培养基平板上发芽。收获完全张开的子叶,置于介质I(Murashige最小限度有机物(MMO),3%蔗糖,4.5mg/L苄基腺嘌呤(BA),0.7%phytoagar,pH5.8)中。含有感兴趣的核酸构建体的农杆菌培养物在AB基本培养基中生长2天。浸渍子叶外植体使得只有叶柄的切割部分接触农杆菌溶液。然后将外植体埋入介质I中,在24℃保持5天,16、8小时昼夜循环。将外植体转移到介质II(介质I,300mg/L特美汀)上保持7天,然后转移至介质III(介质II,20mg/L卡那霉素)上。将此时发出的任何根或芽组织切下来。14到21天后将外植体转移到介质III的新鲜平板上。当再生的芽组织发育的时候,将再生组织转移到介质IV(MMO,3%蔗糖,1.0%phytoagar,300mg/L特美汀,20mg/L 20mg/L卡那霉素)上。一旦长出健康的枝条组织,将从任何愈伤组织伤切下的枝条组织浸入到10X IBA中,并转移到介质V(Murashige和Skooge(MS),3%蔗糖,0.2mg/L吲哚丁酸(IBA),0.7%琼脂,300mg/L特美汀,20mg/L 20mg/L卡那霉素)上以生根。将健康的幼苗转移到土壤中。转基因大豆,玉米和棉花可以用本领域技术人员公知的基于农杆菌的方法产生。另外,还可以用粒子或非粒子生物弹轰击转化方法。非粒子生物弹轰击转化的实例在美国专利申请20010026941中有介绍。培育可存活的植物产生纯合种系。如文献所述检测植物中是否存在干旱耐受性,及其生理和生物化学表型。下表描述了构建体和转化的种属。表11SEQ ID NO SEQ 转化的种属SEQ ID NO10 pBI121-35S-anti-AtFTA 拟南芥SEQ ID NO46 pBI121-35S-AtFTA 拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO47 pBI121-rd29A-anti-AtFTA拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO48 pBI121-35S-DA-AtFTA拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO49 pBI121-RD29A-DA-AtFTA 拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO50 MuA-anti-GmFTA 大豆SEQ ID NO51 RD29A-anti-GmFTA大豆SEQ ID NO52 MuA-HP-GmFTA-Nos-Term 大豆SEQ ID NO53 RD29AP-HP-GmFTA-Nos-Term大豆SEQ ID NO54 pBI121-35S-Anti-AtFTB 拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO55 pBI121-RD29AP-Anti-AtFTB 拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO56 pBI121-35S-HP-AtFTB拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO57 pBI121-RD29AP-HP-AtFTB 拟南芥 甘蓝型油菜SEQ ID NO58 pBI121-35S-AtFTB 拟南芥SEQ ID NO59 MuA-anti-GmFTB-Nos-Term 大豆SEQ ID NO60 RD29AP-anti-GmFTB-Nos-Term 大豆SEQ ID NO61 MuA-HP-GmFTB-Nos-Term 大豆SEQ ID NO62 RD29AP-HP-GmFTB-Nos-Term大豆SEQ ID NO63 MuA-anti-玉米FTB-Nos-Term玉米SEQ ID NO64 MuA-HP-玉米FTB-Nos-Term 玉米适用于植物转化的载体构建体的非限制性实例如SEQ IDNO10,46-64所示。SEQ ID NO10gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatctctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatcctcaaattgctgccactgtaatcttgctcttcctccatgcccaatagttagctcttataggatctacacgaccaagaatagtacacaccaaattggccaagttagtctctggttcttcattagctagagctctcactgagtctttatgctcgttggttggtctcagtccatcacatagaagatccaaaagggtgctcagagcgaatccatggaagcaatctgtgcgggatagaacattcaaacagactgaggaaacacttggatcactaatccaggattctttgtcgtctttgtaaagcgcttttaggtatcgccatgagctctcgtttgcaggattggttaaaatggctttgattgtgtagcttacttcagattctctcatggcttctaggcctcccaacaaaggagattgggtgatgacataatacctctgattccaggcggaattgttaaagacgtcagcttcaaggagctcgtgacagtaatcgagctcatcttcccatcctcctaatgcccgtagtgtccactgcctatgtgaccaagcatgataatgtttggcatcaagtgaaagtactctacgggtaaattcaagttctctccctgcaacatcaggacccagtttctctgcaacccatcgccgatgatgccacagttggtagttcttagagttatcctcagcaatgcgttcgatgaactcgagttcttcaaacaagtcgtgattaagggcctcgagtactaggcgcctgaaatgccacactgtgtagttgccggagtttaagaggagggtttcttccgtgagtcgtagtgcgcgaggagatcgctcgtcggaaaagtaaatcgcacggaagtaatccatagtctcgcggaactcttccttgtaggcaattggcaccactggattcggaccatcgtcctgagtcaatgggaccacgtctgaccactccaatcgttggctcagtggcacggtctcgtcgaaattcatcccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgcttgctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggtgaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaagcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaSEQ ID NO10是用于转化拟南芥植物的PBI121-反义-FTA载体构建体的核酸序列。斜体序列是左边界和右边界重复序列(1-24,5226-5230)。下划线序列是35S启动子(2515-3318)。粗体序列是反义法尼基转移酶α序列(3334-4317)。SEQ ID NO46gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccatgaatttcgacgagaccgtgccactgagccaacgattggagtggtcagacgtggtcccattgactcaggacgatggtccgaatccagtggtgccaattgcctacaaggaagagttccgcgagactatggattacttccgtgcgatttacttttccgacgagcgatctcctcgcgcactacgactcacggaagaaaccctcctcttaaactccggcaactacacagtgtggcatttcaggcgcctagtactcgaggcccttaatcacgacttgtttgaagaactcgagttcatcgaacgcattgctgaggataactctaagaactaccaactgtggcatcatcggcgatgggttgcagagaaactgggtcctgatgttgcagggagagaacttgaatttacccgtagagtactttcacttgatgccaaacattatcatgcttggtcacataggcagtggacactacgggcattaggaggatgggaagatgagctcgattactgtcacgagctccttgaagctgacgtctttaacaattccgcctggaatcagaggtattatgtcatcacccaatctcctttgttgggaggcctagaagccatgagagaatctgaagtaagctacacaatcaaagccattttaaccaatcctgcaaacgagagctcatggcgatacctaaaagctctttacaaagacgacaaagaatcctggattagtgatccaagtgtttcctcagtctgtttgaatgttctatcccgcacagattgcttccatggattcgctctgagcacccttttggatcttctatgtgatggactgagaccaaccaacgagcataaagactcagtgagagctctagctaatgaagaaccagagactaacttggccaatttggtgtgtactattcttggtcgtgtagatcctgtaagagctaactattgggcatggaggaagagcaagattacagtggcagcaatttgactcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatct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ID 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ID NO48gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatcctcGCTCTTCCTCCATGCCCAATAGTTAGCTCTTACAGGATCTACACGACCAAGAATAGTACACACCAAATTGGCCAAGTTAGTCTCTGGTTCTTCATTAGCTAGAGCTCTCACTGAGTCTTTATGCTCGTTGGTTGGTCTCAGTCCATCACATAGAAGATCCAAAAGGGTGCTCAGAGCGAATCCATGGAAGCAATCTGTGCGGGATAGAACATTCAAACAGACTGAGGAAACACTTGGATCACTAATCCAGGATTCTTTGTCGTCTTTGTAAAGAGCTTTTAGGTATCGCCATGAGCTCTCGTTTGCAGGATTGGTTAAAATGGCTTTGATTGTGTAGCTTACTTCAGATTCTCTCATGGCTTCTAGGCCTCCCAACAAAGGAGATTGGGTGATGACATAATACCTCTGATTCCAGGCGGAATTGTTAAAGACGTCAGCTTCAAGGAGCTCGTGACAGTAATCGAGCTCATCTTCCCATCCTCCTAATGCCCGgaggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAACAATGAATCAACAACTCTCCTGGCGCACCATCGTCGGCTACAGCCTCGGGAATTGCTACCGAGCTCGCTCTTCCTCCATGCCCAATAGTTAGCTCTTACAGGATCTACACGACCAAGAATAGTACACACCAAATTGGCCAAGTTAGTCTCTGGTTCTTCATTAGCTAGAGCTCTCACTGAGTCTTTATGCTCGTTGGTTGGT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ID NO49gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatcctcGCTCTTCCTCCATGCCCAATAGTTAGCTCTTACAGGATCTACACGACCAAGAATAGTACACACCAAATTGGCCAAGTTAGTCTCTGGTTCTTCATTAGCTAGAGCTCTCACTGAGTCTTTATGCTCGTTGGTTGGTCTCAGTCCATCACATAGAAGATCCAAAAGGGTGCTCAGAGCGAATCCATGGAAGCAATCTGTGCGGGATAGAACATTCAAACAGACTGAGGAAACACTTGGATCACTAATCCAGGATTCTTTGTCGTCTTTGTAAAGAGCTTTTAGGTATCGCCATGAGCTCTCGTTTGCAGGATTGGTTAAAATGGCTTTGATTGTGTAGCTTACTTCAGATTCTCTCATGGCTTCTAGGCCTCCCAACAAAGGAGATTGGGTGATGACATAATACCTCTGATTCCAGGCGGAATTGTTAAAGACGTCAGCTTCAAGGAGCTCGTGACAGTAATCGAGCTCATCTTCCCATCCTCCTAATGCCCGgaggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAACAATGAATCAACAACTCTCCTGGCGCACCATCGTCGGCTACAGCCTCGGGAATTGCTACCGAGCTCGCTCTTCCTCCA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ID 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ID NO51GGAGCCATAGATGCAATTCAATCAAACTGAAATTTCTGCAAGAATCTCAAACACGGAGATCTCAAAGTTTGAAAGAAAATTTATTTCTTCGACTCAAAACAAACTTACGAAATTTAGGTAGAACTTATATACATTATATTGTAATTTTTTGTAACAAAATGTTTTTATTATTATTATAGAATTTTACTGGTTAAATTAAAAATGAATAGAAAAGGTGAATTAAGAGGAGAGAGGAGGTAAACATTTTCTTCTATTTTTTCATATTTTCAGGATAAATTATTGTAAAAGTTTACAAGATTTCCATTTGACTAGTGTAAATGAGGAATATTCTCTAGTAAGATCATTATTTCATCTACTTCTTTTATCTTCTACCAGTAGAGGAATAAACAATATTTAGCTCCTTTGTAAATACAAATTAATTTTCCTTCTTGACATCATTCAATTTTAATTTTACGTATAAAATAAAAGATCATACCTATTAGAACGATTAAGGAGAAATACAATTCGAATGAGAAGGATGTGCCGTTTGTTATAATAAACAGCCACACGACGTAAACGTAAAATGACCACATGATGGGCCAATAGACATGGACCGACTACTAATAATAGTAAGTTACATTTTAGGATGGAATAAATATCATACCGACATCAGTTTTGAAAGAAAAGGGAAAAAAAGAAAAAATAAATAAAAGATATACTACCGACATGAGTTCCAAAAAGCAAAAAAAAAGATCAAGCCGACACAGACACGCGTAGAGAGCAAAATGACTTTGACGTCACACCACGAAAACAGACGCTTCATACGTGTCCCTTTATCTCTCTCAGTCTCTCTATAAACTTAGTGAGACCCTCCTCTGTTTTACTCACAAATATGCAAACTAGAAAACAATCATCAGGAATAAAGGGTTTGATTACTTCTATTGGAAAGAGGAAGTCTGCTCTTGCGCCAAATCCAATAGTTGGTTCTAATTGGATCAACTTGTTTTAGGATAGAACAAATATTTCGTGCTATATTTAAATTTTGTTGTTCCCCTTTCTCATCATCATCTAAATCTTGTTTATCCATATCTGCGGTCTTTAAGGCGTCAATGGCATCTCTAATGTCTTCATTTGGTTGATAACCAAAGCATATAAGATCTAAAATAGTGCTAAGAGCAAACACGTAGTTGCTCTTAGTTCTCAAAATCTTTAAGCATACTGAAGAAACTTGAGGATCATTTACCCATGAAGTAGTTTCACCTTTATAAAGTCCTCGTAGATATCTCCACGAGCTTTCATTTTCAGGGTAGGCTATAATGGCTTCGATGGTGTAAAGCACTTCAGACTCTCTCATAGCTTTTAGGCCCCCCAAGAAAGGAGACCTTGTTATGACAAAATATCTCTGATTCCAAGCAGAATTGTTAAAAATGTCTTCTTTAAGTAGTTCTGTGCAATAATTAAGTTCATCTTCCCATCCTCCTAGTGTTTGAAGAGCCCACTGTCTATGAGACCATGCATGATAATGTTTGGCATCAACGGACAGTATCTTTTTGGTGAACTCGAGCTgagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattc(下划线RD29A启动子;粗体大豆anti-大豆FTA;小写字母NOS终止子序列)SEQ ID NO52GAATTCAAATTTTTCGCCAGTTCTAAATATCCGGAAACCTCTTGGGATGCCATTGCCCATCTATCTGTAATTTATTGACGAAATAGACGAAAAGGAAGGTGGCTCCTATAAAGCACATCATTGCGATAACAGAAAGGCCATTGTTGAAGATACCTCTGCTGACATTGGTCCCCAAGTGGAAGCACCACCCCATGAGGAGCACCGTGGAGTAAGAAGACGTTCGAGCCACGTCGAAAAAGCAAGTGTGTTGATGTAGTATCTCCATTGACGTAAGGGATGACGCACAATCCAACTATCCATCGCAAGACCATTGCTCTATATAAGAAAGTTAATATCATTTCGAGTGGCCACGCTGAGCTCAGGAAGTCTGCTCTTGCGCCAAATCCAATAGTTGGTTCTAATTGGATCAACTTGTTTTAGGATAGAACAAATATTTCGTGCTATATTTAAATTTTGTTGTTCCCCTTTCTCATCATCATCTAAATCTTGTTTATCCATATCTGCGGTCTTTAAGGCGTCAATGGCATCTCTAATGTCTTCATTTGGTTGATAACCAAAGCATATAAGATCTAAAATAGTGCTAAGAGCAAACACGTAGTTGCTCTTAGTTCTCAAAATCTTTAAGCATACTGAAGAAACTTGAGGATCATTTACCCATGAAGTAGTTTCACCTTTATAAAGTCCTCGTAGATATCTCCACGAGCTTTCATTTTCAGGGTAGGCTATAATGGCTTCGATGGTGTAAAGCACTTCAGACTCTCTCATAGCTTTTAGGCCCCCCAAGAAAGGAGACCTTGTTATGACAAAATATCTCTGATTCCAAGCAGAATTGTTAAAAATGTCTTCTTTAAGTAGTTCTGTGCAATAATTAAGTTCATCTTCCCATCCTCCTAGTGTTTGAAGAGCCCACTGTCTATGAGACCATGCATGATAATGTTTGGCATCAACGGACAGTATCTTTTTGGTGAACTCGAGCTTAAAGGTGAAACTACTTCATGGGTAAATGATCCTCAAGTTTCTTCAGTATGCTTAAAGATTTTGAGAACTAAGAGCAACTACGTGTTTGCTCTTAGCACTATTTTAGATCTTATATGCTTTGGTTATCAACCAAATGAAGACATTAGAGATGCCATTGACGCCTTAAAGACCGCAGATATGGATAAACAAGATTTAGATGATGATGAGAAAGGGGAACAACAAAATTTAAATATAGCACGAAATATTTGTTCTATCCTAAAACAAGTTGATCCAATTAGAACCAACTATTGGATTTGGCGCAAGAGCAGACTTCCTgagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattc(下划线大豆FTA反义片段;粗体MuA启动子;斜体大豆FTA有义片段;小写字母NOS终止子序列)SEQ ID 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ID 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ID 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ID 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ID 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实施例16Southern分析抗FTA的转基因拟南芥的基因组Southern分析。数字表示种系的编号。将5μg的T1植物的基因组DNA用HindIII(T-DNA质粒中的唯一位点)消化并用0.8%的琼脂糖凝胶进行分离。用NPTII编码区域作为探针进行放射性标记。图11显示了Southern分析的典型结果,表示存在转基因。实施例17反义FTA种系的Northern blot从五种35S-anti-FTA拟南芥种系(T3植物)的发育中的叶片组织中分离RNA。杂交首先用P32标记的FTA单链有义转录物作为探针(图3的A)检测翻译转录物,然后将该条带重新用单链反义FTA转录物做探针(图12的B)检测有义转录物。图3的C显示了杂交后的溴化乙锭染色的凝胶。在每条道中加入大约5μg的总RNA。图3显示了转基因反义转录物的积聚以及转基因植物中有义转录物的减少。实施例18用抗FT-抗体进行的反义FTA种系的Western blot用根据实施例27的方法产生的抗体进行western blot,分析转基因植物的蛋白质提取物。图13的第1道是标准分子量,第2道是纯化的FTA蛋白,第3-10道是ERA1突变株,野生型和转基因拟南芥的4个种系的蛋白质提取物。图13显示了转基因种系中可检测的FTA蛋白的减少。实施例19转基因幼苗的ABA敏感性将野生型Columbia的种子,era1-2,和35S-反义-FTA的两个反义的,干旱耐受的种系的T3纯合体种子接种于不加ABA(A),加入0.3μM(B),0.5μM(C)或1.0μM(D)的ABA的基本培养基(1/2MS)中。培养皿在4℃在黑暗中冷藏3天,并在24小时连续光照的条件下在22℃培养11天。era1和转基因种系比野生型植物更能抑制发芽。结果如图14所示。在不含(A)或含有(B)1M ABA的基本培养基中培养的野生型Columbia,era1-2和两个干旱耐受型的35S-反义-FTA种系(9.9 amp;21.2)的十二天龄的幼苗表型。图15显示出era1和转基因种系相对于野生型植物根部的生长和发育减少。35S-反义-FTA种系在对ABA的反应中显示出减少的根部生长,与era1突变体类似。用带有35S-反义-FTA构建体的转基因甘蓝型油菜系评价ABA敏感性。在大约10μm观察到的效果显示出在子叶和第一个叶片阶段中幼苗发育和活力的减少,因此表明对ABA敏感性的增加。用上述方法在所有构建的转基因植物中评价ABA敏感性,检测具有减少的还是增加的FTA或FTB表达或活性。所用的ABA浓度随检查的种属而不同。实施例20干旱实验为了评价植物在水胁迫或干旱条件下的反应,将植物暴露于各种条件下。例如,将植物从土壤或介质中移出,在纸巾上放置一段时间,例如4个小时,然后返回到培养皿中继续生长和发育。评价其存活和活力。另外,还可以以更近似于田间环境的方式,不供水一段时间,例如达6小时,从而施加水胁迫。在重复的水胁迫实验中,将植物以每个四英寸盆中五株植物的方式生长。所有的盆中都装满等量的均匀的预混的潮湿土壤。生长条件是16个小时的光照(150-200μmo1/m2/s),22℃,和70%的相对湿度。在第一朵花开的当天将每个盆中的土壤水分按重量均匀分布然后停止供水,开始干旱处理。在水胁迫处理结束的时候,或者收集植物的生物质数据,或者再次供水使之完成生命周期并确定生物质和产量数据。在胁迫和最佳条件下评价生理参数,例如枝条和根的生物质积累,土壤水含量,单独的水分丧失或作为某些参数如生物质,种子产量,和叶片数目和叶片面积的函数的水分丧失。图16显示了野生型Columbia(A)和四种35S-反义-FTA转基因拟南芥种系(B,C,D,E)在8天的水分胁迫处理后的图。可以看到对照植物受到胁迫并且不健康。这项实验是用含有由SEQ ID NO10,46-64描述的载体的转基因种系进行的。在构建的所有转基因植物中评价干旱或水分胁迫的耐受性,用所述方法检测其具有减少的还是增加的FTA或FTB表达或活性。实施例21在干旱胁迫期间拟南芥pRD29A-DA-FTA种系的水分丧失的分析将植物以每4英寸盆5颗植物以及每个种系6个盆生长。当植物生长到第一次开花的阶段,用实施例20中所述方法实施干旱处理。每天将盆称重,在7天干旱处理结束的时候收获所有植物确定枝条的鲜重和干重。图10显示了在水分胁迫处理的第4天每枝条干重的水分丧失。在此实验中,在所检测的31个种系中,25个与Columbia野生型相比显示出了更低的水分丧失,其中22个是统计学显著的。所有种系都如实施例14所述评价ABA敏感性,ABA敏感性(ABAS)的增加还与干旱胁迫期间水分丧失的降低有关。确定为具有野生型ABA敏感性(ABAWT)的那些种系是相同的6个种系(种系2,36,69,29,24,21),它们与野生型相比没有显示出水分丧失的减少。用两个ABAS种系,一个ABAWT种系和一个Columbia对照重复上述实验。在水分胁迫处理的2,4和6天以后收获植物,确定枝条的干重。ABAS转基因植物与ABAWT或Columbia对照相比具有更大的叶片和枝条生物质,更大的土壤水含量和更低的每枝条干重的水分丧失。所有三个收获阶段的结果都是一致的。本实施例中显示的数据是用带有pRD29A-DA-FTA构建体的转基因植物获得的。还用携带着此构建体的变体,例如35S-DA-FTA,pRD29A-反义-FTA或35S-反义-FTA的种系进行了该实验,观察到类似的水分胁迫耐受趋势。对所有构建的转基因植物评价土壤的水分丧失,用所述方法检测其具有减少的还是增加的FTA或FTB表达或活性。实施例22在干旱胁迫期间对拟南芥pRD29A-DA-FTA种系进行枝条鲜重分析将植物以每4英寸盆5株植物以及每个种系8个盆生长。当植物生长到第一次开花的阶段,用实施例20中所述方法实施干旱处理。在干旱处理6天后对植物重新施水,使其另外恢复6天。收获植物并测定枝条的鲜重。图20显示了枝条的鲜重。该实验包括25个转基因种系,其中两个是ABAWT(种系2和69)和一个Columbia野生型对照。所有23个ABAS转基因种系都具有统计学显著的更大的枝条鲜重,平均大44%。本实施例中显示的数据是用带有pRD29A-DA-FTA构建体的转基因植物获得的。还用携带着此构建体的变体,例如35S-DA-FTA,pRD29A-反义-FTA或35S-反义-FTA的种系进行了该实验,观察到类似的趋势。实施例23在干旱胁迫期间和最佳条件下拟南芥pRD29A-DA-FTA种系的种子产量分析将植物以每4英寸盆1株植物生长。当植物生长到第一次开花的阶段,用实施例20中所述方法实施干旱处理。在干旱处理6天后对植物重新施水,使其生长成熟。最佳组不进行干旱处理。产量分析表明虽然干旱处理导致产量降低,但转基因植物并不像对照那样严重,保持着生产量上的优势(图21),如前面实验22中所述。ABAS转基因植物的产量与对照植物相比显示出15%的产量上的增加,这是在最佳条件下获得的结果,在干旱条件下是增加20%。在干旱处理组中,9个转基因种系中的8个比对照显示出更大的产量。将干旱处理下获得的每个种系的产量表达为其在最佳条件下产量的百分比,表明了9个ABAS种系中的8个胜过对照种系,而9个中的4个胜过ABAWT对照。本实施例中显示的数据是用带有pRD29A-DA-FTA构建体的转基因植物获得的。还用携带着此构建体的变体,例如35S-DA-FTA,pRD29A-反义-FTA或35S-反义-FTA的种系进行了该实验,观察到类似的趋势。实施例24在最佳生长条件下拟南芥pRD29A-DA-FTA种系的营养性生长分析将植物以每3英寸盆1株植物以及每个种系8个盆的方式生长。在三个阶段收获植物并测定鲜重。营养阶段定义为14天龄的幼苗,抽苔阶段定义为出现第一朵花(19-21天的幼苗)以及自第一次开花起6天的中花期。在上述的每一个阶段,分别是所检测的10个ABAS转基因种系中的7,8和10个比对照植物显示出统计学上更大的枝条鲜重(图22)。一个Columbia种系和ABAWT(种系2)种系用作对照组。另外,这些转基因种系还具有统计学显著的增加的莲座型叶。本实施例中显示的数据是用带有pRD29A-DA-FTA构建体的转基因植物获得的。还用携带着此构建体的变体,例如35S-DA-FTA,pRD29A-反义-FTA或35S-反义-FTA的种系进行了该实验,观察到类似的趋势。实施例25在干旱处理下和生物胁迫下拟南芥pRD29A-DA-FTA种系的分析将植物以每4英寸盆1株植物以及8个盆生长。当植物生长到第一次开花的阶段,用实施例20中所述方法实施干旱处理。在干旱处理7天后对植物重新施水,使其生长成熟。评估一个Columbian对照种系(col)和一个转基因种系。种子产量的分析表明低于成长产量,大约是所期望的最佳产量的12%。可以通过将土壤在使用前灭菌以消除所用的土壤中含有的导致产量降低的作为生物胁迫的真菌污染。这种生物胁迫在转基因种系中比对照更轻微,对照的产量是转基因种系的22%。在植物的干旱处理组中,生物胁迫减少,但是转基因植物胜过对照几乎4.5倍(图23)。本实施例中显示的数据是用带有pRD29A-DA-FTA构建体的转基因植物获得的。还用携带着此构建体的变体,例如35S-DA-FTA,pRD29A-反义-FTA或35S-反义-FTA的种系进行了该实验,观察到类似的趋势。实施例26拟南芥RD29A-DA-FTA种系气孔数目的分析分析了两个转基因种系和一个野生型Columbia对照的叶片的上表面和下表面的气孔数量。在第五个叶片的上表面和下表面上用指甲油覆盖,植物处于开花早期。没有观察到气孔密度上的差异。本实施例中显示的数据是用带有pRD29A-DA-FTA构建体的转基因植物获得的。还用携带着此构建体的变体,例如35S-DA-FTA,pRD29A-反义-FTA或35S-反义-FTA的种系进行了该实验,观察到类似的趋势。实施例27FT-A和FT-B的多克隆抗体的产生将分离的拟南芥FT序列克隆到由PetllD衍生的大肠杆菌表达载体中。为了产生组氨酸标记的FT-B构建体,将拟南芥FT-B克隆和pET载体用BamHI消化并连接在一起。进行限制性消化以验证插入物的方向。为了产生FT-A构建体,拟南芥FT-A克隆和pET载体用BamHI和EcoRI消化,然后连接在一起。将得到的质粒用于表达在AtFTA和AtFTB的N末端含有6个连续组氨酸残基的融合蛋白。该融合蛋白在细菌宿主BL21(DE3)中表达并用Hi-Trap螯合物色谱根据制造商(Pharmacia)的说明书进行纯化。将含有His-FT融合蛋白的细菌粗提物的可溶性级分加载在Hi-Trap柱(1.5cm×2.0cm)上,用200ml的含有0.0到0.3M咪唑线性梯度的层析缓冲液(25mM Tris-HCI,pH7.5,1mMDTT)洗脱蛋白质。收集含有纯化的His-FT蛋白的级分,脱盐,并用Centriprep-30浓缩器(Amicon)浓缩。所有纯化步骤都在4℃进行。为了产生抗体,将纯化的融合蛋白进一步用SDS/PAGE分离,切割下相应于融合蛋白的考马斯亮兰染色条带。用电洗脱从凝胶切片上洗脱下蛋白质,然后在Ribi佐剂(RibiImmunochem)中乳化,使终体积为1ml。在第1天将His-AtFTA或His-AtFTB(250μg)注射到3kg的新西兰兔中,在第21天和第35天用200g该蛋白进行加强注射。最后一次注射后一周得到高滴度的抗血清。这些抗体用于实施例18,图13中的western分析。实施例28相关基因的筛选本发明的转基因植物可以用于鉴别能与本发明的基因相互作用的基因。可以利用本发明的转基因植物筛选相关基因,例如可以通过基因筛选方法鉴别基因表达或活性的抑制剂,增强剂或调节剂。例如,可以用本发明的转基因植物作为基因背景产生突变株文库。可以使用各种方法,这些都是本领域技术人员公知的。例如,可以使用化学突变试剂例如EMS在基因组中诱导点突变,对种子进行快速种子照射可以得到缺失突变,可以产生通过插入作用使基因失活的T-DNA文库,或者可以用激活标记方法产生具有上调基因的文库。这些类型文库的分析可以鉴别能补偿或调节在本发明的转基因植物中观察到的表型的基因。实施例29CaaX异戊二烯蛋白酶的RT-PCR扩增和克隆用Qiagen Rneasy试剂盒从拟南芥,甘蓝型油菜和大豆的叶片组织中分离总RNA,并用作模板,用RT-PCR扩增CPP基因。反应条件如下1X反应缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.8,1.5mMMgC12,50mM KCl),dNTP 200μM,1pM AtCPP BamFW和AtCPPSmaRV引物,2.5U.Pfu DNA聚合酶,和模板加水至终体积为100μL。反应条件为1分钟94℃,1分钟60℃,1分钟72℃,30个循环。用于PCR扩增拟南芥和芸苔序列的引物是SEQ ID NO101和SEQ ID NO102。用于PCR扩增大豆序列的引物是SEQID NO149和SEQ ID NO150。用Qiagen PCR column spin试剂盒从RT-PCR反应混和物中分离出PCR产物并连接到预备的克隆载体,pBluescript KS+上。载体的制备是通过用EcoRV消化,在存在dTTP的条件下用Taq聚合酶处理,产生适合于与PCR产物连接的3’悬末端。将连接产物转化到大肠杆菌DH5α细胞中,选择阳性克隆,对得到的插入物测序。上述方法还可用于获得同源序列,还可以使用其它引物。表13AtCPP BamFW5’-AAAGGATCCATGGCGATTCCTTTCATGG-3’(SEQ ID NO101)AtCPP SmaRV5’-AAACCCGGGTTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCA-3’(SEQ ID NO102)GmCPP SmaFW5’-AAACCCGGGATGGCGTTTCCCTACATGGAAGCC-3’(SEQ ID NO149)GmCPP SacRV5’-AAAGAGCTCTTAGTCTTCCTTCTTATCCGGTTCG-3’(SEQ ID NO150)实施例30载体的构建如下所述构建pBI121-AtCPP构建体(SEQ ID NO99)。pBI121载体用BamHI和SmaI消化。将RT-PCR得到的AtCPP,1.4kb的DNA片段(SEQ ID NO97)用BamHI和SmaI消化,并连接到pBI121载体中。然后用SmaI和EcolCRI消化除去GUS序列,从GUS插入物中纯化载体之后将连接载体,得到pBI121-AtCPP载体(图25A)。该构建体用于进一步产生表达芸苔和大豆的CPP基因的构建体。要产生pBI121-BnCPP构建体(SEQ ID NO142),将SEQ ID NO101和SEQ ID NO102的引物对用于PCR扩增合适的片段,以连接到制备好的亲本载体中。要产生pBI121-GmCPP构建体(SEQ ID NO136),将SEQ IDNO149和SEQ ID NO150的引物对用于PCR扩增合适的片段,以连接到制备好的亲本载体中。pBI121-反义-AtCPP构建体(SEQ ID NO130)的构建。用SEQ ID NO97作为模板,用SEQ ID NO106和SEQ ID NO107作为引物进行PCR扩增产生反义片段,列于表14中。将该片段用BamHI和SmaI消化并用于替代pBI121-AtCPP构建体(SEQ IDNO99)中的有义片段,产生SEQ ID NO130(图25B)。该构建体,SEQ ID NO130用于进一步产生表达反义的芸苔和大豆CPP基因的构建体。要产生pBI121-反义-BnCPP构建体(SEQ IDNO144),用SEQ ID NO151和SEQ ID NO152的引物对PCR扩增合适的片段,以连接到制备好的亲本载体中。要产生pBI121-反义-GmCPP构建体(SEQ ID NO138),用SEQ ID NO153和SEQ ID NO154的引物对PCR扩增合适的片段,以连接到制备好的亲本载体中。pBI121-HP-AtCPP构建体(SEQ ID NO100)的构建。克隆策略包括截短pBI121的GUS基因,在GUS序列的侧面,在GUS上游以反义方向,在UGS下游以有义方向连接AtCPP片段。pBI121载体用SmaI和SacI消化,将GUS序列和载体片段彼此分离纯化。分离的GUS片段用EcoRV消化,分离1079bp的粘性末端的EcoRV/SacI片段。然后将此片段重新连接到消化的亲本载体的SmaI/SacI位点上。该中间载体用于随后产生发夹载体。用PCR分离用作基因特异性的发夹序列的AtCPP片段。SEQ IDNO103和SEQ ID NO104的引物,列于表14中,用于产生596bp的片段。用SacI消化PCR AtCPP片段并连接到GUS的3’末端的SacI位点上,得到有义方向片段的克隆。要在GUS上游插入相同片段,打开BamHI位点,用Klenow填平末端。用EcoICRI,一种SacI的同裂酶但产生的是平末端,消化PCR扩增的AtCPP片段,并连接到载体的BamHI位点的平末端上产生最终的构建体(图25C)。用于产生上述的SEQ ID NO100的中间构建体仅含有截短的GUS基因并且不含有CPP序列。该中间载体用于进一步产生表达芸苔和大豆的发夹CPP基因构建体的构建体。为了产生pBI121-HP-BnCPP构建体(SEQ ID NO143),将SEQ ID NO153和SEQ ID NO154的引物对用于PCR扩增有义片段,SEQ ID NO155和SEQ ID NO156的引物对用于PCR扩增反义片段。这些片段被克隆到上述制备好的中间载体中。为了产生pBI121-HP-GmCPP构建体(SEQ ID NO137),将SEQ IDNO157和SEQ ID NO158的引物对用于PCR扩增有义片段,SEQ ID NO159和SEQ ID NO160的引物对用于PCR扩增反义片段。这些片段被克隆到上述制备好的中间载体中。上述载体构建体可进行修饰以将这些基因置于其它启动子的控制之下,例如,但不限于RD29A或MuA。这可以通过切割35S启动子序列并将其用合适的启动子序列取代获得。用这种方法可产生SEQ ID NO134和135,可构建SEQ ID NO133,136-148。表14AtCPP-HP-SacFW 5’-CTGGAGCTCTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCC-3’(SEQ ID NO103)AtCPP-HP-SacRV 5’-ATTGAGCTCCCAATGTCCAAGCTCGTGTGCAATA-3’(SEQ ID NO104)AtCPP-anti-SmaFW 5’-AAACCCGGGATGGCGATTCCTTTCATGG-3’(SEQ ID NO106)AtCPP-anti-BamRV 5’-AAAGGATCCTTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCA-3’(SEQ ID NO107)BnCPP-anti-SmaFW 5’-AAACCCGGGATGGCGATTCCTTTCATGG-3’(SEQ ID NO151)BnCPP-anti-BamRV 5’-AAAGGATCCTTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCC-3’(SEQ ID NO152)BnCPP-HP-Sac-FW 5’-AAAGAGCTCTTCTACCAATGGTGGGACTCG-3’(SEQ ID NO153)BnCPP-HP-Sac-RV 5’-AAAGAGCTCCCAGTGTCCCAGCTCGTGTG-3’(SEQ ID NO154)BnCPP-HP-BamFW 5’-AAAGGATCCTTCTACCAATGGTGGGACTCG-3’(SEQ ID NO155)BnCPP-HP-XbaRV 5’-AAATCTAGACCAGTGTCCCAGCTCGTGTG-3’(SEQ ID NO156)GmCPP-HP-Sac-FW 5’-GATGAGCTCACAAGATCAAGTCACAGCAATGCCT-3’(SEQ ID NO157)GmCPP-HP-Sac-RV 5’-AAAGAGCTCCCGGTTCGTCCAGCGCGGCC-3’(SEQ ID NO158)GmCPP-HP-BamFW 5’-GATGGATCCACAAGATCAAGTCACAGCAATGCCT-3’(SEQ ID NO159)GmCPP-HP-XbaRV 5’-CCTTCTAGACCGGTTCGTCCAGCGCGGCC-3’(SEQ ID NO160)实施例31序列分析拟南芥CPP(AtCPP)公开的1275个核苷酸的核酸(SEQ ID NO97),也称为AtCPP,如表15所示。 CPP多肽(SEQ ID NO98)由SEQ ID NO97编码,具有424个氨基酸残基,如表15B所示,用单字母氨基酸编码表示。 本发明还包括与SEQ ID NO97的拟南芥CaaX异戊二烯蛋白酶互补的核酸序列。公开的互补序列如SEQ ID NO115所示。SEQ ID NO115TTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCATCAGTGGCTCGAAGCCTTTCAACAAGAGGAGGATGTGAGTAGTGATAAGCTGAGTACAATGGATCAGTGTTCATTGTTGATAAGTTCTCTTCCTGTAGTTTCACTAGAGCAGGACGAAGATCTTTTGCATAGTCAAGCTTCACAGCAAAAGCATCAGCCTGAAACTCAAACGCTCGACTAACGAGGTTCAGGCCAAAGCTTACTAGATGTTGCAGTGGTATTACAGTGTGCTGAAATATGATCAAACCAATGAGAACAGGCTGTGTATCAAATCCGAAACTCCTGAAGAGATCAGTGGAGTTTCTGAGAAGAGTGTATCCTCCAAATTGTAAGAAGGCAAGGATTTGAACTGCAATGAACGAGTATGTAGTGTGATTCAGTTTCCAATGTCCAAGCTCGTGTGCAATAACCGCCACAATTTCATCCTCATTCTTGCACTGCTGAATCAACGTATCATAAAGAACAATCCTTTTGTTCTTAAAGAAACCATACATGTAAGCATTGCTATGGCTTGACCTTGTAGATCCATCGACAACAAACAGCTTCTTCAAAGGAAACTTTAGGGAAGAAGCAAGTTTCTCAATCTTCTCCCGGAGGTCTCCATCTGGAAGAGGAGTGAATTTGTTGAAGAGCGGTGCTATCAAGACCGGGTATATAGTCATCATCACTAGAGACAGGATAAACATGAATGCCCACAGATAGATGGCAAGATAAGGACCTCCTTTCTGGACTATGAAAATTATCGCAGCAACAATGGGTGGGCCTAGTATGACAGAGAGGAATGTTCCTTTGATCATGTCCCTAATGAACATCCATATTGTTTGTTTGTTGAACCCATGCCGAGACTCGATCACGAAAGTTGAGTACAAAGAAAATGGCAAATCAGTGATCTGTGACCATGTCATAACACCAGCCAAGAATGAAAGAGTATGCAGTATTTCATTCTCCGGATCAAGGCCCAACCTCGGTAAAACAGCTCCAGACATCTTCCAAAACCAAGGCAAGATCCCAAAGAACAAAATTGCAGAGTCCATAAGTATAGTTACAAACTCATGAACAAAGTGAAAATAGCTTTTGTCAAGACTGTATGCTCGTGATTTCTCAAACTTCTCTTGGCTAATTACACCAACCAAGGTTTTCGGGAGAGTTGGAAGCTTGAGAGCAGTGAGTTGCCTCAGATCCAAATACGTCTCAAAAATGTACATCACTATCATAAAACCCACGACGGTTTCCATGAAAGGAATCGCCAT由克隆策略的性质决定了所述的序列不是全长,而是缺少了5’和3’端非翻译区域。拟南芥核苷酸序列和其编码氨基酸序列和其它CPP序列之间的相同性百分数用ClustalW分析确定,如图26所示。用本发明公开的序列作为杂交探针,可以从cDNA和基因组文库中筛选和分离全长序列或者用cDNA末端的快速扩增(RACE)技术或其它这种PCR技术。甘蓝型油菜CPP(BnCPP)公开的1275个核苷酸的核酸(SEQ ID NO109),也称为BnCPP,如表16所示。 CPP多肽(SEQ ID NO110)由SEQ ID NO109编码,具有424个氨基酸残基,如表16B所示,用单字母氨基酸编码表示。 本发明还包括与SEQ ID NO109的甘蓝型油菜CaaX异戊二烯蛋白酶互补的核酸序列。公开的互补序列如SEQ ID NO111所示。SEQ ID NO111TTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCATCAATGGCTCGAAGCCTCTCTACAAGAGGAGGGTGTGAGTAGTGATAAGCTGAGTACAATGGGTCTGTGTTCATCGCTGATAAGTTCTCTTCCTGTAGCTTCACTAGGGCAGGACGTAGATCCTTTGCATAACCAAGATTCACTGCAAAAGCATCAGCCTGAAACTCAAACGCTCGACTAACAAGGTTGAGGTCAAAGCTTACTAGGTGTTGAAGTGGTATTACAGTGTGCTGAAATATGATCAAACCAATGAGAACTGGTTGTGTATCAAAACCAAAACTCCTGAAGAGATCAGTGGAGTTTCTGACAAGAGTGTATCCTCCAAATTGCAAGAAGGCAAGGATTTGAACAGCAATGAACGAGTATGTAGTGTGATTCAGCTTCCAGTGTCCCAGCTCGTGTGCAATAACCGCCACAATTTCATTCTCATTCTGGCACTGCTGAATCAATGTGTCATAAAGAACAATCCTTTTGTTCTTGAAGAAACCATACATGTAAGCATTACTATGGCTTGACCTTGTAGATCCATCGACAACAAACAGCTTCTTCAGAGGAAACTTTAGAGAAGAAGCAAGTTTCTCAATCTTCTCCCGGAGGTCTCCATCAGGAAGAGGAGTGAACTTGTTGAAAAGAGGTGCAATCAAAACAGGGTATATAGTCATCATCACTAGAGACAGGATAAACATGAATGCCCACAGATAGATGGCGAGGTAAGGACCTCCTTTCTGAACTATAACAATAATTGCGGCAACGATAGGAGGGGCAGGTATGACAGAGAGGAGTATTCCTTTGATCATGTCCCTAATGAACATCCATATTGTTTGTTTGTTGAACCCATGCCGAGACTCGATCACGAAAGTTGAGTACAAAGAAAATGGCAAATCAGTGATCTGTGACCATGTCATAAGACCAGCCAAGAATGAAAGAGTGTGCAGGATTTCATTCTCTGGATCGAGTCCCACCATTGGTAGAAAGCCGCCAGATATCTTCCAAAACCAAGGCAAGATCCCAAAGAACAGAATCGCAGAGTCCATAATATAGTAACAlthCTCATGAACAAAGTGAAAATGGCTTTTGTCAAGACTGTAAGCTCGAGATTTCTCAAACTTCTCTTGGCTAATGACTCCAACCAAAGTCTTTGGGAGAGTGGGAAGCTTGAGAGCAGTATGTTGCCTCAGATCCAAATACGTCTCAAAAACGTACATCACTATCATAAAACCAACGACGGTTTCCATGAAAGGAATCGCCAT由克隆策略的性质决定了所述的序列不是全长,而是缺少了5’和3’端非翻译区域。甘蓝型油菜核苷酸序列和其编码氨基酸序列和其它CPP序列之间的相同性百分数用ClustalW分析确定,如图26所示。用本发明公开的序列作为杂交探针,可以从cDNA和基因组文库中筛选和分离全长序列或者用cDNA末端的快速扩增(RACE)技术或其它这种PCR技术。大豆CPP(GmCPP)公开的1275个核苷酸的核酸(SEQ ID NO112),也称为GmCPP,如表17所示。 CPP多肽(SEQ ID NO113)由SEQ ID NO112编码,具有424个氨基酸残基,如表17B所示,用单字母氨基酸编码表示。 本发明还包括与SEQ ID NO112的大豆CaaX异戊二烯蛋白酶互补的核酸序列。公开的互补序列如SEQ ID NO114所示。SEQ ID NO114TTAGTCTTCCTTCTTATCCGGTTCGTCCAGCGCGGCCAATCTTTCAACAAGGGGAGGATGAGAATAGTGATAAGCAGAGTACCAAGGATCTGTATTCATAGCTGACAGATTCTCCTCCTGTAGTTTCACAAGACCACCGCGTAATCCAGATGCATATCCAAGCTTCTTGGCAAAGCCATCAGCCTGAAATTCAAATGATCGGCTGACTAGGTTCAGACCAAAGCTGACCAATTGCTGAAGTGGGATTACAGTATGCTGAAATATGATGAGCCCAATGAGGACTGGCTGCGTATCAAACCCAAAGCTTCGATACAGATCAGCTGAATTTCGCACTAGTGTATATCCTCCAAATTGTAGAAGTGTAAGAATCTGCATAGCAACAAATGTGTACACAGTATGGTTGAGCTTCCAGTGTCCCAACTCATGGGCAATAACAGCAACAATTTCCTCATCGTCTTTGCACTGTTGAATTAATGTGTCATAAGGGACAATCCTCTTGTTCTTGAAGAATCCATACATATAGGCATTGCTGTGACTTGATCTTGTGGATCCATCGACAACAAATAGTTTCTTTAACGGATAGTTGAGGGAGGAAGCAAGTTTCTCGATTTTCTCCCTGAGTTGACCATCTGGAAGTGGAGTGAACTTATTGAAGAGTGGAGCTATTAGTACTGGATAAAGGGTCATCATCACAATAGAAAGACCAAACGTAAAAACCCAAAGATAGATGGCCAAGTATGGACCTCCTTTCTGTACTATTACAATGATTGCAGCCACAATAGGTGGACCAATTATTACAGAAAGGAAAATTCCTTTAAGCATGTCCCTAAAGAATAACCATGGTGTTTGCTTATTAAAACCATGACGGGCCTCAATCACAAAAGTTGAGTACAGAGAAAAGGGCAAATCTGTTATCTGTGACCAAATCATCAGCCCTGCTAAGAAGGCAAGGGTATGCAGTATTTCATTCTCAGCATTGAAACCAGCTATTGTCATAAAATCTCCTGATTTCTTCCAAAACCAGGGCAATACCCCAAAGTACAAAATTGTAGAGTCTGTCACTATTGTCACAAACTCGTGAACAAAATGGAAGTGGCTTTTATCAAGACTATAGGCTCTAGATTTCTCAAATTTCTCTTGGCTGATAACACCCTCTAAAGTCTTTGGAAGAGTAGGAAGTTTGAGGGCCCTATGTTGTCGCACATCCAAGTAAGTTTCAAAAATGTACATTAATATCATAAATCCGACAACGGCTTCCATGTAGGGAAACGCCAT由克隆策略的性质决定了所述的序列不是全长,而是缺少了5’和3’端非翻译区域。大豆核苷酸序列和其编码氨基酸序列和其它CPP序列之间的相同性百分数用ClustalW分析确定,如图26所示。用本发明公开的序列作为杂交探针,可以从cDNA和基因组文库中筛选和分离全长序列或者用cDNA末端的快速扩增(RACE)技术或其它这种PCR技术。上述公开的CPP核酸和氨基酸与其它公开的CPP序列(GenBank ID NOAL161491(AT4g01320),AF007269和AF353722;WO 02/16625 A2)具有同源性。这些序列之间的同源性用ClustalW排列分析显示于表18A-18B中。表18A.CaaX异戊二烯蛋白酶的ClustalW核酸分析1PPI-AtCPP SEQ ID NO972PPI-BnCPPSEQ ID NO1093PPI-GmCPPSEQ ID NO1124BASF AT1 SEQ ID NO1165BAS_T2 SEQ ID NO1186BASF-Com SEQ ID NO1207BASF-Gm SEQ ID NO1228AFC1 SEQ ID NO1249AT4g01320SEQ ID NO12610AF007269SEQ ID NO128CLUSTAL W(1.81)多序列排列PPI-GMCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 ATGGCGATTCCTTTCATGGAAACCGTCGTGGGTAAGCTTCAAAACCTTTTTCTGAGACATPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 TTTACTATCCTGTTTCACTCATCGTATTTCGTTTTTGTTTGGGTTTTGCTTTCTGTGTTGPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASFAT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 TGTGTGTTGAGATTCCATGACTCGTTTGTTTCATATACCATCGTCTCTGCTTCTCGTTTCPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 TAAATTTTGTTCTTTTCTAATAGTGCGTACCTTGATCTGAGGTTTTATTACTCCTACTAGPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 TTTCTTGTCTTACTCGTGcGTTTGATTTGATTTGAGCTTATGTGATTTCATCATCTCTTCPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 CTCGGTTTTAGAATGTACGGAGCTTCTCTGTTAACCAAAATCTAGGATTTGGGAAGAAAAPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm ------------------------------------------------------------AT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 GTCGGAGTCTTTTTTTTCCTCATTCCCGATTGGAAATTGAGAATCTTGAAATTTTTCTTTPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm --------------------------------------CTAATACGACTCACTATAGGGCAT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 GTTCAAGTCATACAGCTTGAGGTTTTGGGTTTTCTTGTCAGGGTATTATTATGTTCGTGAPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm AAGCAGTGGTAACAACGCAGAGTACGCGGGGGGAGACGCATGGTTCTGAACTAATTGTTAAT4g01320------------------------------------------------------------AF007269 CTGCAACTAGAGTTTTCTGGAGTTTTTTGAAATGGGTTTTGTGTTGTGGAACCGTATGTGPPI-AtCPP------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP------------------------------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------------------BASF-Gm TAAATAATACCTAAAATTTTGAGTTGTCCTAAACATTGGGGTTTAAACAAATCCAATCTCAT4g01320 ------------------------------------------------------------AF007269AATGTTGCATCAAAACTCTTTCAGTGCTCCAATGTTTCCATCAGTAGTCAGCACAAGAGAPPI-AtCPP ------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1------------------------------------------------------------PPI-BnCPP ------------------------------------------------------------BASF-玉米 ------------------------------------------------------------PPI-GmCPP ------------------------------------------------------------BASF-Gm TCAATATAAAACCCAATGATCTCACC--CTCACTCCGTTTCTGATTTCTCACTCTTCGTTAT4g01320 ------------------------------------------------------------AF007269TCTTTTTATATCTGGTTGATCAAAAAAGTAGATGATGTTATTGAATTTTCAGTGATGGAGPPI-AtCPP ------------------------------------------------------------BASF_AT2 ------------------------------------------------------------afc1 ------------------------------------------------------------BASF_AT1 ------------------------------------------------------------PPI-BnCPP ------------------------------------------------------------BASF-玉米 ------------------------------------------------------------PPI-GmCPP ---------------------------------ATGGCGTTTCCC--TACATGGAAGCCGBASF-Gm TCTCGTTCGGTTCATCAGCGTGTGTCTCAGC-CATGGCGTTTCCC--TACATGGAAGCCGAT4g01320 ---------------------------------ATGGCGATTCCT--TTCATGGAAACCGAF007269TATCTGTTGTTGTGGCATTTAGAGTAGATTCGTATTTCATCTTCTGTTTTATTCTTTTTCPPI-AtCPP ---------------------------------ATGGCGATTCCT--TTCATGGAAACCGBASF_AT2---------------------------------ATGGCGATTCCT--TTCATGGAAACCGafc1 ---------------------------------ATGGCGATTCCT--TTCATGGAAACCGBASF_AT1---------------------------------ATGGCGATTCCT--TTCATGGAAACCGPPI-BnCPP ---------------------------------ATGGCGATTCCT--TTCATGGAAACCGBASF-玉米 ------------------------------------------------------------PPI-GmCPP TTGTCGGATTTATGATATTAATGTACATTTTTGAAACTTACTTGGATGTGCGACAACATABASF-Gm TTGTCGGATTTATGATATTAATGTACATTTTTGAAACTTACTTGGATGTGCGACAACATAAT4g01320 TCGTGGGTTTTATGATAGTGATGTACATTTTTGAGACGTATTTGGATCTGAGGCAACTCAAF007269TTACAGGTTTTATGATAGTGATGTACATTTTTGAGACGTATTTGGATCTGAGGCAACTCAPPI-AtCPP TCGTGGGTTTTATGATAGTGATGTACATTTTTGAGACGTATTTGGATCTGAGGCAACTCABASF_AT2TCGTGGGTTTTATGATAGTGATGTACATTTTTGAGACGTATTTGGATCTGAGGCAACTCAafc1TCGTGGGTTTTATGATAGTGATGTACATTTTTGAGACGTATITGGATCTGAGGCAACTCABASF_AT1TCGTGGGTTTTATGATAGTGATGTACATTTTTGAGACGTATTTGGATCTGAGGCAACTCAPPI-BnCPP TCGTTGGTTTTATGATAGTGATGTACGTTTTTGAGACGTATTTGGATCTGAGGCAACATABASF-玉米 ------------------------------------------------------------PPI-GmCPP GGGCCCTCAAACTTCCTACTCTTCCAAAGACTTTAGAGGGTGTTATCAGCCAAGAGAAATBASF-Gm GGGCCCTCAAACTTCCTACTCTTCCAAAGACTTTAGAAGGTGTTATCAGCCAAGAGAAATAT4g01320 CTGCTCTCAAGCTTCCAACTCTCCCGAAAACCTTGGTTGGTGTAATTAGCCAAGAGAAGTAF007269CTGCTCTCAAGCTTCCAACTCTCCCGAAAACCTTGGTTGGTGTAATTAGCCAAGAGAAGTPPI-AtCPP CTGCTCTCAAGCTTCCAACTCTCCCGAAAACCTTGGTTGGTGTAATTAGCCAAGAGAAGTBASF_AT2CTGCTCTCAAGCTTCCAACTCTCCCGAAAACCTTGGTTGGTGTAATTAGCCAAGAGAAGTafc1CTGCTCTCAAGCTTCCAACTCTCCCGAAAACCTTGGTTGGTGTAATTAGCCAAGAGAAGTBASF_AT1CTGCTCTCAAGCTTCCAACTCTCCCGAAAACCTTGGTTGGTGTAATTAGCCAAGAGAAGTPPI-BnCPP CTGCTCTCAAGCTTCCCACTCTCCCAAAGACTTTGGTTGGAGTCATTAGCCAAGAGAAGTBASF-玉米 ------------------------------------------------------------PPI-GmCPP TTGAGAAATCTAGAGCCTATAG--------------------------------------BASF-Gm TTGAGAAATCTAGAGCCTATAG--------------------------------------AT4g01320 TTGAGAAATCACGAGCATACAG--------------------------------------AF007269TTGAGAAATCACGAGCATACAGTCTTGACAAAAGGTTTCGTCTTGATCATATTTATATCAPPI-AtCPP TTGAGAAATCACGAGCATACAG--------------------------------------BASF_AT2TTGAGAAATCACGAGCATACAG--------------------------------------afc1TTGAGAAATCACGAGCATACAG--------------------------------------BASF_AT1TTGAGAAATCACGAGCATACAG--------------------------------------PPI-BnCPP TTGAGAAATCTCGAGCTTACAG--------------------------------------BASF-玉米 ------------------------------------------------------------PPI-GmCPP ------------------------------------------TCTTGATAAA---AGCCABASF-Gm -------------------------------------------TCTTGATAAA--AGCCAAT4g01320------------------------GGATATCATCACTGAGAACTTTAATATATGCAGCTAAF007269 TTTTAGTTTTTTATAATTGCCAGGGGATATCATCACTGAGAACTTTAATATATGCAGCTAPPI-AtCPP------------------------------------------TCTTGACAAA---AGCTABASF_AT2 ------------------------------------------TCTTGACAAA---AGCTAafc1 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TTTTCACTTTGTTCATGAGTTTGTAACTATACTTATGGACTCTGCAATTTTGTTCTTTGGPPI-BnCPPTTTTCACTTTGTTCATGAGTTTGTTACTATACTTATGGACTCTGCGATTCTGTTCTTTGGBASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPPGGTATTGCCCTGGTTTTGGAAG--------------------------------------BASF-Gm GGTATTGCCCTGGTTTTGGAAG--------------------------------------AT4g01320GATCTTGCCTTGGTTTTGGAAG--------------------------------------AF007269 GATCTTGCCTTGGTTTTGGAAGGTACATATCTGGTTTCGGTATACAGTATCTCATTTTGAPPI-AtCPPGATCTTGCCTTGGTTTTGGAAG--------------------------------------BASF_AT2 GATCTTGCCTTGGTTTTGGAAG--------------------------------------afc1 GATCTTGCCTTGGTTTTGGAAG--------------------------------------BASF_AT1 GATCTTGCCTTGGTTTTGGAAG--------------------------------------PPI-BnCPPGATCTTGCCTTGGTTTTGGAAG--------------------------------------BASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPP------------------------------------------------AAATCAGGAGATBASF-Gm ------------------------------------------------AAATCAGGAGATAT4g01320------------------------------------------------ATGTCTGGAGCTAF007269 ATATAGAGTTGTTACATTACAATTGTAAAGTTTTCATTTTTACCTTAGATGTCTGGAGCTPPI-AtCPP------------------------------------------------ATGTCTGGAGCTBASF_AT2 ------------------------------------------------ATGTCTGGAGCAafc1 ------------------------------------------------ATGTCTGGAGCTBASF_AT1 ------------------------------------------------ATGTCTGGAGCTPPI-BnCPP------------------------------------------------ATATCTGGCGGCBASF-玉米------------------------------------------------------------PPI-GmCPPTTTATGACAATAGCTGGTTTCAATGCTGAGAATGAAATACTGCATACCCTTGCCTTCTTABASF-Gm TTTATGACAATAGCTGGTTTCAATGCTGAGAATGAAATACTGCATACCCTTGCCTTCTTAAT4g01320GTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCCAGAGAATGAAATACTGCATACTCTTTCATTCTTGAF007269 GTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCCAGAGAATGAAATACTGCATACTCTTTCATTCTTGPPI-AtCPPGTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCCGGAGAATGAAATACTGCATACTCTTTCATTCTTGBASF_AT2 GTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCCAGAGAATGAAATACTGCATACTCTTTCATTCTTGafc1 GTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCCAGAGAATGAAATACTGCATACTCTTTCATTCTTGBASF_AT1 GTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCCAGAGAATGAAATACTGCATACTCTTTCATTCTTGPPI-BnCPPTTTCTACCAATGGTGGGACTCGATCCAGAGAATGAAATCCTGCACACTCTTTCATTCTTGBASF-玉米------------ACGAGGCTGAGTGCTGAGAATGAGATAATACACACCCTTGCTTTCTTA* * * * ******** ** * ** ** *** * *****PPI-GmCPPGCAGGGCTGATGATTTGGTCACAG------------------------------------BASF-Gm GCAGGGCTGATGATTTGGTCACAG------------------------------------AT4g01320GCTGGTGTTATGACATGGTCACAG------------------------------------AF007269 GCTGGTGTTATGACATGGTCACAGGTGTTCCAAATAAACCCCTTCATATAGTCCTATACGPPI-AtCPPGCTGGTGTTATGACATGGTCACAG------------------------------------BASF_AT2 GCTGGTGTTATGACATGGTCACAG------------------------------------afc1 GCTGGTGTTATGACATGGTCACAG------------------------------------BASF_AT1 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ATAACAGATTTGCCCTTTTCTCTGTACTCAACTTTTGTGATTGAGGCCCGTCATGGTTTTAT4g01320 ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCAF007269 ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCPPI-AtCPP ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCBASF_AT2 ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCafc1 ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCBASF_AT1 ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCPPI-BnCPP ATCACTGATTTGCCATTTTCTTTGTACTCAACTTTCGTGATCGAGTCTCGGCATGGGTTCBASF-玉米 ATTACAGACTTGCCGTTCTCTCTCTATTCAACTTTTGTTATAGAGGCTCGACATGGTTTT** ** ** ***** ** *** * ** ******** ** ** *** * ** ***** **PPI-GmCPP AATAAG------------------------------------------------------BASF-Gm AATAAG------------------------------------------------------AT4g01320 AACAAA------------------------------------------------------AF007269 AACAAAGTATGTCGTATTTCCAACACTACCTTGTGACTTACGTTTTTTTATCAGAGATGTPPI-AtCPP AACAAA------------------------------------------------------BASF_AT2 AACAAA------------------------------------------------------afc1 AACAAA------------------------------------------------------BASF_AT1 AACAAA------------------------------------------------------PPI-BnCPP AACAAA------------------------------------------------------BASF-玉米 AACAAG------------------------------------------------------** **PPI-GmCPP --------------------------------CAAACACCATGGTTATTCTTTAGGGACABASF-Gm --------------------------------CAAACACCATGGTTATTCTTTAGGGACAAT4g01320 --------------------------------CAAACAATATGGATGTTCATTAGGGACAAF007269 GGATTAAATTTGCTTCTAAATTCTGTTGACAGCAAACAATATGGATGTTCATTAGGGACAPPI-AtCPP --------------------------------CAAACAATATGGATGTTCATTAGGGACABASF_AT2 --------------------------------CAAACAATATGGATGTTCATTAGGGACAafc1 --------------------------------CAAACAATATGGATGTTCATTAGGGACABASF_AT1 --------------------------------CAAACAATATGGATGTTCATTAGGGACAPPI-BnCPP 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TAATAGTACAG-------------------------------------------------AT4g01320 TCATAGTCCAG-------------------------------------------------AF007269 TCATAGTCCAGGTTTGATGATTCTGGATTCATCTTATTTCTGAGTTTTTCACATGGATGAPPI-AtCPP TCATAGTCCAG-------------------------------------------------BASF_AT2 TCATAGTCCAG-------------------------------------------------afc1 TCATAGTCCAG-------------------------------------------------BASF_AT1 TCATAGTCCAG-------------------------------------------------PPI-BnCPP TTATAGTTCAG-------------------------------------------------BASF-玉米 ACATAGTACAG-------------------------------------------------***** ***PPI-GmCPP ------------------------------------------------------------BASF-Gm------------------------------------------------------------AT4g01320 ------------------------------------------------------------AF007269 CTATTCTCCATTGAGTGTGAGCTTCAAAGTTTTTAGTTTTCGTGTTAAAAATTTAAAATTPPI-AtCPP ------------------------------------------------------------BASF_AT2 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** *PPI-GmCPP TCCGTTAAAGAAACTATTTGTTGTCGATGGATCCACAAGATCAAGTCACAGCAATG----BASF-GmTCCGTTAAAGAAACTATTTGTTGTCGATGGATCCACAAGATCAAGTCACAGCAATG----AT4g01320 TCCTTTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGCAATG----AF007269 TCCTTTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGCAATGTGAGPPI-AtCPP TCCTTTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGCAATG----BASF_AT2 TCCTTTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGCAATG----afc1 TCCTTTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGCAATG----BASF_AT1 TCCTTTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGCAATG----PPI-BnCPP TCCTCTGAAGAAGCTGTTTGTTGTCGATGGATCTACAAGGTCAAGCCATAGTAATG----BAS_F-玉米 TCCTTTGAAAAAGCTTTTCGTGGTAGATGGGTCTACCAGATCAAGCCACAGTAATG----*** * ** ** ** ** ** ** ***** ** ** ** ***** ** ** ****PPI-GmCPP ------------------------------------------------------------BASF-Gm------------------------------------------------------------AT4g01320 ------------------------------------------------------------AF007269 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LNLVSRAFEFQADAFAVKLGYAKDLR-------PALV----KLQVREDNNRTQTVTSICVBASF_AT2LNLVSRAFEFQADAFAVKLGYAKDLR-------PALV----KLQE---------------AFC1LNLVSRAFEFQADAFAVKLGYAKDLR-------PALVKLQE-------------------BASF_AT1LNLVSRAFEFQADAFAVKLGYAKDLRPTLVKLQ---------------------------PPI-AtCPP LNLVSRAFEFQADAFAVKLDYAKDLRPALVKLQ---------------------------PPI-BnCPP LNLVSRAFEFQADAFAVNLGYAKDLRP---------------------------------BASF-玉米 LNLVSRAFEFQADAFAKNLGYAPQLR----------------------------------******:******.** :*.** **PPI-GmCPP ------GLVKLQEENLSAMNTDPWYSAYHYSHPPLVERLAALDEPDKKED-BASF-Gm ------GLVKLQEENLSAMNTDPCSC-------------------------AF007269-----------TEENLSAMNTDPLYSAYHYSHPPLVERLRAIDGEDKKTD-AT4g-AtCPP THLNGFFVGILQEENLSAMNTDPLYSAYHYSHPPLVERLRAIDGEDKKTD-BASF_AT2-------------ENLSAMNTDPLYSAYHYSHPPLVERLRAIDGEDKKTD-AFC1-------------ENLSAMNTDPLHSAYHYSHPPLVERLRAIDGEDKKTD-BASF_AT1------------EENLSAMNTDPLYSAYHYSHPPLVERLRAIDGEDKKTD-PPI-AtCPP ------ALVKLQEENLSAMNTDPLYSAYHYSHPPLVERLRAIDGEDKKTD-PPI-BnCPP ------------EENLSTMNTDPLYSAYHYSHPPLVERLRATDGEDKKTD-BASF-玉米 -----AALVKLQEENLSAMNTDPWYSAYHYSHPPLVERLQALEDSDDKKED*********实施例32植物转化用将开花植物浸渍在农杆菌培养物中的方法制备拟南芥转基因植物,这是根据Andrew Bent in,Clough SJ and Bent AF,1998.Floral dippinga simplified method for Agrobacterium-mediatedtransformation of Arabidopsis thaliana中的方法。野生型植物在标准条件下生长直至植物同时具有正在发育的花和已经开放的花。将植物在携带有合适的基因构建体的农杆菌培养物溶液中转化2分钟。然后将植物水平放置在盘中,覆盖两天以保持湿度,然后将植物扶正并包裹使其继续生长,使种子发育。成批收获成熟种子。通过发芽和在含有50μg/ml卡那霉素的MS平板上发芽和生长来选择转化的T1植物。生长2周后鉴别绿色的,卡那霉素抗性(KanR)的幼苗并移植到土壤中。将植物包裹以确保其自花传粉,分别收获每株植物的T2种子。在T1植物生长期间收获叶片样品,提取DNA并进行Southern blot和PCR分析。对T2种子进行KanR分离分析。从那些显示出3∶1的抗性表型的种系中选择存活的T2植物生长,在种子萌发期间进行包裹,收获每个种系的T3种子。再对T3种子进行KanR分离分析,选择那些显示出100%的KanR表型的种系作为纯合种系。用T3幼苗进行进一步的分子和生理分析。通过农杆菌介导的子叶叶柄组织的转化产生转基因甘蓝型油菜,大豆和玉米植物。将种子按如下方法灭菌。将种子用95%的乙醇浸湿一小段时间例如15秒。加入大约30ml灭菌溶液I(70% Javex,100μl Tween20),放置大约15分钟。除去溶液I,替换为30ml溶液II(0.25% mecuric chloride,100μ1 Tween20),培育大约10分钟。将种子用至少500ml双蒸无菌水浸泡并储存在无菌平皿中。种子在含有1/2 MS培养基,pH5.8,并加入了1%蔗糖和0.7%琼脂的平板上发芽。收获完全张开的子叶并放置在介质I(Murashige minimal organics(MMO),3%蔗糖,4.5mg/L苄基腺嘌呤(BA),0.7% phytoagar,pH5.8)上。将含有感兴趣的核酸构建体的农杆菌培养物在AB基本培养基中培养2天。浸泡子叶外植体使得只有叶柄的切割部分接触农杆菌溶液。然后将所述外植体浸入在介质1中,在24℃保持5天,16,8小时昼夜循环。然后将外植体转移到介质II(介质I,300mg/L特美汀)中,再保持7天,然后转移到介质III(介质II,20mg/L卡那霉素)中。切下此时发育出的任何根或枝条组织。在14-21天后将外植体转移到介质III的新鲜平板中。当再生的根组织发育的时候,将再生的组织转移到介质IV(MMO,3%蔗糖,1.0%phytoagar,300mg/L特美汀,20mg/L 20mg/L卡那霉素)中。当发育出健康的枝条组织的时候,将从任何愈伤组织上切下的枝条组织浸泡在10X IBA中并转移到介质V(Murashige and Skooge(MS),3%蔗糖,0.2mg/L吲哚丁酸(IBA),0.7%琼脂,300mg/L特美汀,20mg/L 20mg/L卡那霉素),使其生根。将健康的幼苗转移到土壤中。上述方法可以进行修改或不做修改,都适用于多种植物种系包括大豆,玉米和棉花的转化。转基因大豆,玉米和棉花可以用本领域技术人员公知的基于农杆菌的方法产生。另外还可以用粒子或非粒子的生物弹轰击转化方法。在美国专利申请20010026941中给出了一种非粒子生物弹转化的实例。这种方法可用于产生转基因大豆和玉米植物。繁殖能存活的植物产生纯合种系。检测植物是否存在干旱耐受性,以及所述的生理或生化表型。下表中鉴别了转化的构建体和种属。表19转化列表SEQ ID NO构建体转化的种属99pBII121-AtCPP拟南芥,甘蓝型油菜100 pBII121-HP-AtCPP 拟南芥131 pRD29A-AtCPP 拟南芥,甘蓝型油菜132 pRD29A-HP-AtCPP 拟南芥134 MuA-AtCPP大豆,玉米适合于植物转化的载体构建体的非限制性实例如SEQ IDNO99,5,35-53所示SEQ ID NO99gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttgcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaattcatctttcactacatttttccctactttaaagctttcatttatctcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacggagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaagttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccatggcgattcctttcatggaaaccgtegtgggttttatgatagtgatgtacatttttgagacgtatttggatctgaggcaactcactgctctcaagcttccaactctcccgaaaaccttggttggtgtaattagccaagagaagtttgagaaatcacgagcatacagtcttgacaaaagctattttcactttgttcatgagtttgtaactatacttatggactctgcaattttgttctttgggatcttgccttggttttggaagatgtctggagctgttttaccgaggttgggccttgatccggagaatgaaatactgcatactctttcattcttggctggtgttatgacatggtcacagatcactgatttgccattttctttgtactcaactttcgtgatcgagtctcggcatgggttcaacaaacaaacaatatggatgttcattagggacatgatcaaaggaacattcctctctgtcatactaggcccacccattgttgctgcgataattttcatagtccagaaaggaggtccttatcttgccatctatctgtgggcattcatgtttatcctgtctctagtgatgatgactatatacccggtcttgatagcaccgctcttcaacaaattcactcctcttccagatggagacctccgggagaagattgagaaacttgcttcttccctaaagtttcctttgaagaagctgtttgttgtcgatggatctacaaggtcaagccatagcaatgcttacatgtatggtttctttaagaacaaaaggattgttctttatgatacgttgattcagcagtgcaagaatgaggatgaaattgtggcggttattgcacacgagcttggacattggaaactgaatcacactacatactcgttcattgcagttcaaatccttgccttcttacaatttggaggatacactcttctcagaaactccactgatctcttcaggagtttcggatttgatacacagcctgttctcattggtttgatcatatttcagcacactgtaataccactgcaacatctagtaagctttggcctgaacctcgttagtcgagcgtttgagtttcaggctgatgcttttgctgtgaagcttgactatgcaaaagatcttcgtcctgctctagtgaaactacaggaagagaacttatcaacaatgaacactgatccattgtactcagcttatcactactcacatcctcctcttgttgaaaggcttcgagccactgatggagaagacaagaagacagattaacccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgcttgctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggtgaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaagcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaSEQ ID NO99是pBI121-AtCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子,粗体序列是AtCPP有义序列。SEQ ID NO100gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgatttttattatgaaaatattgcaaacgctaataatttttctattacctaaaattcctattaaaactctctacattcttactctaaattcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatcctcccaatgtccaagctcgtgtgcaataaccgccacaatttcatcctcattcttgcactgctgaatcaacgtatcataaagaacaatccttttgttcttaaagaaaccatacatgtaagcattgctatggcttgaccttgtagatccatcgacaacaaacagcttcttcaaaggaaactttagggaagaagcaagtttctcaatcttctcccggaggtctccatctggaagaggagtgaatttgttgaagagcggtgctatcaagaccgggtatatagtcatcatcactagagacaggataaacatgaatgcccacagatagatggcaagataaggacctcctttctggactatgaaaattatcgcagcaacaatgggtgggcctagtatgacagagaggaatgttcctttgatcatgtccctaatgaacatccatattgtttgtttgttgaacccatgccgagactcgatcacgaaagttgagtacaaagaaaatggcaaatcagtgatctgtgaccatgtcataacaccagccaagaatgaaagagtatgcagtatttcattctccggatcaaggcccaacctcggtaaaagaggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGT CCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAACAATGAATCAACAACTCTCCTGGCGCACCATCGTCGGCTACAGCCTCGGGAATTGCTACCGAGCTCttttaccgaggttgggccttgatccggagaatgaaatactgcatactctttcattcttggctggtgttatgacatggtcacagatcactgatttgccattttctttgtactcaactttcgtgatcgagtctcggcatgggttcaacaaacaaacaatatggatgttcattagggacatgatcaaaggaacattcctctctgtcatactaggcccacccattgttgctgcgataattttcatagtccagaaaggaggtccttatcttgccatctatctgtgggcattcatgtttatcctgtctctagtgatgatgactatatacccggtcttgatagcaccgctcttcaacaaattcactcctcttccagatggagacctccgggagaagattgagaaacttgcttcttccctaaagtttcctttgaagaagctgtttgttgtcgatggatctacaaggtcaagccatagcaatgcttacatgtatggtttctttaagaacaaaaggattgttctttatgatacgttgattcagcagtgcaagaatgaggatgaaattgtggcggttattgcacacgagcttggacattgggagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgcttgctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggtgaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaagcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaSEQ ID NO100是pBI121-HP-AtCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子,粗体序列是AtCPP反义序列。大写字母的序列是截短的GUS片段。粗体并且下划线的序列是AtCPP有义序列。SEQ ID NO130gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccTTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCATCAGTGGCTCGAAGCCTTTCAACAAGAGGAGGATGTGAGTAGTGATAAGCTGAGTACAATGGATCAGTGTTCATTGTTGATAAGTTCTCTTCCTGTAGTTTCACTAGAGCAGGACGAAGATCTTTTGCATAGTCAAGCTTCACAGCAAAAGCATCAGCCTGAAACTCAAACGCTCGACTAACGAGGTTCAGGCCAAAGCTTACTAGATGTTGCAGTGGTATTACAGTGTGCTGAAATATGATCAAACCAATGAGAACAGGCTGTGTATCAAATCCGAAACTCCTGAAGAGATCAGTGGAGTTTCTGAGAAGAGTGTATCCTCCAAATTGTAAGAAGGCAAGGATTTGAACTGCAATGAACGAGTATGTAGTGTGATTCAGTTTCCAATGTCCAAGCTCGTGTGCAATAACCGCCACAATTTCATCCTCATTCTTGCACTGCTGAATCAACGTATCATAAAGAACAATCCTTTTGTTCTTAAAGAAACCATACATGTAAGCATTGCTATGGCTTGACCTTGTAGATCCATCGACAACAAACAGCTTCTTCAAAGGAAACTTTAGGGAAGAAGCAAGTTTCTCAATCTTCTCCCGGAGGTCTCCATCTGGAAGAGGAGTGAATTTGTTGAAGAGCGGTGCTATCAAGACCGGGTATATAGTCATCATCACTAGAGACAGGATAAACATGAATGCCCACAGATAGATGGCAAGATAAGGACCTCCTTTCTGGACTATGAAAATTATCGCAGCAACAATGGGTGGGCCTAGTATGACAGAGAGGAATGTTCCTTTGATCATGTCCCTAATGAACATCCATATTGTTTGTTTGTTGAACCCATGCCGAGACTCGATCACGAAAGTTGAGTACAAAGAAAATGGCAAATCAGTGATCTGTGACCATGTCATAACACCAGCCAAGAATGAAAGAGTATGCAGTATTTCATTCTCCGGATCAAGGCCCAACCTCGGTAAAACAGCTCCAGACATCTTCCAAAACCAAGGCAAGATCCCAAAGAACAAAATTGCAGAGTCCATAAGTATAGTTACAAACTCATGAACAAAGTGAAAATAGCTTTTGTCAAGACTGTATGCTCGTGATTTCTCAAACTTCTCTTGGCTAATTACACCAACCAAGGTTTTCGGGAGAGTTGGAAGCTTGAGAGCAGTGAGTTGCCTCAGATCCAAATACGTCTCAAAAATGTACATCACTATCATAAAACCCACGACGGTTTCCATGAAAGGAATCGCCATcccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggccc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ID NO131是RD29A-AtCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是AtCPP有义序列。SEQ ID NO 132gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatcctcccaatgtccaagctcgtgtgcaataaccgccacaatttcatcctcattcttgcactgctgaatcaacgtatcataaagaacaatccttttgttcttaaagaaaccatacatgtaagcattgctatggcttgaccttgtagatccatcgacaacaaacagcttcttcaaaggaaactttagggaagaagcaagtttctcaatcttctcccggaggtctccatctggaagaggagtgaatttgttgaagagcggtgctatcaagaccgggtatatagtcatcatcactagagacaggataaacatgaatgcccacagatagatggcaagataaggacctcctttctggactatgaaaattatcgcagcaacaatgggtgggcctagtatgacagagaggaatgttcctttgatcatgtccctaatgaacatccatattgtttgtttgttgaacccatgccgagactcgatcacgaaagttgagtacaaagaaaatggcaaatcagtgatctgtgaccatgtcataacaccagccaagaatgaaagagtatgcagtatttcattctccggatcaaggcccaacctcggtaaaagaggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAA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ID NO132是RD29A-HP-AtCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是AtCPP反义序列。大写字母序列代表截短的GUS片段。粗体并且下划线序列代表拟南芥CaaX异戊二烯蛋白酶有义片段。SEQ ID NO133gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggCcgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatccTTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCATCAGTGGCTCGAAGCCTTTCAACAAGAGGAGGATGTGAGTAGTGATAAGCTGAGTACAATGGATCAGTGTTCATTGTTGATAAGTTCTCTTCCTGTAGTTTCACTAGAGCAGGACGAAGATCTTTTGCATAGTCAAGCTTCACAGCAAAAGCATCAGCCTGAAACTCAAACGCTCGACTAACGAGGTTCAGGCCAAAGCTTACTAGATGTTGCAGTGGTATTACAGTGTGCTGAAATATGATCAAACCAATGAGAACAGGCTGTGTATCAAATCCGAAACTCCTGAAGAGATCAGTGGAGTTTCTGAGAAGAGTGTATCCTCCAAATTGTAAGAAGGCAAGGATTTGAACTGCAATGAACGAGTATGTAGTGTGATTCAGTTTCCAATGTCCAAGCTCGTGTGCAATAACCGCCACAATTTCATCCTCATTCTTGCACTGCTGAATCAACGTATCATAAAGAACAATCCTTTTGTTCTTAAAGAAACCATACATGTAAGCATTGCTATGGCTTGACCTTGTAGATCCATCGACAACAAACAGCTTCTTCAAAGGAAACTTTAGGGAAGAAGCAAGTTTCTCAATCTTCTCCCGGAGGTCTCCATCTGGAAGAGGAGTGAATTTGTTGAAGAGCGGTGCTATCAAGACCGGGTATATAGTCATCATCACTAGAGACAGGATAAACATGAATGCCCACAGATAGATGGCAAGATAAGGACCTCCTTTCTGGACTATGAAAATTATCGCAGCAACAATGGGTGGGCCTAGTATGACAGAGAGGAATGTTCCTTTGATCATGTCCCTAATGAACATCCATATTGTTTGTTTGTTGAACCCATGCCGAGACTCGATCACGAAAGTTGAGTACAAAGAAAATGGCAAATCAGTGATCTGTGACCATGTCATAACACCAGCCAAGAATGAAAGAGTATGCAGTATTTCATTCTCCGGATCAAGGCCCAACCTCGGTAAAACAGCTCCAGACATCTTCCAAAACCAAGGCAAGATCCCAAAGAACAAAATTGCAGAGTCCATAAGTATAGTTACAAACTCATGAACAAAGTGAAAATAGCTTTTGTCAAGACTGTATGCTCGTGATTTCTCAAACTTCTCTTGGCTAATTACACCAACCAAGGTTTTCGGGAGAGTTGGAAGCTTGAGAGCAGTGAGTTGCCTCAGATCCAAATACGTCTCAAAAATGTACATCACTATCATAAAACCCACGACGGTTTCCATGAAAGGAATCGCCATcccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttac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ID NO133是RD29A-反义-AtCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。大写字母序列是AtCPP反义序列。SEQ ID NO134gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagctGGGAAATTTTTCGCCAGTTCTAAATATCCGGAAACCTCTTGGGATGCCATTGCCCATCTATCTGTAATTTATTGACGAAATAGACGAAAAGGAAGGTGGCTCCTATAAAGCACATCATTGCGATAACAGAAAGGCCATTGTTGAAGATACCTCTGCTGACATTGGTCCCCAAGTGGAAGCACCACCCCATGAGGAGCACCGTGGAGTAAGAAGACGTTCGAGCCACGTCGAAAAAGCAAGTGTGTTGATGTAGTATCTCCATTGACGTAAGGGATGACGCACAATCCAACTATCCATCGCAAGACCATTGCTCTATATAAGAAAGTTAATATCATTTCGAGTGGCcACGCTGAGGGGGATCCatggcgattcctttcatggaaaccgtcgtgggttttatgatagtgatgtacatttttgagacgtatttggatctgaggcaactcactgctctcaagcttccaactctcccgaaaaccttggttggtgtaattagccaagagaagtttgagaaatcacgagcatacagtcttgacaaaagctattttcactttgttcatgagtttgtaactatacttatggactctgcaattttgttctttgggatcttgccttggttttggaagatgtctggagctgttttaccgaggttgggccttgatccggagaatgaaatactgcatactctttcattcttggctggtgttatgacatggtcacagatcactgatttgccattttctttgtactcaactttcgtgatcgagtctcggcatgggttcaacaaacaaacaatatggatgttcattagggacatgatcaaaggaacattcctctctgtcatactaggcccacccattgttgctgcgataattttcatagtccagaaaggaggtccttatcttgccatctatctgtgggcattcatgtttatcctgtctctagtgatgatgactatatacccggtcttgatagcaccgctcttcaacaaattcactcctcttccagatggagacctccgggagaagattgagaaacttgcttcttccctaaagtttcctttgaagaagctgtttgttgtcgatggatctacaaggtcaagccatagcaatgcttacatgtatggtttctttaagaacaaaaggattgttctttatgatacgttgattcagcagtgcaagaatgaggatgaaattgtggcggttattgcacacgagcttggacattggaaactgaatcacactacatactcgttcattgcagttcaaatccttgccttcttacaatttggaggatacactcttctcagaaactccactgatctcttcaggagtttcggatttgatacacagcctgttctcattggtttgatcatatttcagcacactgtaataccactgcaacatctagtaagctttggcctgaacctcgttagtcgagcgtttgagtttcaggctgatgcttttgctgtgaagcttgactatgcaaaagatcttcgtcctgctctagtgaaactacaggaagagaacttatcaacaatgaacactgatccattgtactcagcttatcactactcacatcctcctcttgttgaaaggcttcgagccactgatggagaagacaagaagacagattaacccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgcttgctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggtgaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaagcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaSEQ ID NO134是MuA-AtCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。大写字母序列是MuA启动子。拟南芥CaaX异戊二烯有义序列以粗体显示。SEQ ID NO135gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacaCtttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagctGGGAAATTTTTCGCCAGTTCTAAATATCCGGAAACCTCTTGGGATGCCATTGCCCATCTATCTGTAATTTATTGACGAAATAGACGAAAAGGAAGGTGGCTCCTATAAAGCACATCATTGCGATAACAGAAAGGCCATTGTTGAAGATACCTCTGCTGACATTGGTCCCCAAGTGGAAGCACCACCCCATGAGGAGCACCGTGGAGTAAGAAGACGTTCGAGCCACGTCGAAAAAGCAAGTGTGTTGATGTAGTATCTCCATTGACGTAAGGGATGACGCACAATCCAACTATCCATCGCAAGACCATTGCTCTATATAAGAAAGTTAATATCATTTCGAGTGGCCACGCTGAGGGGGATCGGGATGGCGTTTCCCTACATGGAAGCCGTTGTCGGATTTATGATATTAATGTACATTTTTGAAACTTACTTGGATGTGCGACAACATAGGGCCCTCAAACTTCCTACTCTTCCAAAGACTTTAGAGGGTGTTATCAGCCAAGAGAAATTTGAGAAATCTAGAGCCTATAGTCTTGATAAAAGCCACTTCCATTTTGTTCACGAGTTTGTGACAATAGTGACAGACTCTACAATTTTGTACTTTGGGGTATTGCCCTGGTTTTGGAAGAAATCAGCAGATTTTATGACAATAGCTGGTTTCAATGCTGAGAATGAAATACTGCATACCCTTGCCTTCTTAGCAGGGCTGATGATTTGGTCACAGATAACAGATTTGCCCTTTTCTCTGTACTCAACTTTTGTGATTGAGGCCCGTCATGGTTTTAATAAGCAAACACCATGGTTATTCTTTAGGGACATGCTTAAAGGAATTTTCCTTTCTGTAATAATTGGTCCACCTATTGTGGCTGCAATCATTGTAATAGTACAGAAAGGAGGTCCATACTTGGCCATCTATCTTTGGGTTTTTACGTTTGGTCTTTCTATTGTGATGATGACCCTTTATCCAGTACTAATAGCTCCACTCTTCAATAAGTTCACTCCACTTCCAGATGGTCAACTCAGGGAGAAAATCGAGAAACTTGCTTCCTCCCTCAACTATCCGTTAAAGAAACTATTTGTTGTCGATGGATCCACAAGATCAAGTCACAGCAATGCCTATATGTATGGATTCTTCAAGAACAAGAGGATTGTCCCTTATGACACATTAATTCAACAGTGCAAAGACGATGAGGAAATTGTTGCTGTTATTGCCCATGAGTTGGGACACTGGAAGCTCAACCATACTGTGTACACATTTGTTGCTATGCAGATTCTTACACTTCTACAATTTGGAGGATATACACTAGTGCGAAATTCAGCTGATCTGTATCGAAGCTTTGGGTTTGATACGCAGCCAGTCCTCATTGGGCTCATCATATTTCAGCATACTGTAATCCCACTTCAGCAATTGGTCAGCTTTGGTCTGAACCTAGTCAGCCGATCATTTGAATTTCAGGCTGATGGCTTTGCCAAGAAGCTTGGATATGCATCTGGATTACGCGGTGGTCTTGTGAAACTACAGGAGGAGAATCTGTCAGCTATGAATACAGATCCTTGGTACTCTGCTTATCACTATTCTCATCCTCCCCTTGTTGAAAGATTGGCCGCGCTGGACGAACCGGATAAGAAGGAAGACTAAgagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgcttgctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggtgaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaagcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaSEQ ID NO135是MuA-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。大写字母序列是MuA启动子。大豆CaaX异戊二烯蛋白酶有义序列是大写字母并且是粗体的。SEQ ID NO136gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaattttcttacctcttcctctttctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatccttatctacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatttaataattaacatttaattcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggtttaatttctcccttttttcttttgcccaatactcaaacctcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatcgacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtccagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccccgggatggcgtttccctacatggaagccgttgtcggatttatgatattaatgtacatttttgaaacttacttggatgtgcgacaacatagggccctcaaacttcctactcttccaaagactttagagggtgttatcagccaagagaaatttgagaaatctagagcctatagtcttgataaaagccacttccattttgttcacgagtttgtgacaatagtgacagactctacaattttgtactttggggtattgccctggttttggaagaaatcaggagattttatgacaatagctggtttcaatgctgagaatgaaatactgcatacccttgccttcttagcagggctgatgatttggtcacagataacagatttgcccttttctctgtactcaacttttgtgattgaggcccgtcatggttttaataagcaaacaccatggttattctttagggacatgcttaaaggaattttcctttctgtaataattggtccacctattgtggctgcaatcattgtaatagtacagaaaggaggtccatacttggccatctatctttgggtttttacgtttggtctttctattgtgatgatgaccctttatccagtactaatagctccactcttcaataagttcactccacttccagatggtcaactcagggagaaaatcgagaaacttgcttcctccctcaactatccgttaaagaaactatttgttgtcgatggatccacaagatcaagtcacagcaatgcctatatgtatggattcttcaagaacaagaggattgtcccttatgacacattaattcaacagtgcaaagacgatgaggaaattgttgctgttattgcccatgagttgggacactggaagctcaaccatactgtgtacacatttgttgctatgcagattcttacacttctacaatttggaggatatacactagtgcgaaattcagctgatctgtatcgaagctttgggtttgatacgcagccagtcctcattgggctcatcatatttcagcatactgtaatcccacttcagcaattggtcagctttggtctgaacctagtcagccgatcatttgaatttcaggctgatggctttgccaagaagcttggatatgcatctggattacgcggtggtcttgtgaaactacaggaggagaatctgtcagctatgaatacagatccttggtactctgcttatcactattctcatcctccccttgttgaaagattggccgcgctggacgaaccggataagaaggaagactaagagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgcttt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ID NO135是pBI121-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子。大豆CaaX异戊二烯蛋白酶有义序列用粗体表示。SEQ ID NO137gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttCattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctCtccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaccggttcgtccagcgcggccaatctttcaacaaggggaggatgagaatagtgataagcagagtaccaaggatctgtattcatagctgacagattctcctcctgtagtttcacaagaccaccgcgtaatccagatgcatatccaagcttcttggcaaagccatcagcctgaaattcaaatgatcggctgactaggttcagaccaaagctgaccaattgctgaagtgggattacagtatgctgaaatatgatgagcccaatgaggactggctgcgtatcaaacccaaagcttcgatacagatcagctgaatttcgcactagtgtatatcctccaaattgtagaagtgtaagaatctgcatagcaacaaatgtgtacacagtatggttgagcttccagtgtcccaactcatgggcaataacagcaacaatttcctcatcgtctttgcactgttgaattaatgtgtcataagggacaatcctcttgttcttgaagaatccatacatataggcattgctgtgacttgatcttgtggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAACAATGAatcaacaactctcctggcgcaccatcgtcggctacagcctcgggaattgctaccgagctcacaagatcaagtcacagcaatgcctatatgtatggattcttcaagaacaagaggattgtcccttatgacacattaattcaacagtgcaaagacgatgaggaaattgtt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ID NO137是pBI121-HP-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子。粗体序列是大豆反义异戊二烯蛋白酶片段。粗体并且带下划线的序列是大豆有义异戊二烯蛋白酶片段,大写字母序列是截短的GUS片段。SEQ ID NO138gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtgactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccccgggttagtcttccttcttatccggttcgtccagcgcggccaatctttcaacaaggggaggatgagaatagtgataagcagagtaccaaggatctgtattcatagctgacagattctcctcctgtagtttcacaagaccaccgcgtaatccagatgcatatccaagcttcttggcaaagccatcagcctgaaattcaaatgatcggctgactaggttcagaccaaagctgaccaattgctgaagtgggattacagtatgctgaaatatgatgagcccaatgaggactggctgcgtatcaaacccaaagcttcgatacagatcagctgaatttcgcactagtgtatatcctccaaattgtagaagtgtaagaatctgcatagcaacaaatgtgtacacagtatggttgagcttccagtgtcccaactcatgggcaataacagcaacaatttcctcatcgtctttgcactgttgaattaatgtgtcataagggacaatcctcttgttcttgaagaatccatacatataggcattgctgtgacttgatcttgtggatccatcgacaacaaatagtttctttaacggatagttgagggaggaagcaagtttctcgattttctccctgagttgaccatctggaagtggagtgaacttattgaagagtggagctattagtactggataaagggtcatcatcacaatagaaagaccaaacgtaaaaacccaaagatagatggccaagtatggacctcctttctgtactattacaatgattgcagccacaataggtggaccaattattacagaaaggaaaattcctttaagcatgtccctaaagaataaccatggtgtttgcttattaaaaccatgacgggcctcaatcacaaaagttgagtacagagaaaagggcaaatctgttatctgtgaccaaatcatcagccctgctaagaaggcaagggtatgcagtatttcattctcagcattgaaaccagctattgtcataaaatctcctgatttcttccaaaaccagggcaataccccaaagtacaaaattgtagagtctgtcactattgtcacaaactcgtgaacaaaatggaagtggcttttatcaagactataggctctagatttctcaaatttctcttggctgataacaccctctaaagtctttggaagagtaggaagtttgagggccctatgttgtcgcacatccaagtaagtttcaaaaatgtacattaatatcataaatccgacaacggcttccatgtagggaaacgccatgagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaaga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ID NO138是pBI121-反义-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子。粗体序列是GmCPP反义序列。SEQ ID NO139gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatccccgggatggcgtttccctacatggaagccgttgtcggatttatgatattaatgtacatttttgaaacttacttggatgtgcgacaacatagggccctcaaacttcctactcttccaaagactttagagggtgttatcagccaagagaaatttgagaaatctagagcctatagtcttgataaaagccacttccattttgttcacgagtttgtgacaatagtgacagactctacaattttgtactttggggtattgccctggttttggaagaaatcaggagattttatgacaatagctggtttcaatgctgagaatgaaatactgcatacccttgccttcttagcagggctgatgatttggtcacagataacagatttgcccttttctctgtactcaacttttgtgattgaggcccgtcatggttttaataagcaaacaccatggttattctttagggacatgcttaaaggaattttcctttctgtaataattggtccacctattgtggctgcaatcattgtaatagtacagaaaggaggtccatacttggccatctatctttgggtttttacgtttggtctttctattgtgatgatgaccctttatccagtactaatagctccactcttcaataagttcactccacttccagatggtcaactcagggagaaaatcgagaaacttgcttcctccctcaactatccgttaaagaaactatttgttgtcgatggatccacaagatcaagtcacagcaatgcctatatgtatggattcttcaagaacaagaggattgtcccttatgacacattaattcaacagtgcaaagacgatgaggaaattgttgctgttattgcccatgagttgggacactggaagctcaaccatactgtgtacacatttgttgctatgcagattcttacacttctacaatttggaggatatacactagtgcgaaattcagctgatctgtatcgaagctttgggtttgatacgcagccagtcctcattgggctcatcatatttcagcatactgtaatcccacttcagcaattggtcagctttggtctgaacctagtcagccgatcatttgaatttcaggctgatggctttgccaagaagcttggatatgcatctggattacgcggtggtcttgtgaaactacaggaggagaatctgtcagctatgaatacagatccttggtactctgcttatcactattctcatcctccccttgttgaaagattggccgcgctggacgaaccggataagaaggaagactaagagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctat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ID NO139是PRD29A-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是GmCPP有义序列。SEQ ID NO140gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggaCaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcacCggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaaCtgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttCcggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaccggttcgtccagcgcggccaatctttcaacaaggggaggatgagaatagtgataagcagagtaccaaggatctgtattcatagctgacagattctcctcctgtagtttcacaagaccaccgcgtaatccagatgcatatccaagcttcttggcaaagccatcagcctgaaattcaaatgatcggctgactaggttcagaccaaagctgaccaattgctgaagtgggattacagtatgctgaaatatgatgagcccaatgaggactggctgcgtatcaaacccaaagcttcgatacagatcagctgaatttcgcactagtgtatatcctccaaattgtagaagtgtaagaatctgcatagcaacaaatgtgtacacagtatggttgagcttccagtgtcccaactcatgggcaataacagcaacaatttcctcatcgtctttgcactgttgaattaatgtgtcataagggacaatcctcttgttcttgaagaatccatacatataggcattgctgtgacttgatcttgtggatCCCCATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAACAATGAatcaacaactctcctggcgcaccatcgtcggctacagcctcggg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ID NO140是pRD29A-HP-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是GmCPP反义序列,粗体并且有下划线的序列是GmCPP有义序列。SEQ ID NO141gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctcggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctsagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacamggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttatttcctttgtaaatacaaattaattttttttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagagcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatccccggttagtcttccttcttatccggttcgtccagcgcggccaatctttcaacaaggggaggatgagaatagtgataagcagagtaccaaggatctgtattcatagctgacagattctcctcctgtagtttcacaagaccaccgcgtaatccagatgcatatccaagcttcttggcaaagccatcagcctgaaattcaaatgatcggctgactaggttcagaccaaagctgaccaattgctgaagtgggattacagtatgctgaaatatgatgagcccaatgaggactggctgcgtatcaaacccaaagcttcgatacagatcagctgaatttcgcactagtgtatatcctccaaattgtagaagtgtaagaatctgcatagcaacaaatgtgtacacagtatggttgagcttccagtgtcccaactcatgggcaataacagcaacaatttcctcatcgtctttgcactgttgaattaatgtgtcataagggacaatcctcttgttcttgaagaatccatacatataggcattgctgtgacttgatcttgtggatccatcgacaacaaatagtttctttaacggatagttgagggaggaagcaagtttctcgattttctccctgagttgaccatctggaagtggagtgaacttattgaagagtggagctattagtactggataaagggtcatcatcacaatagaaagaccaaacgtaaaaacccaaagatagatggccaagtatggacctcctttctgtactattacaatgattgcagccacaataggtggaccaattattacagaaaggaaaattcctttaagcatgtccctaaagaataaccatggtgtttgcttattaaaaccatgacgggcctcaatcacaaaagttgagtacagagaaaagggcaaatctgttatctgtgaccaaatcatcagccctgctaagaaggcaagggtatgcagtatttcattctcagcattgaaaccagctattgtcataaaatctcctgatttcttccaaaaccagggcaataccccaaagtacaaaattgtagagtctgtcactattgtcacaaactcgtgaacaaaatggaagtggcttttatcaagactataggctctagatttctcaaatttctcttggctgataacaccctctaaagtctttggaagagtaggaagtttgagggccctatgttgtcgcacatccaagtaagtttcaaaaatgtacattaatatcataaatccgacaacggcttccatgtagggaaacgccatgagctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttact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ID NO141是PRD29A-反义-GmCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是GmCPP反义序列。SEQ ID NO142gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatttaataattaacatttaattcattactttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggCcttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttttttttaatttttatcttataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaaacaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccatggcgattcctttcatggaaaccgtcgttggttttatgatagtgatgtacgtttttgagacgtatttggatctgaggcaacatactgctctcaagcttcccactctcccaaagactttggttggagtcattagccaagagaagtttgagaaatctcgagcttacagtcttgacaaaagccattttcactttgttcatgagtttgttactatacttatggactctgcgattctgttctttgggatcttgccttggttttggaagatatctggcggctttctaccaatggtgggactcgatccagagaatgaaatcctgcacactctttcattcttggctggtcttatgacatggtcacagatcactgatttgccattttctttgtactcaactttcgtgatcgagtctcggcatgggttcaacaaacaaacaatatggatgttcattatttacattatcaaattaatactcctctctgtcatacctgcccctcctatcgttgccgcaattattgttatagttcagaaaggaggtccttacctcgccatctatctgtgggcattcatgtttatcctgtctctagtgatgatgactatataccctgttttgattgcacctcttttcaacaagttcactcctcttcctgatggagacctccgggagaagattgagaaacttgcttcttctctaaagtttcctctgaagaagctgtttgttgtcgatggatctacaaggtcaagccatagtaatgcttacatgtatggtttcttcaagaacaaaaggattgttctttatgacacattgattcagcagtgccagaatgagaatgaaattgtggcggttattgcacacgagctgggacactggaagctgaatcacactacatactcgttcattgctgttcaaatccttgccttcttgcaatttggaggatacactcttgtcagaaactccactgatctcttcaggagttttggttttgatacacaaccagttctcattggtttgatcatatttcagcacactgtaataccacttcaacacctagtaagctttgacctcaaccttgttagtcgagcgtttgagtttcaggctgatgcttttgcagtgaatcttggttatgcaaaggatctacgtcctgccctagtgaagctacaggaagagaacttatcagcgatgaacacagacccattgtactcagcttatcactactcacaccctcctcttgtagagaggcttcgagccattgatggagaagacaagaagacagattaacccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggccc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ID NO142是pBI121-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子。粗体序列是BnCPP反义序列。SEQ ID NO143gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaccagtgtcccagctcgtgtgcaataaccgccacaatttcattctcattctggcactgctgaatcaatgtgtcataaagaacaatccttttgttcttgaagaaaccatacatgtaagcattactatggcttgaccttgtagatccatcgacaacaaacagcttcttcagaggaaactttagagaagaagcaagtttctcaatcttctcccggaggtctccatcaggaagaggagtgaacttgttgaaaagaggtgcaatcaaaacagggtatatagtcatcatcactagagacaggataaacatgaatgcccacagatagatggcgaggtaaggacctcctttctgaactataacaataattgcggcaacgataggaggggcaggtatgacagagaggagtattcctttgatcatgtccctaatgaacatccatattgtttgtttgttgaacccatgccgagactcgatcacgaaagttgagtacaaagaaaatggcaaatcagtgatctgtgaccatgtcataagaccagccaagaatgaaagagtgtgcaggatttcattctctggatcgagtcccaccattggtagaaggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAACAATGAatcaacaactctcctggcgcaccatcgtcggctacagcctcgggaattgctaccgagctcttctaccaatggtgggactcgatccagagaatgaaatcctgcacact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ID NO143是PBI121-HP-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子。粗体序列是BnCPP反义序列,粗体并有下划线的序列是BnCPP有义片段,大写字母表示截短的GUS片段。SEQ ID NO144gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatecaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaagctagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccttaatctgtcttcttgtcttctccatcaatggctcgaagcctctctacaagaggagggtgtgagtagtgataagctgagtacaatgggtctgtgttcatcgctgataagttctcttcctgtagcttcactagggcaggacgtagatcctttgcataaccaagattcactgcaaaagcatcagcctgaaactcaaacgctcgactaacaaggttgaggtcaaagcttactaggtgttgaagtggtattacagtgtgctgaaatatgatcaaaccaatgagaactggttgtgtatcaaaaccaaaactcctgaagagatcagtggagtttctgacaagagtgtatcctccaaattgcaagaaggcaaggatttgaacagcaatgaacgagtatgtagtgtgattcagcttccagtgtcccagctcgtgtgcaataaccgccacaatttcattctcattctggcactgctgaatcaatgtgtcataaagaacaatccttttgttcttgaagaaaccatacatgtaagcattactatggcttgaccttgtagatccatcgacaacaaacagcttcttcagaggaaactttagagaagaagcaagtttctcaatcttctcccggaggtctccatcaggaagaggagtgaacttgttgaaaagaggtgcaatcaaaacagggtatatagtcatcatcactagagacaggataaacatgaatgcccacagatagatggcgaggtaaggacctcctttctgaactataacaataattgcggcaacgataggaggggcaggtatgacagagaggagtattcctttgatcatgtccctaatgaacatccatattgtttgtttgttgaacccatgccgagactcgatcacgaaagttgagtacaaagaaaatggcaaatcagtgatctgtgaccatgtcataagaccagccaagaatgaaagagtgtgcaggatttcattctctggatcgagtcccaccattggtagaaagccgccagatatcttccaaaaccaaggcaagatcccaaagaacagaatcgcagagtccataagtatagtaacaaactcatgaacaaagtgaaaatggcttttgtcaagactgtaagctcgagatttctcaaacttctcttggctaatgactccaaccaaagtctttgggagagtgggaagcttgagagcagtatgttgcctcagatccaaatacgtctcaaaaacgtacatcactatcataaaaccaacgacggtttccatgaaaggaatcgccatcccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggccc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ID NO144是PBI121-反义-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是35S启动子。粗体序列是BnCPP反义序列。SEQ ID NO145gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatccatggcgattcctttcatggaaaccgtcgttggttttatgatagtgatgtacgtttttgagacgtatttggatctgaggcaacatactgctctcaagcttcccactctcccaaagactttggttggagtcattagccaagagaagtttgagaaatctcgagcttacagtcttgacaaaagccattttcactttgttcatgagtttgttactatacttatggactctgcgattctgttctttgggatcttgccttggttttggaagatatctggcggctttctaccaatggtgggactcgatccagagaatgaaatcctgcacactctttcattcttggctggtcttatgacatggtcacagatcactgatttgccattttctttgtactcaactttcgtgatcgagtctcggcatgggttcaacaaacaaacaatatggatgttcattagggacatgatcaaaggaatactcctctctgtcatacctgcccctcctatcgttgccgcaattattgttatagttcagaaaggaggtccttacctcgccatctatctgtgggcattcatgtttatcctgtctctagtgatgatgactatataccctgttttgattgcacctcttttcaacaagttcactcctcttcctgatggagacctccgggagaagattgagaaacttgcttcttctctaaagtttcctctgaagaagctgtttgttgtcgatggatctacaaggtcaagccatagtaatgcttacatgtatggtttcttcaagaacaaaaggattgttctttatgacacattgattcagcagtgccagaatgagaatgaaattgtggcggttattgcacacgagctgggacactggaagctgaatcacactacatactcgttcattgctgttcaaatccttgccttcttgcaatttggaggatacactcttgtcagaaactccactgatctcttcaggagttttggttttgatacacaaccagttctcattggtttgatcatatttcagcacactgtaataccacttcaacacctagtaagctttgacctcaaccttgttagtcgagcgtttgagtttcaggctgatgcttttgcagtgaatcttggttatgcaaaggatctacgtcctgccctagtgaagctacaggaagagaacttatcagcgatgaacacagacccattgtactcagcttatcactactcacaccctcctcttgtagagaggcttcgagccattgatggagaagacaagaagacagattaacccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttac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ID NO145是pRD29A-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是BnCPP有义序列。SEQ ID NO146gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctcaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaacattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaccagtgtcccagctcgtgtgcaataaccgccacaatttcattctcattctggcactgctgaatcaatgtgtcataaagaacaatccttttgttcttgaagaaaccatacatgtaagcattactatggcttgaccttgtagatccatcgacaacaaacagcttcttcagaggaaactttagagaagaagcaagtttctcaatcttctcccggaggtctccatcaggaagaggagtgaacttgttgaaaagaggtgcaatcaaaacagggtatatagtcatcatcactagagacaggataaacatgaatgcccacagatagatggcgaggtaaggacctcctttctgaactataacaataattgcggcaacgataggaggggcaggtatgacagagaggagtattcctttgatcatgtccctaatgaacatccatattgtttgtttgttgaacccatgccgagactcgatcacgaaagttgagtacaaagaaaatggcaaatcagtgatctgtgaccatgtcataagaccagccaagaatgaaagagtgtgcaggatttcattctctggatcgagtcccaccattggtagaaggatccccATCTACCCGCTTCGCGTCGGCATCCGGTCAGTGGCAGTGAAGGGCGAACAGTTCCTGATTAACCACAAACCGTTCTACTTTACTGGCTTTGGTCGTCATGAAGATGCGGACTTGCGTGGCAAAGGATTCGATAACGTGCTGATGGTGCACGACCACGCATTAATGGACTGGATTGGGGCCAACTCCTACCGTACCTCGCATTACCCTTACGCTGAAGAGATGCTCGACTGGGCAGATGAACATGGCATCGTGGTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTTCGCTCTCTTTAGGCATTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAACTCAGCAAGCGCACTTACAGGCGATTAAAGAGCTGATAGCGCGTGACAAAAACCACCCAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATATTTCGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACCCGACGCGTCCGATCACCTGCGTCAATGTAATGTTCTGCGACGCTCACACCGATACCATCAGCGATCTCTTTGATGTGCTGTGCCTGAACCGTTATTACGGATGGTATGTCCAAAGCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGAAGGTACTGGAAAAAGAACTTCTGGCCTGGCAGGAGAAACTGTACACCGACATGTGGAGTGAAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCGTCTTTGATCGCGTCAGCGCCGTCGTCGGTGAACAGGTATGGAATTTCGCCGATTTTGCGACCTCGCAAGGCATATTGCGCGTTGGCGGTAACAAGAAAGGGATCTTCACTCGCGACCGCAAACCGAAGTCGGCGGCTTTTCTGCTGCAAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGC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ctgccaSEQ ID NO146是pRD29A-HP-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是BnCPP反义序列,粗体并有下划线的序列是BnCPP有义片段,大写字母序列代表截短的GUS片段。SEQ ID NO147gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctattaaatttttttcttcttaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattactacatcaacttcctacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttttcaataaattttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagggagccatagatgcaattcaatcaaactgaaatttctgcaagaatctCaaacacggagatctcaaagtttgaaagaaaatttatttcttcgactcaaaacaaacttacgaaatttaggtagaacttatatacattatattgtaattttttgtaacaaaatgtttttattattattatagaattttactggttaaattaaaaatgaatagaaaaggtgaattaagaggagagaggaggtaaaCattttcttctattttttcatattttcaggataaattattgtaaaagtttacaagatttccatttgactagtgtaaatgaggaatattctctagtaagatcattatttcatctacttcttttatcttctaccagtagaggaataaacaatatttagctcctttgtaaatacaaattaattttccttcttgacatcattcaattttaattttacgtataaaataaaagatcatacctattagaacgattaaggagaaatacaattcgaatgagaaggatgtgccgtttgttataataaacagccacacgacgtaaacgtaaaatgaccacatgatgggccaatagacatggaccgactactaataatagtaagttacattttaggatggaataaatatcataccgacatcagttttgaaagaaaagggaaaaaaagaaaaaataaataaaagatatactaccgacatgagttccaaaaagcaaaaaaaaagatcaagccgacacagacacgcgtagagagcaaaatgactttgacgtcacaccacgaaaacagacgcttcatacgtgtccctttatctctctcagtctctctataaacttagtgagaccctcctctgttttactcacaaatatgcaaactagaaaacaatcatcaggaataaagggtttgattacttctattggaaaggactctagaggatccttaatctgtcttcttgtcttctccatcaatggctcgaagcctctctacaagaggagggtgtgagtagtgataagctgagtacaatgggtctgtgttcatcgctgataagttctcttcctgtagcttcactagggcaggacgtagatcctttgcataaccaagattcactgcaaaagcatcagcctgaaactcaaacgctcgactaacaaggttgaggtcaaagcttactaggtgttgaagtggtattacagtgtgctgaaatatgatcaaaccaatgagaactggttgtgtatcaaaaccaaaactcctgaagagatcagtggagtttctgacaagagtgtatcctccaaattgcaagaaggcaaggatttgaacagcaatgaacgagtatgtagtgtgattcagcttccagtgtcccagctcgtgtgcaataaccgccacaatttcattctcattctggcactgctgaatcaatgtgtcataaagaacaatccttttgttcttgaagaaaccatacatgtaagcattactatggcttgaccttgtagatccatcgacaacaaacagcttcttcagaggaaactttagagaagaagcaagtttctcaatcttctcccggaggtctccatcaggaagaggagtgaacttgttgaaaagaggtgcaatcaaaacagggtatatagtcatcatcactagagacaggataaacatgaatgcccacagatagatggcgaggtaaggacctcctttctgaactataacaataattgcggcaacgataggaggggcaggtatgacagagaggagtattcctttgatcatgtccctaatgaacatccatattgtttgtttgttgaacccatgccgagactcgatcacgaaagttgagtacaaagaaaatggcaaatcagtgatctgtgaccatgtcataagaccagccaagaatgaaagagtgtgcaggatttcattctctggatcgagtcccaccattggtagaaagccgccagatatcttccaaaaccaaggcaagatcccaaagaacagaatcgcagagtccataagtatagtaacaaactcatgaacaaagtgaaaatggcttttgtcaagactgtaagctcgagatttctcaaacttctcttggctaatgactccaaccaaagtctttgggagagtgggaagcttgagagcagtatgttgcctcagatccaaatacgtctcaaaaacgtacatcactatcataaaaccaacgacggtttccatgaaaggaatcgccatcccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttac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ID NO147是pRD29A-反义-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是RD29A启动子。粗体序列是BnCPP反义序列。SEQ ID NO148gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagctgggaaatttttcgccagttctaaatatccggaaacctcttgggatgccattgcccatctatctgtaatttattgacgaaatagacgaaaaggaaggtggctcctataaagcacatcattgcgataacagaaaggccattgttgaagatacctctgctgacattggtccccaagtggaagcaccaccccatgaggagcaccgtggagtaagaagacgttcgagccacgtcgaaaaagcaagtgtgttgatgtagtatctccattgacgtaagggatgacgcacaatccaactatccatcgcaagaccattgctctatataagaaagttaatatcatttcgagtggccacgctgagggggatccatggcgattcctttcatggaaaccgtcgttggttttatgatagtgatgtacgtttttgagacgtatttggatctgaggcaacatactgctctcaagcttcccactctcccaaagactttggttggagtcattagccaagagaagtttgagaaatctcgagcttacagtcttgacaaaagccattttcactttgttcatgagtttgttactatacttatggactctgcgattctgttctttgggatcttgccttggttttggaagatatctggcggctttctaccaatggtgggactcgatccagagaatgaaatcctgcacactctttcattcttggctggtcttatgacatggtcacagatcactgatttgccattttctttgtactcaactttcgtgatcgagtctcggcatgggttcaacaaacaaacaatatggatgttcattagggacatgatcaaaggaatactcctctctgtcatacctgcccctcctatcgttgccgcaattattgttatagttcagaaaggaggtccttacctcgccatctatctgtgggcattcatgtttatcctgtctctagtgatgatgactatataccctgttttgattgcacctcttttcaacaagttcactcctcttcctgatggagacctccgggagaagattgagaaacttgcttcttctctaaagtttcctctgaagaagctgtttgttgtcgatggatctacaaggtcaagccatagtaatgcttacatgtatggtttcttcaagaacaaaaggattgttctttatgacacattgattcagcagtgccagaatgagaatgaaattgtggcggttattgcacacgagctgggacactggaagctgaatcacactacatactcgttcattgctgttcaaatccttgccttcttgcaatttggaggatacactcttgtcagaaactccactgatctcttcaggagttttggttttgatacacaaccagttctcattggtttgatcatatttcagcacactgtaataccacttcaacacctagtaagctttgacctcaaccttgttagtcgagcgtttgagtttcaggctgatgcttttgcagtgaatcttggttatgcaaaggatctacgtcctgccctagtgaagctacaggaagagaacttatcagcgatgaacacagacccattgtactcagcttatcactactcacaccctcctcttgtagagaggcttcgagccattgatggagaagacaagaagacagattaacccctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgcttgctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggtgaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaagcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaSEQ ID NO148是MuA-BnCPP的核酸序列。斜体序列是右边界和左边界重复序列。下划线序列是MuA启动子。粗体序列是BnCPP有义序列。实施例33.Southern分析用本领域技术人员公知的方法对转基因拟南芥进行基因组Southern blot分析。典型地,将10μg DNA在0.8%琼脂糖凝胶上进行电泳,然后转移到适当的膜例如Hybond N+(AmershamPharmacia Biotech)上。预杂交和杂交条件根据膜的制造商给出的确定,典型地是在65℃。最终的严谨洗脱条件是1X SSC和0.1%SDS,65℃。在Southern blot分析中典型地用NPTII编码序列作为放射性探针。选择三十七个拟南芥种系作为纯合pBI121-AtCPP过表达种系,进行进一步检测。图27显示了代表性的杂交图,证明存在pBI121-AtCPP转基因。用在PCR检测中转基因特异的引物通过PCR分析证实种系是否是转基因的。选择三十三个拟南芥种系作为纯合的pBI121-HP-AtCPP发夹负调控种系,进行进一步检测。图28显示了代表性的杂交图,证明是否存在pBI121-HP-AtCPP发夹构建体。用在PCR检测中转基因特异的引物通过PCR分析证实了所有种系都是转基因的。选择拟南芥种系作为纯合的pRD29A-AtCPP过表达种系,进行进一步检测。图29显示了代表性的杂交图,证实是否存在pRD29A-AtCPP转基因。用在PCR检测中转基因特异的引物通过PCR分析证实种系是否是转基因的。选择拟南芥种系作为纯合的pRD29A-HP-AtCPP过表达种系,进行进一步检测。图30显示了代表性的杂交图,证实是否存在pRD29A-HP-AtCPP转基因。用在PCR检测中转基因特异的引物通过PCR分析证实种系是否是转基因的。实施例34转基因植物的PCR分析用PCR方法验证所有转基因种系和每个构建体中是否存在转基因。典型的PCR混合物包括1X反应缓冲液(10mM Tris-HClpH 8.8,1.5mM MgCl2,50mM KCl),dNTP 200μM,1pM正向和反向引物,2.5U.Taq DNA聚合酶,和模板,加水至终体积为50μ1。反应条件为94℃1分钟,60℃1分钟,72℃1分钟,30个循环。pBI121-AtCPP和pBI121-HP-AtCPP转基因植物的分析中使用的引物如表20所示。pRD29A-AtCPP的分析中使用的引物是RD29AP1(SEQ ID NO161)和SEQ ID NO102。pRD29A-HP-AtCPP转基因植物的分析中使用的引物是RD29AP1(SEQ ID NO161),SEQ ID NO103和SEQ ID NO103,Nosterm-RV(SEQ ID NO162)。表20pBI121-AtCPP BamFW5′-GCCGACAGTGGTCCCAAAGATGG-3′(SEQ ID NO105)p35S-AtCPP SmaRV5′-AAACCCGGGTTAATCTGTCTTCTTGTCTTCTCCA-3′(SEQID NO102)p35S-HP-AtCPP BamFW5′-CTGGAGCTCTTTTACCGAGGTTGGGCCTTGATCC-3′(SEQ ID NO103)p35S-HP-AtCPP SmaRV5′-GCAAGACCGGCAACAGGA-3′(SEQ ID NO108)pRD29APl5′-TTTAAGCTTGGAGCCATAGATGCAATTCAA-3′(SEQ ID NO161)pRD29APl5′-TTTAAGCTTGGAGCCATAGATGCAATTCAA-3′(SEQ ID NO161)Nosterm-RV5′-GCAAGACCGGCAACAGGA-3′(SEQ ID NO162)实施例35转基因植物的Northern分析从27个35S-AtCPP拟南芥种系(T3植物)的发育的叶片组织中提取总RNA。在每条道上加入大约10μg总RNA。先用P32标记的,单链的AtCPP翻译转录物做探针进行Northern blot,然后将杂交条带再用β-微管蛋白的cDNA做探针杂交,作为参照。扫描AtCPP和β-微管蛋白的杂交条带,用UN-Scan-It程序(SilkScientific,Utah,USA)进行定量分析,得到每个样品的这两个杂交条带的比值。野生型植物的比值设定为100%。并与转基因种系相比。二十七个种系中的二十一个与野生型相比都显示出AtCPP转录物的较高表达。其值是野生型的104%到282%。21个过表达种系中的五个种系(35,84,76,136,和156)的结果如图31所示。实施例36产生AtCPP的多克隆抗体通过在大肠杆菌中过表达AtCPP融合蛋白产生抗AtCPP的抗体。过表达载体,pMAL-p2,含有1175bp的malE基因,其位于AtCPP的上游,编码一个43KDa的麦芽糖结合蛋白(MBP)。将1275bp的BamHI/SmaI DNA片段插入到pMAL-p2的BamHI和SalI位点。用Klenow片段将SalI转变为平末端。然后将得到的融合蛋白MBP-AtCPP在DH5 中过表达,用MBP一步亲和法纯化,根据制造商(New England Biolab)的说明书操作。将含有MBP-AtCPP融合蛋白的细菌粗提物的可溶级分加到淀粉柱(1.5cm×10.0cm)上,用含有10mM麦芽糖的柱缓冲液(50mMTris-HCl,pH7.5,1mM EDTA,和200mM NaCl)洗脱蛋白。收集含有纯化的MBP-AtCPP融合蛋白的级分,用Centriprep-30浓缩器(Amicon)浓缩。所有纯化步骤都在4℃进行。要产生抗体,将纯化的融合蛋白进一步用SDS-PAGE分离,切割下相应于融合蛋白的考马斯亮兰染色条带。用抗MBP的抗体(购自NewEngland Biolab)通过Western分析验证融合蛋白。用电洗脱将蛋白从凝胶条带上洗脱,然后在Ribi佐剂(Ribi Immunochem)中乳化至终体积为1ml。在第一天将MBP-AtCPP蛋白注射到3kg的新西兰兔中,分别在第21天和第35天用175μg蛋白进行加强注射。最后一次注射后一个星期得到高滴度的抗血清。实施例37用抗AtCPP抗体对35S-AtCPP转基因种系进行Western blot分析进行Western分析检测转基因种系与野生型植物相比的AtCPP表达水平。用抗-Bip抗体,一种ER腔蛋白(Stressgen,Victoria,BC,Canada)作为参考。从五个ABAS种系和一个野生型对照的发育的叶片组织中提取总蛋白。扫描AtCPP和Bip的抗原蛋白条带,用UN-Scan-It程序(Silk Scientific,Utah,USA)进行定量分析,得到每个样品中两个蛋白条带的比值。设定野生型植物的比值为100%,并与转基因种系的比值相比。数据如图31所示,转基因种系与野生型植物相比AtCPP蛋白水平有所增加。实施例38转基因幼苗的ABA敏感性对每个9cm盘每个种系大约100个种子进行评价。将种子放置在不加ABA或加入1.0mM ABA的基本培养基(1/2MS)上。将盘在黑暗中在4℃冷藏3天,在22℃在24小时连续光照的条件下培育21天。评价各盘的发芽,子叶张开,真叶的发育和幼苗活力。评价幼苗在21天的生长中对于ABA的敏感性,其中敏感的幼苗停留在子叶阶段,没有真叶,根的生长受到抑制。野生型的对照Columbia植物具有两到三对真叶和一个发育良好的根系。如果只有少于1%的植物看起来像对照则将种系分类为ABA敏感的(ABAS),如果多于1%但是少于50%的植物看起来像对照则分类为中度ABA敏感的(ABAMS),或者如果多于50%看起来像对照则分类为ABA不敏感的(ABAwt)。例如,如果一个盘中有20个健康的幼苗而对照盘中有60个健康的幼苗,该种系就是对照的33%,分类为中度ABA敏感的。所有四种载体构建体(pBI121-AtCPP,pBI121 Hp-AtCPP,pRD29AHp-AtCPP,pRD29A-ATCPP)得到的拟南芥转基因种系对ABA的敏感性都有所增加,表示其具有胁迫耐受性。所有4种构建体的数据如图32所示。在用pBI121-AtCPP构建体转化的过表达AtCPP基因的种系中,58%(36个中的21个)分类为敏感的,另外30%(36个中的11个)分类为中度敏感的。再次检测了这些种系的T4和T5代,它们的ABA敏感性仍然存在,这表明ABA的敏感性是可遗传特性。在用pBI121-HP-AtCPP构建体转化的通过双链RNA抑制负调控AtCPP基因的种系中,15%(45个中的7个)分类为敏感的,31%(45个中的13个)分类为中度敏感的。图33显示了在ABA浓度范围内的发芽和幼苗发育的结果,说明了转基因种系对ABA的敏感性增加。比较了野生型和pRD29A-HP-AtCPP。在用pRD29AHp-AtCPP转化的种系中,70%(17个中的12个)显示出对ABA的高敏感性,24%(17个中的4个)显示出对ABA的中度敏感性。在用pRD29A-AtCPP转化的种系中29%(17个中的5个)显示出对ABA的高敏感性,12%(17个中的2个)显示出对ABA的中度敏感性。很明显所有4个转基因构建体都改变了ABA敏感性和ABA信号传导。实施例39干旱实验在重复水胁迫实验中,拟南芥植物以每4″或3″盆中五颗植物生长。所有盆都装满等量的均匀的预混的潮湿土壤。植物在16小时光照(150-200mol/m2/s),22℃和70%相对湿度的条件下生长。在第一次开花的当天开始进行干旱处理。首先将每个盆中的土壤水含量按重量平均,停止任何对植物的进一步供水。每天通过记录总盆重测量土壤水含量。在干旱处理结束的时候(4″盆的实验是6-9天,3″盆的实验是4-5天)收获植物,检测枝条干重。植物生长上的差异通过每克枝条干重的水分丧失分析。39a)pBI121-AtCPP,干旱胁迫筛选在长达8天的水分胁迫处理实验中,pBI121-AtCPP转基因种系的分析显示出土壤水含量增加和每克枝条生物质水分丧失减少的强烈趋势。在三天的水分胁迫处理后大部分种系相对于野生型对照其土壤水含量都有所增加,其中24个种系中的4个,146,149,156和97,显示出统计学显著的差异。除了其中一个种系(95)之外所有种系的每克枝条生物质的水分丧失量都较低,这些种系中的13个与野生型Columbia对照相比具有显著差异(图34)。所有这些显示出统计学显著的较低的每克枝条生物质水分丧失的种系也显示出ABA敏感性的增加。这在除了一个种系(95),ABAWt之外的所有种系中也都是一种强烈趋势,在干旱胁迫处理结束的时候达到较大的枝条生物质。这些种系中的7个,136,146,23,46,76,84和9与对照具有统计学显著的差异,p值=0.05。39b)pBI121-AtCPP,在水分胁迫处理期间每克枝条生物质的水分丧失使种系35,76,95和野生型对照生长并如上所述进行水胁迫处理。在干旱处理的第2天,第4天和第6天收获植物。ABAS种系,35和76,在所有三个时间点在相对于枝条干重的水分丧失上都显示出统计学显著的减少(表21)。另外,两个ABAS转基因种系具有增加的枝条生物质,其原因是叶片生物质的增加,并且在干旱处理期间都维持较高的土壤水含量。表21干旱胁迫处理后2,4和6天每枝条干重(g)的水分丧失(g)。粗体值表示与Columbia具有统计学显著的差异。 39c)pBI121-AtCPP,干旱胁迫和枝条的恢复用24个pBI121-AtCPP转基因种系中的20个评价水分胁迫耐受性和测定干旱处理后的恢复能力。在植物得到供水后6天施加干旱处理并使其生长6天。然后测定恢复的枝条鲜生物质。在干旱处理期间每天测定这些植物的土壤水含量,结果证实了前面所观察到的趋势。在实验39a中所有的在每克干重的水分丧失上显示出统计学显著的减少的ABA敏感性(ABAS)的种系在此实验中继续显示出比对照植物更大的土壤水含量(表22)。另外,表22表明干旱处理6天后所有ABA种系的恢复的枝条鲜生物质都显著大于Columbia。表22干旱处理的第3天的土壤水含量和干旱处理6天后恢复的枝条鲜重(粗体值与Columbia具有显著性差异,p=0.05) 39d)pBI121-AtCPP,胁迫处理后的种子产量用十个pBI121-AtCPP转基因种系检测干旱胁迫后在开花期间的种子产量,其中八个是ABAS。将植物以每4″盆一株生长并如上所述进行9天的干旱处理。使第二组植物生长并保持供水良好的条件,作为最佳组。干旱处理9天以后重新供水使之继续生长到种子成熟。干旱处理之后所有八个ABAS种系与对照相比都具有增加的产量,其是Columbia的109%到126%(表23)。干旱处理导致所有种系的产量与在最佳条件下生长的植物相比有所减少,包括对照。由干旱处理组得到的种子产量与相同种系在最佳条件下的产量相比的结果表明转基因植物与野生型种系相比保留了更大比例的最佳种子产量。表23干旱处理9天后的种子产量 39e)pBI121-AtCPP,最佳供水条件下的种子产量和生长用上述种系和其它一些种系进行最佳的良好供水条件下的生长和产量检测实验。结果表明ABAS种系的第一次开花阶段较短,具有更多的莲座形叶,但是成熟的时候转基因植物和Columbia在植物高度上没有差别。而且,ABAS转基因植物显示出相似的或是更高的种子产量,其值为野生型对照的95%到121%(图35)。39g)pRD29A-HP-AtCPP检测干旱耐受表型对17个转基因种系的分析鉴别出了7个候选干旱耐受种系(12,22,23,47,82,83,90),其是基于它们具有较高的土壤水含量和较低的每克枝条干重的水分丧失(表24)。所有7个干旱耐受的候选种系显示出强烈的ABA敏感性,不表现干旱耐受的种系也没有表现出ABA敏感性。表24.干旱处理3天后的土壤水含量和每克枝条干重的水分丧失。粗体值表示与Columbia野生型的值具有统计学上的差异(p=0.05) 实施例40 生长分析对大部分期望的构建体的生长分析设定为3个阶段。每个种系八株植物在3″盆中生长,每个盆一株植物,条件是22℃,16小时光照(150-200μmol/m2/s),70%相对湿度。在营养生长阶段(2周龄幼苗),抽苔生长阶段(首次开花)和开花中期生长阶段(自第一次开花起第5到7天)收获植物。而且,在一些生长实验中还可使其它组植物在4″盆中生长(每个盆一株植物,每个种系10株植物)至成熟并测定种子产量。40a)pBI121-AtCPP在最佳条件和生物胁迫条件下的生长在最佳生长条件下在发育的几个阶段检测pBI121-AtCPP转基因拟南芥的生长和生产力。虽然保持着最佳生长条件,但是植物还是受到一定程度的胁迫,后来测定其为土壤特性造成的。土壤的分析发现存在真菌污染,造成了生物胁迫。该胁迫可以通过将土壤在使用前进行灭菌来消除。分析了八个ABAS种系,两个具有正常ABA敏感性(ABAWt)的种系和野生型Columbia对照。图36显示了不同生长(开花中期阶段)的结果和产量参数,每种特性都表示为Columbia对照的百分比。结果表明它们具有增加的生长表型。这种增加的生长表型存在于所有生长阶段。在营养性阶段,所有ABAS转基因植物与野生型植物相比都显示出叶片数量的增加,八个种系中的四个具有统计学显著的差异。两个ABAWt种系与野生型植物相比显示出相同的或更少的叶片。在抽苔阶段ABAS转基因植物显示出叶片数量的增加,但是植物在此阶段(第一次开花)比对照要短。转基因植物的枝条鲜重比对照显著的增加,是野生型植物的80%到342%。ABAS转基因植物在花期上显示出一到三天的延迟。ABAWt转基因植物没有显示出花期的延迟,枝条鲜重的增加或高度的增加。在发育的开花阶段保持了其增加的生长表型(更多的叶片数量和更高的鲜重),但是,没有观察到能表明转基因植物抽苔较短的植物高度上的差异,而是最终达到了相同的植物高度。特别重要的是,观察到在这些条件(由于土壤中存在真菌而造成生物胁迫)下,ABAS转基因植物的产量显著地高,是野生型对照的120%到229%。ABAWt种系与Columbia对照相比产量相似或略微减少。这些发现表明ABAS转基因种系受到生物胁迫的影响较少。这些发现证明5中干旱耐受的种系在污染的土壤中生长到成熟。这些转基因种系的种子产量虽然与最佳条件下生长的相比大大减少,但是比Columbia野生型高2.5到4.5倍(表25)。表25在污染的土壤中生长的pBI121-AtCPP种系的种子产量。粗体值表示具有统计学差异,p=0.05 40b)pBI121-AtCPP早期幼苗生长对琼脂平板上生长的四个ABAS和一个ABAWt种系以及Columbia检测其早期幼苗生长。将一个种系中的二十个种子置于含有50%MS和1%蔗糖以及维生素的琼脂平板上,每个种系6个平板。平板倾斜放置,使得根可以向下生长。测量7天龄幼苗的根长度,并测定11天龄幼苗的枝条和根生物质。ABAS转基因种系中的两个明显具有更长的根,所有4个ABAS种系的枝条干重是对照的114%到123%,根干重是对照的116%到151%。结果,枝条生物质与根生物质的比值在转基因植物中略有降低。这些结果表面这些转基因植物的增加的生长在早期生长阶段,在发芽后不久非常明显,根的生长比枝条的生长增加的更多。在另一个不同的实验中,将幼苗拔出琼脂,用甲苯胺蓝对根进行染色显示其结构。图13显示出该转基因种系具有更广泛的侧向根系,这可以解释根生物质的增加。40c)pRD29A-HP-AtCPP最佳生长特性如上所述用10个种系进行最佳生长研究。营养性生长数据显示出两个种系(12和9)显著地具有更多的叶片,七个种系(12,22,23,47,82,9)显著地具有更大的枝条生物质。抽苔数据显示出八个种系(12,22,23,47,82,9,90,93)花期显著地延迟了一到两天,七个种系其第一次开花时间显著地比Columbia短。除了42和7以外所有种系都显著地具有更多的莲座形叶的数目和枝条FW,这种趋势维持到开花中期的收获阶段(图38)。但是到开花中期收获的时候,转基因种系和对照的植物高度没有显著差异。所有显示出生长增强的种系也显示出干旱耐受性和ABA敏感性。实施例41 超微结构pBI121-AtCPP用两个干旱耐受的和ABAS种系(35和76)以及Wt Columbia检测茎和根交叉部分在超微结构上的任何差异。在第一个节点上部获取成熟茎(开花10天的植物)的自由端部分,用甲苯胺蓝染色,保存于甘油中。转基因植物的茎与Columbia Wt相比具有更多密集的细胞结构,并且含有的维管束多一个或两个,这表明有更多的水分和营养传输系统。摘取叶片并测量鲜重。转基因叶片显著的更重一些,比相应的野生型对照重20-24%。这种增加被认为是由于较厚的叶片造成的。实施例42 寒冷胁迫实验pBI121-AtCPP对四个干旱耐受的,ABAS种系(156,23,35,76)和一个ABAWt(95)种系以及野生型Columbia进行了寒冷胁迫研究。植物在3″盆中生长,每盆一株植物,每个种系十个重复盆,在22℃生长10天(7天在琼脂平板上,4天在土壤中)。寒冷胁迫组转移到7℃放置5天,最佳组仍在22℃生长。在寒冷条件下放置5天后收获寒冷胁迫组和最佳组,测定枝条生物质。在最佳组(枝条鲜重多25到39%)和寒冷耐受组(枝条DW多18到44%)中,ABAS和干旱耐受种系比Columbia显著地具有更多的枝条生物质(表26)。八天寒冷胁迫的结果表明转基因种系和Columbia之间的差异更显著(枝条鲜重多53到61%)。这个结果表明转基因植物在面对寒冷胁迫的时候具有更大的植物活力和更强的能力。表26最佳的和寒冷胁迫的(5℃,5d)pBI121-AtCPP的枝条鲜重。粗体值表示具有统计学差异,p=0.05 实施例43在高温下的干旱胁迫pBI121-AtCPP如上所述进行干旱胁迫实验,除了光照温度为32℃(16小时),黑暗温度为22℃(8小时)。这些温度可以通过每天2小时的温度变化实现。实验包括四个ABAS和一个ABAWt种系以及Columbia。每天监控植物的水分丧失和土壤水含量,干旱处理5天后收获一半的植物,对另一半植物再次供水,使其恢复四天。收获枝条并测定枝条鲜重。实验结果(表27)表明先前鉴别的干旱耐受种系在高温下能维持其干旱耐受表型,并能在高温下从干旱胁迫中很好地恢复。表27第2天的土壤水含量和第2天的水分丧失/最终枝条干重,以及在32℃光照和22℃黑暗温度的干旱胁迫下5天后恢复的枝条FW。粗体值表明与Columbia对照具有显著差异。 实施例44 热胁迫和种子产量pBI121-AtCPP对两个ABAS种系和一个ABAWt种系以及Columbia检测了在其开花期间的热胁迫对最终种子产量的影响。如上所述,植物在4英寸盆中生长(一株/盆),在第一次开花后9天将温度从22℃经2小时升温到43℃,在43℃保持2小时。然后将温度经2小时降回到22℃,使植物在最佳条件下生长直至成熟。本实验的种子产量如表28所示。一个干旱耐受种系(35)的产量显著地比Columbia高。表28pBI121-AtCPP种系在第一次开花9天后进行两小时的43℃热胁迫后的种子产量。粗体值表示与Columbia具有统计学显著的差异。 评价了热休克对于处于早期开花阶段的pBI121-AtCPP种系的影响。将三个ABAS种系(76,136,97)和一个ABAWt种系(95)和一个Columbia野生型对照播种在128孔的平板上,每个种系一个平板。在早期开花阶段将平板暴露于46.8℃的温度下50分钟,然后恢复正常的生长条件。主要分生组织不继续生长被称作主要分生组织的死亡,对每个种系进行检测。数据如表29所示。表29由于热休克造成的分生组织死亡 实施例45气孔密度的测定pBI121AtCPP检测了两个ABAS种系(76和35)以及Columbia的叶片上表面和下表面的气孔密度。在完全张开的叶片#5的上表皮和下表皮上涂上指甲油,然后在显微镜下进行分析,对每8.7×10-8m2上的气孔数量进行计数。没有观察到转基因植物和Columbia的上表皮和下表皮的气孔具有显著差异(表30)。干旱耐受性的增加和水分丧失的减少不是因为叶片气孔数量的减少。表30pBI121AtCPP中完全张开的叶片#5上每8.7×10-8m2的离轴的和近轴的表皮上的气孔数量 实施例46.CPP共有序列本发明还包括CPP共有序列。共有序列是用BioEdit程序对CPP多肽和核酸序列以及同源序列进行排列产生的。共有序列中的\"x”代表任何氨基酸或核苷酸。优选地\"x”是保守性氨基酸或核苷酸取代。更优选的,\"x”是给定位点上最常见的氨基酸或核苷酸。例如,在SEQ ID NO168的位点145的氨基酸是脯氨酸,它出现的概率为66%。表31 BASF核酸的ClustalW分析1)BASF-AT1(SEQ ID NO116)2)BASF AT2(SEQ ID NO118)3)BASF-玉米(SEQ ID NO120)4)BASF-大豆(SEQ ID NO122)5)共有序列(SEQ ID NO163)102030405060....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF AT1------------------------------------------------------------ 1BASF AT2------------------------------------------------------------ 1BASF-玉米 ------------------------------------------------------------ 1BASF-大豆 CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTAACAACGCAGAGTACGCGGGGGGAGACG 60共有序列XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 60708090 100 110 120....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------ 1BASF_AT2------------------------------------------------------------ 1BASF-玉米 ------------------------------------------------------------ 1BASF-大豆 CATGGTTCTGAACTAATTGTTATAAATAATACCTAAAATTTTGAGTTGTCCTAAACATTG 120共有序列XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 120130 140 150 160 170 180....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------ 1BASF_AT2------------------------------------------------------------ 1BASF-玉米 ------------------------------------------------------------ 1BASF-大豆 GGGTTTAAACAAATCCAATCTCTCAATATAAAACCCAATGATCTCACCCTCACTCCGTTT 180共有序列XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 180 1570 1580 1590 1600 1610 1620....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------- 1275BASF_AT2 ------------------------------------------------------------- 1275BASF-玉米CCGATTCAGTGCTTCGATGGTGAGGGTTTTTGACATAGGAGTGTTGTCAAAGCTTTAGAGT 1100BASF-大豆------------------------------------------------------------- 1434共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 16201630 1640 1650 1660 1670 1680....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 1275BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 1275BASF-玉米GCATCTTTCGGTCAGGTGCAACAGCCTTTCGGTCATTGAGACATATAAGCGAATTAGCTA 1160BASF-大豆------------------------------------------------------------ 1434共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 16801690 1700 1710 1720 1730 1740....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 1275BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 1275BASF-玉米TTAAAAAAAACAGAACTGTTGCATCAAAAAAAAAAAAAAAAAAGAAACAAAAAAAAAAAA 1220BASF-大豆------------------------------------------------------------ 1434共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 17401750 1760 1770 1780 1790 1800....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 1275BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 1275BASF-玉米AAAAAAAAAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAGTGCTCTGCGTTGTTACCACTGCTTG 1280BASF-大豆------------------------------------------------------------ 1434共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 18001810 1820....|....|....|....|.BASF_AT1 --------------------- 1275BASF_AT2 --------------------- 1275BASF-玉米CCCTATAGTGATCGTATCAGA 1301BASF-大豆--------------------- 1434共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 1821表32 BASF氨基酸的ClustalW分析1)BASF_AT1(SEQ ID NO117)2)BASF_AT2(SEQ ID NO119)3)BASF-玉米(SEQ ID NO121)4)BASF-大豆(SEQ ID NO123)5)共有序列(SEQ ID NO164) 490 500 510 520 530 540....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米 KXQNCCIKKKKKETTKKKKKKKKKKKKKKKVLCVVTTACPIVIVS--------------- 429BASF-大豆 ------------------------------------------------------------ 400共有序列XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX--------------- 525550 560 570 580 590 600....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------- 424BASF_AT2------------------------------------------------------------- 424BASF-玉米 ------------------------------------------------------------- 429BASF-大豆 ------------------------------------------------------------- 400共有序列------------------------------------------------------------- 525610 620 630 640 650 660....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 525670 680 690 700 710 720....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 525730 740 750 760 770 780....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆 ------------------------------------------------------------- 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 525790 800 810 820 830 840....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BA_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 525850 860 870 880 890 900....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 525910 920 930 940 950 960....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ----------------------------------------------------------- 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 525970 980 990 1000 1010 1020....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 5251030 1040 1050 1060 1070 1080....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 5251090 1100 1110 1120 1130 1140....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 5251150 1160 1170 1180 1190 1200....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1 ----------------------------------------------------------- 424BASF_AT2 ------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆------------------------------------------------------------ 400共有序列 ------------------------------------------------------------ 5251210 1220 1230 1240 1250 1260....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米 ------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆 ------------------------------------------------------------ 400共有序列------------------------------------------------------------ 5251270 1280 1290 1300 1310 1320....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米 ------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆 ------------------------------------------------------------ 400共有序列------------------------------------------------------------ 5251330 1340 1350 1360 1370 1380....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|BASF_AT1------------------------------------------------------------ 424BASF_AT2------------------------------------------------------------ 424BASF-玉米 ------------------------------------------------------------ 429BASF-大豆 ------------------------------------------------------------ 400共有序列------------------------------------------------------------ 525Table33.种属核酸的ClustalW分析1)afc1(SEQ ID NO124)2)AT4g01320(SEQ ID NO126)3)AF007269(SEQ ID NO128)4)共有序列(SEQ ID NO165)102030405060....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320 ------------------------------------------------------------ 1AF007269 ATGGCGATTCCTTTCATGGAAACCGTCGTGGGTAAGCTTCAAAACCTTTTTCTGAGACAT 60共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 60708090 100 110 120....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320 ------------------------------------------------------------ 1AF007269 TTTACTATCCTGTTTCACTCATCGTATTTCGTTTTTGTTTGGGTTTTGCTTTCTGTGTTG 120共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 120130 140 150 160 170 180....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320 ------------------------------------------------------------ 1AF007269 TGTGTGTTGAGATTCCATGACTCGTTTGTTTCATATACCATCGTCTCTGCTTCTCGTTTC 180共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 180190 200 210 220 230 240....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320 ------------------------------------------------------------ 1AF007269 TAAATTTTGTTCTTTTCTAATAGTGCGTACCTTGATCTGAGGTTTTATTACTCCTACTAG 240共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 240250 260 270 280 290 300....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320 ------------------------------------------------------------ 1AF007269 TTTCTTGTCTTACTCGTGCGTTTGATTTGATTTGAGCTTATGTGATTTCATCATCTCTTC 300310 320 330 340 350 360....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4901320 ------------------------------------------------------------ 1AF007269 CTCGGTTTTAGAATGTACGGAGCTTCTCTGTTAACCAAAATCTAGGATTTGGGAAGAAAA 360共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 360370 380 390 400 410 420....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ----------------------------------------------------------- 1AT4g01320----------------------------------------------------------- 1AF007269 GTCGGAGTCTTTTTTTTCCTCATTCCCGATTGGAATTGAGAATCTTGAAATTTTTCTTT 420共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 420430 440 450 460 470 480....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ----------------------------------------------------------- 1AT4g01320----------------------------------------------------------- 1AF007269 GTTCAAGTCATACAGCTTGAGGTTTTGGGTTTCTTGTCAGGGTATTATTATGTTCGTGA 480共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 480490 500 510 520 530 540....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320------------------------------------------------------------ 1AF007269 CTGCAACTAGAGTTTTCTGGAGTTTTTTGAAATGGGTTTTGTGTTGTGGAACCGTATGTG 540共 有序列XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 540550 560 570 580 590 600....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------ 1AT4g01320------------------------------------------------------------ 1AF007269 AATGTTGCATCAAAACTCTTTCAGTGCTCCAATGTTTCCATCAGTAGTCAGCACAAGAGA 600共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 600610 620 630 640 650 660....|....|....|....|....|....|....|....|...|....|....|....|afc1 ------------------------------------------------------------- 1AT4g01320------------------------------------------------------------- 1AF007269 TCTTTTTTATATCTGGTTGATCAAAAAAGTAGATGATGTTATTGAATTTTCAGTGATGGAG 660共有序列 XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 660 表34.种属氨基酸的ClustalW分析1)afc1(SEQ ID NO125)2)AT4gO1320(SEQ ID NO127)3)AF007269(SEQ ID NO129)4)共有序列(SEQ ID NO166) 表35.PPI核酸的ClustalW分析1)PPI-AtCPP(SEQ ID NO97)2)PPI-BnCPP(SEQ ID NO109)3)PPI-大豆CPP(SEQ ID NO112)4)共有序列(SEQ ID NO167) 表36.PPI氨基酸的ClustalW分析1)PPI-ATCP(SEQ ID NO98)2)PPI-BnCPP(SEQ ID NO110)3)PPI-大豆CPP(SEQ ID NO113)4)共有序列(SEQ ID NO168) 表37.PPI/种属核酸的ClustalW分析1)PPI-AtCPP(SEQ ID NO97)2)PPI-BnCPP(SEQ ID NO109)3)PPI-大豆CPP(SEQ ID NO112)4)afc1(SEQ ID NO124)5)AT4g01320(SEQ ID NO126)6)AF007269(SEQ ID NO128)6)共有序列(SEQ ID NO170)10203040506070....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtcPP NA----------------------------------------------------------------------PPI-BncPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afC1 ----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269ATGGCGATTCCTTTCATGGAAACCGTCGTGGGTAAGCTTCAAAACCTTTTTCTGAGACATTTTACTATCC共有序列----------------------------------------------------------------------8090 100 110 120 130 140.|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NA----------ATGGCGTTTCCCTACATGGAAGCCGTTGTCGGATTTATGATATTAATGTACATTTTTGAAPPI-BncPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆cPP ----------ATGGCGTTTCCCTACATGGAAGCCGTTGTCCGATTTATGATATTAATGTACATTTTTGAAafc1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269TGTTTCACTCATCGTATTTCGTTTTTGTTTGGGTTTTGCTTTCTGTGTTGTGTGTGTTGAGATTCCATGA共有序列----------ATGGCGATTCCTTTCATGGAAACCGTCGT-GGTTTTATGATAT--ATGTACATTTTTGAA150 160170 180 190 200 210|....|....|....|.....|.. |||||||||PPI-AtCPP NAACTTACTTGGATG-TGCGACAACATACGGCCCTCAAACTTCCTACTCTTCCAAAGACTTTAGAGGGTGTTPPI-BnCPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ACTTACTTGGATG-TGCGACAACATAGGGCCCTCAAACTTCCTACTCTTCCAAAGACTTTAGAGGGTGTTafc1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269-CTCGTTTGTTTCATATACCATCGTCTCTGCTTCTCGTTTCTAAATTTTGTTCTTTTCTAATAGTGCGTA共有序列--CTATTTGGAT----TGGCAACATG----CCTCAA--CTTCCACTCTCC---AAACTTGGTGGTGTAT-220 230 240 250 260 270 280....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NAATCAGCCAAGAGAAATTTGAGAAATCTAGAGCCTATAGTCTTGATAAAAGCCACTTCCATTTTGTTCACGPPIBnCPP----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ATCAGCCAAGAGAAATTTGAGAAATCTAGAGCCTATAGTCTTGATAAAAGCCACTTCCATTTTGTTCACGafc1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269CCTTGATCTGAGGTTTTATTACTCCTACTAGTTTCTTGTCTTACTCGTG--CGTTT-GATTTGATTTGAG共有序列---AGCCAAGAGAAGTTTGAGAAATCTGAG--CTACAGTCTTGAAAAAG--CATT--CATTT-GTTCA-G290 300 310 320 330 340 350PP-AtCPP NA ....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnCPP AGTTTGTGACAATAGTGACAGACTCTACAATTTTGTACTTTGGGGTATTGCCCTGGTTTTGGAA-----GPPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afc1AGTTTGTGACAATAGTGACAGACTCTACAATTTTGTACTTTGGGGTATTGCCCTGGTTTTGGAA-----GAT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269----------------------------------------------------------------------共有序列CTTATGTGA-TTTCATCATCTCTTCCTCGGTTTTAGAATGTACGGAGCTTCTCTGTTAACCAAAATCTAGAGTTTGTA--CATAGT--TAGACTCT-CAATTTTGT-CTTTGGG---TTTGCCTGGTTTTGGAA-----G360 370 380 390 400 410 420PPI-AtcPP NA....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-BnCPP AAATCAGGAGATTTTATGACAATAGCTGGTTTCAATGCTGAGAATGAAATACTGCATACCCTTGCCTTCTPPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afc1AAATCAGGAGATTTTATGACAATAGCTGGTTTCAATGCTGAGAATGAAATACTGCATACCCTTGCCTTCTAT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269 ----------------------------------------------------------------------共有序列GATTTGGGAAGAAAAGTCGGAGTCTTTTTTTTCCTCATTCCCGATTGGAAATTGAGAATCTTGAAATTTTAT-TCGGG---TTTTGCAA------TTGGT-----CATCGAGAATGAAAT-CTGCATACC-TT--CTTCT430 440 450 460 470 480 490....|...|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NATAGCAGGGCTGATGATTTGGTCACAGATAACAGATTTGCCCTTTTCTCTGTACTCAACTTTT-----GTGPPI-BnCPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP TAGCAGGGCTGATGATTTGGTCACAGATAACAGATTTGCCCTTTTCTCTGTACTCAACTTTT-----GTGafc1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269TCTTTGTTCAAGTCATACAGCTTGAGGTTTTGGGTTTTCTTGTCAGGGTATTATTATGTTCGTGACTGCA共有序列T-GCGGT----ATGAT--GGTCACAGATA--CGATTTGCCTTTTCTT--GTACTCAACTTT------GTG500 510 520 530 540550 560....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NAATTGAGGCCCGTCATGGTTTTAATAAGCAAACAC--CATGGTTATTCTTTAGGGACATGCTTAAAGGAATPPI-BnCPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ATTGAGGCCCGTCATGGTTTTAATAAGCAAACAC--CATGGTTATTCTTTAGGGACATGCTTAAAGGAATafc1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269ACTAGAGTTTTCTGGAGTTTTTTGAAATGGGTTTTGTGTTGTGGAACCGTATGTGAATGTTGCATCAAAA共有序列AT--GAGTCCG-CATGGTTAAAACAAACA-------CATGGTT---TCTTAGGGACATG--TAAAGGAAT570 580 590 600 610 620 630....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|TTTCCTTTCTGTAATAATTGGTCCACCTATTGTGGCTGCAA------TCATTGTAA-TAGTACAGAAAGGPPI-AtCPP NA----------------------------------------------------------------------PPI-BnCPP TTTCCTTTCTGTAATAATTGGTCCACCTATTGTGGCTGCAA------TCATTGTAA-TAGTACAGAAAGGPPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afc1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 CTCTTTCAGTGCTCCAATGTTTCCATCAGTAGTCAGCACAAGAGATCTTTTTATATCTGGTTGATCAAAAAF007269TTCCTCTGTATA------G--CC-CCTATTGTG-CTGCAA-------T-ATTGTA--TAGT-CAGAAAGG共有序列 1270 1280 1290 1300 1310 1320 1330....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NA TACGCGGTG--GTCTTGTGAAACTACAGGAGGAGAATCTGTCAGCT----ATGAATACAGATCCTTGGTAPPI-BnCPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPPTACGCCGTG--GTCTTGTGAAACTACAGGAGGAGAATCTGTCAGCT----ATGAATACAGATCCTTGGTAafc1 ----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF0 07269 CCCTTCATATAGTCCTATACGTTTAGCATCAAAATATCTATTTTCTTAAGATAATAATATTTCTTTTATA共有序列 --T--------GTCTAGTGAA-CTACAGGAGAGAA---TGTCAGC-----ATGAA-ACAGATCCTTG-TA 1620 1630 1640 1650 1660 1670 1680....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NA ----------------------------------------------------------------------PPI-BnCPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afc1 ----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269 TTGATGATTCTGGATTCATCTTATTTCTGAGTTTTTCACATGGATGACTATTCTCCATTGAGTGTGAGCT共有序列 TTGATGATTCTGGATTCATCTTATTTCTGAGTTTTTCACATGGATGACTATTCTCCATTGAGTGTGAGCT1690 1700 1710 1720 1730 1740 1750....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NA ----------------------------------------------------------------------PPI-BnCPP----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afc1 ----------------------------------------------------------------------AT4g01320----------------------------------------------------------------------AF007269 TCAAAGTTTTTAGTTTTCGTGTTAAAAATTTAAAATTTGCTTCTCTGAGCATGAAGTTTCTATCTTTTTC共有序列 TCAAAGTTTTTAGTTTTCGTGTTAAAAATTTAAAATTTGCTTCTCTGAGCATGAAGTTTCTATCTTTTTC 1900 1910 1920 1930 1940 1950 1960....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NA ----------------------------------------------------------------------PPI-BnCPP----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afc1 ----------------------------------------------------------------------AT4g01320----------------------------------------------------------------------AF007269 TTTACAATTCACTGCTTGTTTGCATATGTTGTTACCAGACAATATAATCTCCCGCTTTTTTATGGCTATA共有序列 TTTACAATTCACTGCTTGTTTGCATATGTTGTTACCAGACAATATAATcTCCCGCTTTTTTATGGCTATA 表XX.PPI/种属核酸的ClustalW分析1)PPI-AtCpp(SEQ ID NO97)2)PPI-BnCPP(SEQ ID NO109)3)PPI-soyCPP(SEQ ID NO112)4)afc1(SEQ ID NO124)5)AT4g01320(SEQ ID NO126)6)AF007269(SEQ ID NO128)6)共有序列(SEQ ID NO170)10203040506070....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|PPI-AtCPP NA----------------------------------------------------------------------PPI-BnCPP ----------------------------------------------------------------------PPI-大豆CPP ----------------------------------------------------------------------afC1----------------------------------------------------------------------AT4g01320 ----------------------------------------------------------------------AF007269ATGGCGATTCCTTTCATGGAAACCGTCGTGGGTAAGCTTCAAAACCTTTTTCTGAGACATTTTACTATCC表38.PPI/种属氨基酸的ClustalW分析1)PPI-AtCPP(SEQ ID NO98)2)PPI-BnCPP(SEQ ID NOHO)3)PPI-SoyCPP(SEQ ID NO113)4)afc1(SEQ ID NO125)5)AT4g01320(SEQ ID NO127)6)AF007269(SEQ ID NO129)7)各种属共有序列(SEQ ID NO169) 实施例47 AtFT-B序列的克隆,载体构建以及在拟南芥中的过表达产生了显性阴性表型法尼基转移酶是由α-和β-亚基形成的异二聚体,其活性依赖于这些亚基之间的正确的二聚化。可以通过将AtFTB(SEQ IDNO1)的非全长形式在拟南芥中过表达获得增加的ABA敏感性。在推论实验中,全长AtFTB的过表达不能改变ABA敏感性。这些结果表明增加的ABA反应的表型可能是截短形式的AtFTB的显性阴性的结果。截短形式的AtFTB在体内与全长的内源亚基相比可能没有功能或者仅具有有限的功能。但是,Ft活性的降低却导致ABA敏感性的增加克隆将如SEQ ID NO1所述的法尼基转移酶序列以能在植物细胞中表达的有义方向克隆到合适的载体中并置于35S CaMV启动子的转录控制之下(pBI121衍生载体)。该载体命名为ΔN90AtFTB并命名为SEQ ID NO79。由SEQ ID NO1编码的蛋白缺少5’的270个核苷酸,因此不能编码5’末端的90个氨基酸。用SEQ IDNO86和SEQ ID NO171的引物对和本文其它部分所述的方法得到全长法尼基转移酶序列。将得到的序列,称为SEQ ID NO172,以能在植物细胞中表达的有义方向克隆到合适的载体中并置于35S CaMV启动子的转录控制之下(pBI121衍生载体)。该载体命名为pBI121-AtFTB,SEQ ID NO173。由SEQ ID NO172编码的蛋白质是全长多肽。农杆菌介导的转化,转基因种系的选择和ABA检测。将携带有上述的二元构建体的农杆菌菌株GV3101通过农杆菌介导的花浸渍转化转化到拟南芥中。在含有卡那霉素(50μg/l)的Murashige/Skoog(Sigma)平板上选择转化的拟南芥种系(T1)。然后将具有卡那霉素抗性的幼苗转移到土壤中。从单个的转基因种系收获T2种子进行ABA检测。Northern blot分析. 从两周龄的pBI121-ΔN90AtFTB的T2拟南芥植物,野生型Columbia和era1突变株植物中分离总RNA。在琼脂糖凝胶上分离之后,将RNA转移到硝酸纤维素膜上与32P标记的ΔN90AtFTB DNA探针杂交。pBI121-ΔN90AtFTB,而不是pBI121-AtFTB的过表达导致增加的ABA敏感性选择转基因植物继续进行第二代培养。将这两个构建体的T2种子用0.0,0.25,0.5和1.0μM ABA在基本MS-琼脂糖平板上进行ABA检测。在十五个pBI121-ΔN90AtFTB种系中,十个显示出增加的ABA敏感性的表型。在0.5M ABA的条件下,种子会发芽,但是这10个种系的幼苗的发育都延缓或是停滞了,表明具有典型的ABA超敏反应。相反,在十五个pBI121-AtFTB转基因种系中,除了一个种系外所有的种系在种子发芽和幼苗发育上都显示出正常的类似野生型的ABA反应。Northern blot分析表明在pBI121-ΔN90AtFTB的转基因种系中,表达水平比野生型对照的内源AtFTB转录水平更高。这表明这些转基因种系的ABA超敏性表型不是由于转录的共抑制造成的。增加的ABA反应与其它AtFTB负调控方法,例如反义和RNAi,发夹构建体的结果相关。有可能在ΔN90AtFTB转基因种系中观察到的ABA超敏反应是由显性阴性作用造成的。ΔN90AtFTB的高转录水平会产生许多AtFTB的截短形式,它们可以和内源的AtFTA结合,造成AtFTase活性的竞争性抑制。酵母双杂交相互作用实验进一步证实了截短的FT-B与内源FT-A的相互作用。用ΔN90AtFTB cDNA作为诱饵,发现所鉴别的相互作用克隆中大部分都编码FT-A。SEQ ID NO79 pBI121-ΔN90AtFTB截短的FT-B载体gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagaCgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaGGAICCgtccggaattcccgggtcgacccacgcgtccgggagattcagcgagataagcaattggattatctgatgaaaggcttaaggcagcttggtccgcagttttcttccttagatgctaatcgaccttggctttgttactggattcttcattcaatagctttgcttggggagactgtggatgatgaattagaaagcaatgccattgacttccttggacgctgccagggctctgaaggtggatacggtggtggtcctggccaacttccacatcttgcaactacttatgctgcagtgaatgcacttgttactttaggaggtgacaaagccctttcttcaattaatagagaaaaaatgtcttgtttttaagacggatgaaggatacaagtggaggtttcaggatgcatgatatgggagaaatggatgttcgtgcatgctacactgcaatttcggttgcaagcatcctaaatattatggatgatgaactcacccagggcctaggagattacatcttgagttgccaaacttatgaaggtggcattggaggggaacctggctccgaagctcacggtgggtatacctactgtggtttggctgctatgattttaatcaatgaggtcgaccgtttgaatttggattcattaatgaattgggctgtacatcgacaaggagtagaaatgggatttcaaggtaggacgaacaaattggtcgatggttgctacacattttggcaggcagccccttgtgttctactacaaagattatattcaaccaatgatcatgacgttcatggatcatcacatatatcagaagggacaaatgaagaacatcatgctcatgatgaagatgaccttgaagacagtgatgatgatgatgattctgatgaggacaacgatgaagattcagtgaatggtcacagaatccatcatacatccacctacattaacaggagaatgcaactggtttttgatagcctcggcttgcagagatatgtactcttgtgctctaagatccctgacggtggattcagagacaagccgaggaaaccccgtgacttctaccacacatgttactgcctgagcggcttgtctgtggctcagcacgcttggttaaaagacgaggacactcctcctttgactcgcgacattatgggtggctactcgaatctccttgaacctgttcaacttcttcacaacattgtcatggatcagtataatgaagctatcgagttcttctttaaagcagcatgaGGATCCctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgat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tatatcctgccaSEQ ID N086 FORWARD引物SacI位点5′aaaCCCGGGatgccagtagtaacccgc 3′SEQ ID NO171 REV引物BamHI位点5′aaaggatcctcatgctgctttaaagaagaactcgat3′SEQ ID NO172全长FT-BcccgggatgccagtagtaacccgcttgattcgtttgaagtgtgtagggctcagacttgaccggagtggactcaatcggcgaatctgtcacggaggacacggggaatcaacgcggcggagagtgatggaagagctttcaagcctaaccgtgagtcagcgcgagcaatttctggtggagaacgatgtgttcgggatctataattacttcgacgccagcgacgtttctactcaaaaatacatgatggagattcagcgagataagcaattggattatctgatgaaaggcttaaggcagcttggtccgcagttttcttccttagatgctaatcgaccttggctttgttactggattcttcattcaatagctttgcttggggagactgtggatgatgaattagaaagcaatgccattgacttccttggacgctgccagggctctgaaggtggatacggtggtggtcctggccaacttccacatcttgcaactacttatgctgcagtgaatgcacttgttactttaggaggtgacaaagccctttcttcaattaatagagaaaaaatgtcttgttttttaagacggatgaaggatacaagtggaggtttcaggatgcatgatatgggagaaatggatgttcgtgcatgctacactgcaatttcggttgcaagcatcctaaatattatggatgatgaactcacccagggcctaggagattacatcttgagttgccaaacttatgaaggtggcattggaggggaacctggctccgaagctcacggtgggtatacctactgtggtttggctgctatgattttaatcaatgaggtcgaccgtttgaatttggattcattaatgaattgggctgtacatcgacaaggagtagaaatgggatttcaaggtaggacgaacaaattggtcgatggttgctacacattttggcaggcagccccttgtgttctactacaaagattatattcaaccaatgatcatgacgttcatggatcatcacatatatcagaagggacaaatgaagaacatcatgctcatgatgaagatgaccttgaagacagtgatgatgatgatgattctgatgaggacaacgatgaagattcagtgaatggtcacagaatccatcatacatccacctacattaacaggagaatgcaactggtttttgatagcctcggcttgcagagatatgtactcttgtgctctaagatccctgacggtggattcagagacaagccgaggaaaccccgtgacttctaccacacatgttactgcctgagcggcttgtctgtggctcagcacgcttggttaaaagacgaggacactcctcctttgactcgcgacattatgggtggctactcgaatctccttgaacctgttcaacttcttcacaacattgtcatggatcagtataatgaagctatcgagttcttctttaaagcagcatgaggatccSEQ ID NO177由SEQ ID NO172编码的全长FT-B氨基酸序列MPVVTRLIRLKCVGLRLDRSGLNRRICHGGHGESTRRRVMEELSSLTVSQREQFLVENDVFGIYNYFDASDVSTQKYMMEIQRDKQLDYLMKGLRQLGPQFSSLDANRPWLCYWILHSIALLGETVDDELESNAIDFLGRCQGSEGGYGGGPGQLPHLATTYAAVNALVTLGGDKALSSINREKMSCFLRRMKDTSGGFRMHDMGEMDVRAcYTAISVASILNIMDDELTQGLGDYILSCQTYEGGIGGEPGSEAHGGYTYCGLAAMILINEVDRLNLDSLMNWAVHRQGVEMGFQGRTNKLVDGCYTFWQAAPCVLLQRLYSTNDHDVHGSSHISEGTNEEHHAHDEDDLEDSDDDDDSDEDNDEDSVNGHRIHHTSTYINRRMQLVFDSLGLQRYVLLCSKIPDGGFRDKPRKPRDFYHTCYCLSGLSVAQHAWLKDEDTPPLTRDIMGGYSNLLEPVQLLHNIVMDQYNEAIEFFFKAASEQ ID NO173 pBI121-AtFTB(全长载体过表达)gtttacccgccaatatatcctgtcaaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaattaagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaactgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagctaagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagctagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatccaattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaactgcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccgacggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaacctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatcgttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttcgcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacggccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatcaacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgttcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtggtggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtggctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgaccgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgctactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatggtaatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacggtgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggttgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgccaagcttgcatgcctgcagcccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatctacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtcaaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcagaagtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagagattggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaaatagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctcttacgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctactccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagaCttttcaacaaagggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtgaagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggccatcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagcatcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatctccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctatataaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccCCCGGGatgccagtagtaacccgcttgattcgtttgaagtgtgtagggctcagacttgaccggagtggactcaatcggcgaatctgtcacggaggacacggggaatcaacgcggcggagagtgatggaagagctttggagcctaaccgtgagtcagcgcgagcaatttctggtggggaacgatgtgttcgggatctataattacttcgacgccagcgacgtttctactcaaaaatacatgatggagattcagcgagataagcaattggattatctgatgaaaggcttaaggcagcttggtccgcagttttcttccttagatgctaatcgaccttggctttgttactggattcttcattcaatagctttgcttggggagactgtggatgatgaattagaaagcaatgccattgacttccttggacgctgccagggctctgaaggtggatacggtggtggtcctggccaacttccacatcttgcaactacttatgctgcagtgaatgcacttgttactttaggaggtgacaaagccctttcttcaattaatagagaaaaaatgtcttgttttttaagacggatgaaggatacaagtggaggtttcaggatgcatgatatgggagaaatggatgttcgtgcatgctacactgcaatttcggttgcaagcatcctaaatgttatggatgatgaactcacccagggcctaggagattacatcttgagttgccaaacttatgaaggtggcattggaggggaacctggctccgaagctcacggtgggtatacctactgtggtttggctgctatgattttaatcaatgaggtcgaccgtttgaatttggattcattaatgaattgggctgtacatcgacaaggagtagaaatgggatttcaaggtaggacgaacaaattggtcgatggttgctacacattttggcaggcagccccttgtgttctactacaaagattatattcaaccaatgatcatgacgttcatggatcatcacatatatcagaagggacaaatgaagaacatcatgctcatgatgaagatgaccttgaagacagtgatgatgatgatgattctgatgaggacaacgatgaagattcagtgaatggtcacagaatccatcatacatccacctacattaacaggagaatgcaactggtttttgatagcctcggcttgcagagatatgtactcttgtgctctaagatccctgacggtggattcagagacaagccgaggaaaccccgtgacttctaccacacatgttactgcctgagcggcttgtctgtggctcagcacgcttggttaaaagacgaggacactcctcctttgactcgcgacattatgggtggctactcgaatctccttgaacctgttcaacttcttcacaacattgtcatggatcagtataatgaagctatcgagttcttctttaaagcagcatgaGGATCCctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattataca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ID NO174(5′-aaaggatccatgacagagatcttcagtgacacca-3′)和SEQ ID NO175(5′-aaagagctctcagttcacaaatggaacaccaga-3′)的引物对生成该序列。该序列与已报道的序列号为AB007648,GI10177821(2000年12月)的序列相同。用分离序列产生用于表达编码蛋白或负调控表达的植物转化载体。用该载体通过本文所述的花浸渍方法转化拟南芥。如其它实施例中详细描述的那样进行转基因种系的分子和生理分析。分析包括分子研究例如PCR,Southern,Northern和Western分析;生理研究例如生长研究,对环境胁迫(干旱,盐,热,冷)的耐受性,对生物胁迫,营养胁迫的耐受性,以及生物化学分析。SEQ ID NO176atgacagagatcttcagtgacaccagcatcagacagttatctcaaatgctactatcactaatcttcttccacatatccgaatacattctagccatcaccattcacggagcatcaaacgtaactcttagttcgcttttaatcaccaagcattacgctttagcaatgcttctgtcgcttctcgaatacctaacggagattatcctcttcccggggctgaaacaacactggtgggtcagcaactttggactcataatgatcatcgttggggaaatcatcaggaaggcagcgataataacagcgggaagatcgttcactcacctcataaagatcaactacgaagagcatcacgggcttgtgactcatggtgtgtatagactaatgaggcatccaagttactgcggttttctcatctggtcggtcgggacacaagttatgctctgtaaccccgtttcagcagttgcgttcgcggttgtcgtgtggcggttttttgctcagagaataccgtacgaggagtattttctgaatcagttttttggggtacagtatctagagtatgcagagagtgttgcctctggtgttccatttgtgaactga参考文献Baskin,JM and Baskin,CC(1971)Can J Bot 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NO54-64的核酸。8.权利要求1的方法,其中所述化合物含有包含编码突变的法尼基转移酶β多肽或其片段的核酸序列的核酸分子。9.权利要求1的方法,其中所述化合物含有SEQ ID NO1,14,40,43,80-85,172中的任一个或其片段。10.权利要求8的方法,其中所述核酸编码长度少于314个氨基酸的多肽。11.权利要求8的方法,其中所述核酸分子编码能形成二聚体的多肽。12.权利要求11的方法,其中所述二聚体是异二聚体。13.权利要求1的方法,其中所述化合物含有编码与启动子可操作相连的CaaX基序的核酸。14.由权利要求1的方法生产的转基因植物。15.由权利要求1 4的转基因植物产生的种子,其中所述种子能产生与野生型植物相比具有改变表型的植物,所述改变的表型选自胁迫的耐受性增加,延迟衰老,ABA敏感性增加,产量增加,生产力增加,生物质增加。全文摘要本发明的新的构建体和方法提高了植物对于环境胁迫和衰老的耐受性。本文描述了编码植物法尼基转移酶的核酸,以及含有该核酸和蛋白的转基因植物和种子。还提供了天然法尼基转移酶的抑制剂,它的表达能够提高植物的干旱耐受性,提高植物对于衰老的抗性并改变其生长习性。文档编号C12N9/10GK1694962SQ03824709 公开日2005年11月9日 申请日期2003年8月26日 优先权日2002年8月27日发明者彼得·麦克库特, 马奇德·戈斯梅恩, 肖恩·卡特勒, 达里奥·伯尼塔 申请人:波夫曼斯种植公司